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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of Arabidopsis thaliana CLCa | |||||||||
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機能・相同性 | ![]() nitrate:proton symporter activity / nitrate transmembrane transport / nitrate transmembrane transporter activity / response to nitrate / plant-type vacuole membrane / voltage-gated chloride channel activity / chloride transport / ![]() 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | ![]() ![]() | |||||||||
![]() | Ji S / Jin H / Kaiming Z / Mingxing W / Shanshan L / Long C | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structure of the plant nitrate transporter AtCLCa reveals characteristics of the anion-binding site and the ATP-binding pocket. 著者: Jin He / Mingxing Wang / Shanshan Li / Long Chen / Kaiming Zhang / Ji She / ![]() 要旨: Nitrate is one of the major nitrogen sources for most plants. Chloride channel (CLC) proteins mediate the transport and vacuole storage of nitrate in plants, but the structural basis of nitrate ...Nitrate is one of the major nitrogen sources for most plants. Chloride channel (CLC) proteins mediate the transport and vacuole storage of nitrate in plants, but the structural basis of nitrate transport by plant CLC proteins remains unknown. Here, we solved the cryo-EM structure of ATP-bound Arabidopsis thaliana CLCa (AtCLCa) at 2.8 Å resolution. Structural comparison between nitrate-selective AtCLCa and chloride-selective CLC-7 reveals key differences in the central anion-binding site. We observed that the central nitrate is shifted by ∼1.4 Å from chloride, which is likely caused by a weaker interaction between the anion and Pro160; the side chains of aromatic residues around the central binding site are rearranged to accommodate the larger nitrate. Additionally, we identified the ATP-binding pocket of AtCLCa to be located between the cytosolic cystathionine β-synthase domains and the N-terminus. The N-terminus may mediate the ATP inhibition of AtCLCa by interacting with both ATP and the pore-forming transmembrane helix. Together, our studies provide insights into the nitrate selectivity and ATP regulation of plant CLCs. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 483.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 14.8 KB 14.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 64.4 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 474.9 MB 474.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 7xa9MC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.82 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_33088_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_33088_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : AtCLCa
全体 | 名称: AtCLCa |
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要素 |
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-超分子 #1: AtCLCa
超分子 | 名称: AtCLCa / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
-分子 #1: Chloride channel protein CLC-a
分子 | 名称: Chloride channel protein CLC-a / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 88.17682 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MDEDGNLQIS NSNYNGEEEG EDPENNTLNQ PLLKRHRTLS STPLALVGAK VSHIESLDYE INENDLFKHD WRSRSKAQVF QYIFLKWTL ACLVGLFTGL IATLINLAVE NIAGYKLLAV GYYIAQDRFW TGLMVFTGAN LGLTLVATVL VVYFAPTAAG P GIPEIKAY ...文字列: MDEDGNLQIS NSNYNGEEEG EDPENNTLNQ PLLKRHRTLS STPLALVGAK VSHIESLDYE INENDLFKHD WRSRSKAQVF QYIFLKWTL ACLVGLFTGL IATLINLAVE NIAGYKLLAV GYYIAQDRFW TGLMVFTGAN LGLTLVATVL VVYFAPTAAG P GIPEIKAY LNGIDTPNMF GFTTMMVKIV GSIGAVAAGL DLGKEGPLVH IGSCIASLLG QGGPDNHRIK WRWLRYFNND RD RRDLITC GSASGVCAAF RSPVGGVLFA LEEVATWWRS ALLWRTFFST AVVVVVLRAF IEICNSGKCG LFGSGGLIMF DVS HVEVRY HAADIIPVTL IGVFGGILGS LYNHLLHKVL RLYNLINQKG KIHKVLLSLG VSLFTSVCLF GLPFLAECKP CDPS IDEIC PTNGRSGNFK QFNCPNGYYN DLSTLLLTTN DDAVRNIFSS NTPNEFGMVS LWIFFGLYCI LGLITFGIAT PSGLF LPII LMGSAYGRML GTAMGSYTNI DQGLYAVLGA ASLMAGSMRM TVSLCVIFLE LTNNLLLLPI TMFVLLIAKT VGDSFN LSI YEIILHLKGL PFLEANPEPW MRNLTVGELN DAKPPVVTLN GVEKVANIVD VLRNTTHNAF PVLDGADQNT GTELHGL IL RAHLVKVLKK RWFLNEKRRT EEWEVREKFT PVELAEREDN FDDVAITSSE MQLYVDLHPL TNTTPYTVVQ SMSVAKAL V LFRSVGLRHL LVVPKIQASG MSPVIGILTR QDLRAYNILQ AFPHLDKHKS GKARASGGSL EVLFQGPGGS GGSWSHPQF EK |
-分子 #2: NITRATE ION
分子 | 名称: NITRATE ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 6 / 式: NO3 |
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分子量 | 理論値: 62.005 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-NO3: |
-分子 #3: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 2 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-ATP: |
-分子 #4: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | ![]() |
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![]() | ![]() |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD![]() |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.84 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 2913673 |