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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-31248 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | recombinant Alfalfa Mosaic virus coat protein virus-like particle (rAMV-CP VLP) | |||||||||
マップデータ | Alfafa Mosaic virus-like protein T=1 | |||||||||
試料 | Alfalfa mosaic virus != Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) Alfalfa mosaic virus
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キーワード | alfalfa mosaic virus / virus-like particle / VIRUS LIKE PARTICLE | |||||||||
| 機能・相同性 | Coat protein, Ilarvirus / Ilarvirus coat protein / T=3 icosahedral viral capsid / viral nucleocapsid / ribonucleoprotein complex / RNA binding / Capsid protein 機能・相同性情報 | |||||||||
| 生物種 | Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) (ウイルス) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Jeong H / Lee S | |||||||||
引用 | ジャーナル: Biochem Biophys Res Commun / 年: 2021タイトル: Characterization of alfalfa mosaic virus capsid protein using Cryo-EM. 著者: Hyeongseop Jeong / Youngmin Park / Sooji Song / Kyungmin Min / Jae-Sung Woo / Young-Ho Lee / Eun-Ju Sohn / Sangmin Lee / ![]() 要旨: VLPs are virus-like particles that comprise viral capsid proteins that can self-assemble and mimic the shape and size of real viral particles; however, because they do not contain genetic material ...VLPs are virus-like particles that comprise viral capsid proteins that can self-assemble and mimic the shape and size of real viral particles; however, because they do not contain genetic material they cannot infect host cells. VLPs have great potential as safe drug/vehicle candidates; therefore, they are gaining popularity in the field of preventive medicine and therapeutics. Indeed, extensive studies are underway to examine their role as carriers for immunization and as vehicles for delivery of therapeutic agents. Here, we examined the possibility of developing VLP-utilizing technology based on an efficient VLP production process and high-resolution structural analysis. Nicotiana benthamiana was used as an expression platform to produce the coat protein of the alfalfa mosaic virus (AMV-CP). About 250 mg/kg of rAMV-CP was produced from Nicotiana benthamiana leaves. Structural analysis revealed that the oligomeric status of rAMV-CP changed according to the composition and pH of the buffer. Size exclusion chromatography and electron microscopy analysis confirmed the optimal conditions for rAMV-CP VLP formation, and a 2.4 Å resolution structure was confirmed by cryo-EM analysis. Based on the efficient protein production, VLP manufacturing technology, and high-resolution structure presented herein, we suggest that rAMV-CP VLP is a useful platform for development of various new drugs. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_31248.map.gz | 482.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-31248-v30.xml emd-31248.xml | 9.4 KB 9.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_31248.png | 90.6 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-31248.cif.gz | 4.9 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31248 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31248 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_31248_validation.pdf.gz | 556 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_31248_full_validation.pdf.gz | 555.5 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_31248_validation.xml.gz | 8.2 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_31248_validation.cif.gz | 9.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31248 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31248 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_31248.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Alfafa Mosaic virus-like protein T=1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.865 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Alfalfa mosaic virus
| 全体 | 名称: Alfalfa mosaic virus (ウイルス) |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1: Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison)
| 超分子 | 名称: Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 / NCBI-ID: 12323 生物種: Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
|---|
-分子 #1: Capsid protein
| 分子 | 名称: Capsid protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) (ウイルス) |
| 分子量 | 理論値: 28.373334 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: CMQVWPPIGK KKFETLSYLP DLTGSMSSSQ KKAGGKAGKP TKRSQNYAAL RKAQLPKPPA LKVPVVKPTN TILPQTGCVW QSLGTPLSL SSFNGLGVRF LYSFLKDFAG PRILEEDLIY RMVFSITPSY AGTFCLTDDV TTEDGRAVAH GNPMQEFPHG A FHANEKFG ...文字列: CMQVWPPIGK KKFETLSYLP DLTGSMSSSQ KKAGGKAGKP TKRSQNYAAL RKAQLPKPPA LKVPVVKPTN TILPQTGCVW QSLGTPLSL SSFNGLGVRF LYSFLKDFAG PRILEEDLIY RMVFSITPSY AGTFCLTDDV TTEDGRAVAH GNPMQEFPHG A FHANEKFG FELVFTAPTH AGMQNQNFKH SYAVALCLDF DAQPEGSKNP SYRFNEVWVE RKAFPRAGPL RSLITVGLLD EA DDLDRHP RGHHHHHH UniProtKB: Capsid protein |
-分子 #2: water
| 分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 30 / 式: HOH |
|---|---|
| 分子量 | 理論値: 18.015 Da |
| Chemical component information | ![]() ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 7 |
|---|---|
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-
画像解析
| 初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
|---|---|
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 279755 |
| 初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
| 最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
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Alfalfa mosaic virus (strain 425 / isolate Madison) (ウイルス)
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