+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-32830 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | GID subcomplex: Gid12 bound Substrate Receptor Scaffolding module | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | E3 ubiquitin Ligase / beta-propellor / LIGASE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein catabolic process in the vacuole / GID complex / Regulation of pyruvate metabolism / ascospore formation / traversing start control point of mitotic cell cycle / vacuole / negative regulation of gluconeogenesis / Neutrophil degranulation / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae YJM1133 (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Qiao S / Cheng JD / Schulman BA | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Cryo-EM structures of Gid12-bound GID E3 reveal steric blockade as a mechanism inhibiting substrate ubiquitylation. 著者: Shuai Qiao / Chia-Wei Lee / Dawafuti Sherpa / Jakub Chrustowicz / Jingdong Cheng / Maximilian Duennebacke / Barbara Steigenberger / Ozge Karayel / Duc Tung Vu / Susanne von Gronau / Matthias ...著者: Shuai Qiao / Chia-Wei Lee / Dawafuti Sherpa / Jakub Chrustowicz / Jingdong Cheng / Maximilian Duennebacke / Barbara Steigenberger / Ozge Karayel / Duc Tung Vu / Susanne von Gronau / Matthias Mann / Florian Wilfling / Brenda A Schulman / 要旨: Protein degradation, a major eukaryotic response to cellular signals, is subject to numerous layers of regulation. In yeast, the evolutionarily conserved GID E3 ligase mediates glucose-induced ...Protein degradation, a major eukaryotic response to cellular signals, is subject to numerous layers of regulation. In yeast, the evolutionarily conserved GID E3 ligase mediates glucose-induced degradation of fructose-1,6-bisphosphatase (Fbp1), malate dehydrogenase (Mdh2), and other gluconeogenic enzymes. "GID" is a collection of E3 ligase complexes; a core scaffold, RING-type catalytic core, and a supramolecular assembly module together with interchangeable substrate receptors select targets for ubiquitylation. However, knowledge of additional cellular factors directly regulating GID-type E3s remains rudimentary. Here, we structurally and biochemically characterize Gid12 as a modulator of the GID E3 ligase complex. Our collection of cryo-EM reconstructions shows that Gid12 forms an extensive interface sealing the substrate receptor Gid4 onto the scaffold, and remodeling the degron binding site. Gid12 also sterically blocks a recruited Fbp1 or Mdh2 from the ubiquitylation active sites. Our analysis of the role of Gid12 establishes principles that may more generally underlie E3 ligase regulation. #1: ジャーナル: Mol Cell / 年: 2021 タイトル: GID E3 ligase supramolecular chelate assembly configures multipronged ubiquitin targeting of an oligomeric metabolic enzyme 著者: Sherpa D / Chrustowicz J / Qiao S / Langlois CR / Hehl LA / Gottemukkala KV / Hansen FM / Karayel O / von Gronau S / Prabu JR / Mann M / Alpi AF / Schulman BA | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_32830.map.gz | 8.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-32830-v30.xml emd-32830.xml | 20.2 KB 20.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_32830.png | 76.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-32830.cif.gz | 8.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-32830 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-32830 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7wugMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_32830.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.09 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Gid12-SRS
全体 | 名称: Gid12-SRS |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Gid12-SRS
超分子 | 名称: Gid12-SRS / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
分子量 | 理論値: 392 KDa |
-分子 #1: Vacuolar import and degradation protein 28
分子 | 名称: Vacuolar import and degradation protein 28 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae YJM1133 (パン酵母) / 株: ATCC 204508 / S288c |
分子量 | 理論値: 105.658203 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) |
配列 | 文字列: MTVAYSLENL KKISNSLVGD QLAKVDYFLA PKCQIFQCLL SIEQSDGVEL KNAKLDLLYT LLHLEPQQRD IVGTYYFDIV SAIYKSMSL ASSFTKNNSS TNYKYIKLLN LCAGVYPNCG FPDLQYLQNG FIQLVNHKFL RSKCKIDEVV TIIELLKLFL L VDEKNCSD ...文字列: MTVAYSLENL KKISNSLVGD QLAKVDYFLA PKCQIFQCLL SIEQSDGVEL KNAKLDLLYT LLHLEPQQRD IVGTYYFDIV SAIYKSMSL ASSFTKNNSS TNYKYIKLLN LCAGVYPNCG FPDLQYLQNG FIQLVNHKFL RSKCKIDEVV TIIELLKLFL L VDEKNCSD FNKSKFMEEE REVTETSHYQ DFKMAESLEH IIVKISSKYL DQISLKYIVR LKVSRPASPS SVKNDPFDNK GV DCTRAIP KKINISNMYD SSLLSLALLL YLRYHYMIPG DRKLRNDATF KMFVLGLLKS NDVNIRCVAL KFLLQPYFTE DKK WEDTRT LEKILPYLVK SFNYDPLPWW FDPFDMLDSL IVLYNEITPM NNPVLTTLAH TNVIFCILSR FAQCLSLPQH NEAT LKTTT KFIKICASFA ASDEKYRLLL LNDTLLLNHL EYGLESHITL IQDFISLKDE IKETTTESHS MCLPPIYDHD FVAAW LLLL KSFSRSVSAL RTTLKRNKIA QLLLQILSKT YTLTKECYFA GQDFMKPEIM IMGITLGSIC NFVVEFSNLQ SFMLRN GII DIIEKMLTDP LFNSKKAWDD NEDERRIALQ GIPVHEVKAN SLWVLRHLMY NCQNEEKFQL LAKIPMNLIL DFINDPC WA VQAQCFQLLR NLTCNSRKIV NILLEKFKDV EYKIDPQTGN KISIGSTYLF EFLAKKMRLL NPLDTQQKKA MEGILYII V NLAAVNENKK QLVIEQDEIL NIMSEILVET TTDSSSYGND SNLKLACLWV LNNLLWNSSV SHYTQYAIEN GLEPGHSPS DSENPQSTVT IGYNESVAGG YSRGKYYDEP DGDDSSSNAN DDEDDDNDEG DDEGDEFVRT PAAKGSTSNV QVTRATVERC RKLVEVGLY DLVRKNITDE SLSVREKART LLYHMDLLLK VK UniProtKB: Vacuolar import and degradation protein 28 |
-分子 #2: Glucose-induced degradation protein 8
分子 | 名称: Glucose-induced degradation protein 8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 株: ATCC 204508 / S288c |
分子量 | 理論値: 51.789152 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) |
配列 | 文字列: MTISTLSNET TKSGSCSGQG KNGGKDFTYG KKCFTKEEWK EQVAKYSAMG ELYANKTIHY PLKIQPNSSG GSQDEGFATI QTTPIEPTL PRLLLNYFVS MAYEDSSIRM AKELGFIRNN KDIAVFNDLY KIKERFHIKH LIKLGRINEA MEEINSIFGL E VLEETFNA ...文字列: MTISTLSNET TKSGSCSGQG KNGGKDFTYG KKCFTKEEWK EQVAKYSAMG ELYANKTIHY PLKIQPNSSG GSQDEGFATI QTTPIEPTL PRLLLNYFVS MAYEDSSIRM AKELGFIRNN KDIAVFNDLY KIKERFHIKH LIKLGRINEA MEEINSIFGL E VLEETFNA TGSYTGRTDR QQQQQQQQFD IDGDLHFKLL LLNLIEMIRS HHQQENITKD SNDFILNLIQ YSQNKLAIKA SS SVKKMQE LELAMTLLLF PLSDSADSGS IKLPKSLQNL YSISLRSKIA DLVNEKLLKF IHPRIQFEIS NNNSKFPDLL NSD KKIITQ NFTVYNNNLV NGSNGTKITH ISSDQPINEK MSSNEVTAAA NSVWLNQRDG NVGTGSAATT FHNLENKNYW NQTS ELLSS SNGKEKGLEF NNYYSSEFPY EPRLTQIMKL WCWCENQLHH NQIGVPRVEN UniProtKB: Glucose-induced degradation protein 8 |
-分子 #3: Vacuolar import and degradation protein 30
分子 | 名称: Vacuolar import and degradation protein 30 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
分子量 | 理論値: 108.28768 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) |
配列 | 文字列: MSEYMDDVDR EFINCLFPSY LLQQPVAYDL WILYLQHRKL FHKLKNTNLI NADENPTGVG MGRTKLTALT RKEIWSKLMN LGVLGTISF EAVNDDYLIQ VYKYFYPDVN DFTLRFGVKD SNKNSVRVMK ASSDMRKNAQ ELLEPVLSER EMALNSNTSL E NDRNDDDD ...文字列: MSEYMDDVDR EFINCLFPSY LLQQPVAYDL WILYLQHRKL FHKLKNTNLI NADENPTGVG MGRTKLTALT RKEIWSKLMN LGVLGTISF EAVNDDYLIQ VYKYFYPDVN DFTLRFGVKD SNKNSVRVMK ASSDMRKNAQ ELLEPVLSER EMALNSNTSL E NDRNDDDD DDDDDDDDDD DDDDDDDESD LESLEGEVDT DTDDNNEGDG SDNHEEGGEE GSRGADADVS SAQQRAERVA DP WIYQRSR SAINIETESR NLWDTSDKNS GLQYYPPDQS PSSSFSSPRV SSGNDKNDNE ATNVLSNSGS KKKNSMIPDI YKI LGYFLP SRWQAQPNNS LQLSQDGITH LQPNPDYHSY MTYERSSASS ASTRNRLRTS FENSGKVDFA VTWANKSLPD NKLT IFYYE IKVLSVTSTE SAENSNIVIG YKLVENELME ATTKKSVSRS SVAGSSSSLG GSNNMSSNRV PSTSFTMEGT QRRDY IYEG GVSAMSLNVD GSINKCQKYG FDLNVFGYCG FDGLITNSTE QSKEYAKPFG RDDVIGCGIN FIDGSIFFTK NGIHLG NAF TDLNDLEFVP YVALRPGNSI KTNFGLNEDF VFDIIGYQDK WKSLAYEHIC RGRQMDVSIE EFDSDESEED ETENGPE EN KSTNVNEDLM DIDQEDGAAG NKDTKKLNDE KDNNLKFLLG EDNRFIDGKL VRPDVNNINN LSVDDGSLPN TLNVMIND Y LIHEGLVDVA KGFLKDLQKD AVNVNGQHSE SKDVIRHNER QIMKEERMVK IRQELRYLIN KGQISKCINY IDNEIPDLL KNNLELVFEL KLANYLVMIK KSSSKDDDEI ENLILKGQEL SNEFIYDTKI PQSLRDRFSG QLSNVSALLA YSNPLVEAPK EISGYLSDE YLQERLFQVS NNTILTFLHK DSECALENVI SNTRAMLSTL LEYNAFGSTN SSDPRYYKAI NFDEDVLNL UniProtKB: BJ4_G0038950.mRNA.1.CDS.1 |
-分子 #4: Vacuolar import and degradation protein 24
分子 | 名称: Vacuolar import and degradation protein 24 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
分子量 | 理論値: 41.291934 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) |
配列 | 文字列: MINNPKVDSV AEKPKAVTSK QSEQAASPEP TPAPPVSRNQ YPITFNLTST APFHLHDRHR YLQEQDLYKC ASRDSLSSLQ QLAHTPNGS TRKKYIVEDQ SPYSSENPVI VTSSYNHTVC TNYLRPRMQF TGYQISGYKR YQVTVNLKTV DLPKKDCTSL S PHLSGFLS ...文字列: MINNPKVDSV AEKPKAVTSK QSEQAASPEP TPAPPVSRNQ YPITFNLTST APFHLHDRHR YLQEQDLYKC ASRDSLSSLQ QLAHTPNGS TRKKYIVEDQ SPYSSENPVI VTSSYNHTVC TNYLRPRMQF TGYQISGYKR YQVTVNLKTV DLPKKDCTSL S PHLSGFLS IRGLTNQHPE ISTYFEAYAV NHKELGFLSS SWKDEPVLNE FKATDQTDLE HWINFPSFRQ LFLMSQKNGL NS TDDNGTT NAAKKLPPQQ LPTTPSADAG NISRIFSQEK QFDNYLNERF IFMKWKEKFL VPDALLMEGV DGASYDGFYY IVH DQVTGN IQGFYYHQDA EKFQQLELVP SLKNKVESSD CSFEFA UniProtKB: Vacuolar import and degradation protein 24 |
-分子 #5: HLJ1_G0042170.mRNA.1.CDS.1
分子 | 名称: HLJ1_G0042170.mRNA.1.CDS.1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
分子量 | 理論値: 81.564578 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) |
配列 | 文字列: MATGRIQFAV STPCNTKGKP SGYRLFEFKN DRLALVPSER GCTKVDVNAN IQAFCYLRPN GRDTSISPDA THILDSCDYM VLAKSNGFI EIISNYQYKI KNGLRLAPSY ILRCTPEDFE SNFFSDYMIA GLEYSQGLLY CCMCSGRIYV FVMNLPTDYI Q YKNMYNPM ...文字列: MATGRIQFAV STPCNTKGKP SGYRLFEFKN DRLALVPSER GCTKVDVNAN IQAFCYLRPN GRDTSISPDA THILDSCDYM VLAKSNGFI EIISNYQYKI KNGLRLAPSY ILRCTPEDFE SNFFSDYMIA GLEYSQGLLY CCMCSGRIYV FVMNLPTDYI Q YKNMYNPM FPDCFFKVHH DNNTTHSSEE EKLFEGSTRY TGRSCSKHIC YFLLPIEPSH LRSSPVVSSF CNMYQGLPIY RP SMYLHIE RGISTFHINP LDRFCFMTVS PRSPLFIRKI ILPLTYVTFL STFISLKNSI QGDTCGEILS WDNVAQQNGF GSL FSWISN KFTFDTDIIN STIWDDIVKY SGTGMLDSGI VWKQRQGHAK DDIYELFHTQ DMLGSSRRNS SFSTASSEPR PLSR RRRES FQALTRDAFR ERMDVPCSTK WELDSFIRGL RRNTFMVDFE IVEKISHRNG NDGVNEDDNT TDESDETMTS FLTDN YKKM DIVCIDHFVT LSAFRPRYYD EPIIKIDSLS NKNGSENGTN EEEWAESQMK VDGQVIDDET AQFKQALGNL CSFKKL FML DDSLCFILDT HGVLLINRFE IKNTKNLLRN SKDTIRIIPH DFGLINDTIV IINDIDVGTD NVCALTFHLV VTSMAGE IT VLKGEFFKNC RLGRIKLCDS LKLNRKDRFV DKLALIDYDG LNAQKRRLDY DEKDLYTFIV KKVKRD UniProtKB: YDL176W isoform 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.25 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 6.5 / 詳細: 25mM MES pH6.5 + 500mM NaCl + 1mM DTT |
グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 39 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 1.335 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |