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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3144 | |||||||||
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タイトル | Electron cryo-microscopy of chikungunya virus in complex with neutralizing antibody Fab CHK265 | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of chikungunya virus in complex with Fab | |||||||||
試料 |
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キーワード | chikungunya virus / neutralizing antibody Fab | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 T=4 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / structural molecule activity / virion membrane / proteolysis ...T=4 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / structural molecule activity / virion membrane / proteolysis / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) / Chikungunya virus (チクングニヤウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 16.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Fox JM / Long F / Edeling MA / Lin H / Duijl-Richter M / Fong RH / Kahle KM / Smit JM / Jin J / Simmons G ...Fox JM / Long F / Edeling MA / Lin H / Duijl-Richter M / Fong RH / Kahle KM / Smit JM / Jin J / Simmons G / Doranz BJ / Crowe JE / Fremont DH / Rossmann MG / Diamond MS | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2015 タイトル: Broadly Neutralizing Alphavirus Antibodies Bind an Epitope on E2 and Inhibit Entry and Egress. 著者: Julie M Fox / Feng Long / Melissa A Edeling / Hueylie Lin / Mareike K S van Duijl-Richter / Rachel H Fong / Kristen M Kahle / Jolanda M Smit / Jing Jin / Graham Simmons / Benjamin J Doranz / ...著者: Julie M Fox / Feng Long / Melissa A Edeling / Hueylie Lin / Mareike K S van Duijl-Richter / Rachel H Fong / Kristen M Kahle / Jolanda M Smit / Jing Jin / Graham Simmons / Benjamin J Doranz / James E Crowe / Daved H Fremont / Michael G Rossmann / Michael S Diamond / 要旨: We screened a panel of mouse and human monoclonal antibodies (MAbs) against chikungunya virus and identified several with inhibitory activity against multiple alphaviruses. Passive transfer of ...We screened a panel of mouse and human monoclonal antibodies (MAbs) against chikungunya virus and identified several with inhibitory activity against multiple alphaviruses. Passive transfer of broadly neutralizing MAbs protected mice against infection by chikungunya, Mayaro, and O'nyong'nyong alphaviruses. Using alanine-scanning mutagenesis, loss-of-function recombinant proteins and viruses, and multiple functional assays, we determined that broadly neutralizing MAbs block multiple steps in the viral lifecycle, including entry and egress, and bind to a conserved epitope on the B domain of the E2 glycoprotein. A 16 Å resolution cryo-electron microscopy structure of a Fab fragment bound to CHIKV E2 B domain provided an explanation for its neutralizing activity. Binding to the B domain was associated with repositioning of the A domain of E2 that enabled cross-linking of neighboring spikes. Our results suggest that B domain antigenic determinants could be targeted for vaccine or antibody therapeutic development against multiple alphaviruses of global concern. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3144.map.gz | 99.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3144-v30.xml emd-3144.xml | 10.9 KB 10.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd-3144-CHIKV_CHK265_500by500.tif | 1.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3144 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3144 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3144_validation.pdf.gz | 263.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3144_full_validation.pdf.gz | 262.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3144_validation.xml.gz | 6.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3144 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3144 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3144.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of chikungunya virus in complex with Fab | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.68 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Electron Cryo-microscopy of Chikungunya virus 181/25 in complex w...
全体 | 名称: Electron Cryo-microscopy of Chikungunya virus 181/25 in complex with murine neutralizing antibody Fab CHK265 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Electron Cryo-microscopy of Chikungunya virus 181/25 in complex w...
超分子 | 名称: Electron Cryo-microscopy of Chikungunya virus 181/25 in complex with murine neutralizing antibody Fab CHK265 タイプ: sample / ID: 1000 集合状態: one Fab binds to one envelope protein on the surface of virus Number unique components: 2 |
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-超分子 #1: Chikungunya virus
超分子 | 名称: Chikungunya virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: Chikungunya virus strain TSI-GSD-218 / NCBI-ID: 37124 / 生物種: Chikungunya virus Sci species strain: strain TSI-GSD-218 or vaccine strain 181/25 ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No / Syn species name: Chikungunya virus strain TSI-GSD-218 |
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宿主 | 生物種: Aedes albopictus (ヒトスジシマカ) / 別称: INVERTEBRATES |
Host system | 生物種: Chlorocebus aethiops (ミドリザル) / 組換細胞: Vero cells |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 直径: 700 Å / T番号(三角分割数): 4 |
-分子 #1: Fab CHK265
分子 | 名称: Fab CHK265 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 240 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) / 別称: Mouse / 細胞: hybridoma |
分子量 | 実験値: 50 KDa / 理論値: 50 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.2 / 詳細: PBS |
グリッド | 詳細: 400 mesh ultrathin holey carbon copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 110 K / 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 手法: Blot for 10 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 100,000 times magnification |
日付 | 2015年3月10日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 500 / 平均電子線量: 22 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 78354 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 47000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | The particles were mannually selected using the program EMAN2. |
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CTF補正 | 詳細: Each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 16.9 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: JSPR / 使用した粒子像数: 5828 |