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万見
- EMDB-33117: Subtomogram average of 70S ribosome (30S aligned) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-33117
タイトルSubtomogram average of 70S ribosome (30S aligned)
マップデータ
試料
  • 複合体: 70S ribosome (30S aligned)
キーワード70S / bacterial / RIBOSOME
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.5 Å
データ登録者Eisenstein F / Danev R
資金援助 日本, 2件
OrganizationGrant number国
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)P20764 日本
Japan Science and Technology18069571 日本
引用
ジャーナル: Nat Methods / 年: 2023
タイトル: Parallel cryo electron tomography on in situ lamellae.
著者: Fabian Eisenstein / Haruaki Yanagisawa / Hiroka Kashihara / Masahide Kikkawa / Sachiko Tsukita / Radostin Danev /
要旨: In situ cryo electron tomography of cryo focused ion beam milled samples has emerged in recent years as a powerful technique for structural studies of macromolecular complexes in their native ...In situ cryo electron tomography of cryo focused ion beam milled samples has emerged in recent years as a powerful technique for structural studies of macromolecular complexes in their native cellular environment. However, the possibilities for recording tomographic tilt series in a high-throughput manner are limited, in part by the lamella-shaped samples. Here we utilize a geometrical sample model and optical image shift to record tens of tilt series in parallel, thereby saving time and gaining access to sample areas conventionally used for tracking specimen movement. The parallel cryo electron tomography (PACE-tomo) method achieves a throughput faster than 5 min per tilt series and allows for the collection of sample areas that were previously unreachable, thus maximizing the amount of data from each lamella. Performance testing with ribosomes in vitro and in situ on state-of-the-art and general-purpose microscopes demonstrated the high throughput and quality of PACE-tomo.
#1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2022
タイトル: Parallel cryo electron tomography on in situ lamellae.
著者: Eisenstein F / Yanagisawa H / Kashihara H / Kikkawa M / Tsukita S / Danev R
履歴
登録2022年3月24日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年4月20日-
マップ公開2022年4月20日-
更新2023年12月13日-
現状2023年12月13日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_33117.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_33117.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
2.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 432. Å		2.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 432. Å		2.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 432. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.16 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 2.6
最小 - 最大-2.6668684 - 10.523778
平均 (標準偏差)-0.000006134973 (±0.6345521)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 432.00003 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_33117_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #1

ファイルemd_33117_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #2

ファイルemd_33117_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : 70S ribosome (30S aligned)

全体名称: 70S ribosome (30S aligned)
要素
  • 複合体: 70S ribosome (30S aligned)

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超分子 #1: 70S ribosome (30S aligned)

超分子名称: 70S ribosome (30S aligned) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: DH5alpha

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1.8 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度式名称
30.0 mMHEPES-KOHHEPES-KOH
10.0 mMMgCl2Magnesium chloride
30.0 mMNH4ClAmmonium chloride
150.0 mMKClPotassium chloride
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡JEOL 2100F
詳細Microscope was actually a JEOL JEM-F200
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 2.1 sec. / 平均電子線量: 5.4 e/Å2
詳細: Tilt series were recorded in parallel using beam image shift
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 40.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 4.0 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: GATAN 626 SINGLE TILT LIQUID NITROGEN CRYO TRANSFER HOLDER

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4) / 使用したサブトモグラム数: 10540
抽出トモグラム数: 25 / 使用した粒子像数: 53982 / ソフトウェア - 名称: crYOLO
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4)
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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