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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29755 | |||||||||
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タイトル | Cryptosporidium parvum sporozoite basal end | |||||||||
マップデータ | Cryptosporidium parvum sporozoite basal end | |||||||||
試料 |
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キーワード | Conoid / Parasite / basal / CELL INVASION | |||||||||
生物種 | Cryptosporidium parvum Iowa (小形クリプトスポリジウム) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Martinez M / Chang Y-W / Mageswaran SK | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Origin and arrangement of actin filaments for gliding motility in apicomplexan parasites revealed by cryo-electron tomography. 著者: Matthew Martinez / Shrawan Kumar Mageswaran / Amandine Guérin / William David Chen / Cameron Parker Thompson / Sabine Chavin / Dominique Soldati-Favre / Boris Striepen / Yi-Wei Chang / 要旨: The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that ...The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that translocate host-attached surface adhesins along the parasite cell body. Actin filaments (F-actin) generated by Formin1 play a central role in this critical parasitic activity. However, their subcellular origin, path and ultrastructural arrangement are poorly understood. Here we used cryo-electron tomography to image motile Cryptosporidium parvum sporozoites and reveal the cellular architecture of F-actin at nanometer-scale resolution. We demonstrate that F-actin nucleates at the apically positioned preconoidal rings and is channeled into the pellicular space between the parasite plasma membrane and the inner membrane complex in a conoid extrusion-dependent manner. Within the pellicular space, filaments on the inner membrane complex surface appear to guide the apico-basal flux of F-actin. F-actin concordantly accumulates at the basal end of the parasite. Finally, analyzing a Formin1-depleted Toxoplasma gondii mutant pinpoints the upper preconoidal ring as the conserved nucleation hub for F-actin in Cryptosporidium and Toxoplasma. Together, we provide an ultrastructural model for the life cycle of F-actin for apicomplexan gliding motility. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29755.map.gz | 482.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29755-v30.xml emd-29755.xml | 10.7 KB 10.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_29755.png | 176.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29755 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29755 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29755_validation.pdf.gz | 541.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_29755_full_validation.pdf.gz | 541.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29755_validation.xml.gz | 4.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29755_validation.cif.gz | 5.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29755 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29755 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29755.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 842.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED BYTE | ||||||||||||||||||||
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注釈 | Cryptosporidium parvum sporozoite basal end | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 10.6 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Cryptosporidium parvum sporozoite basal end
全体 | 名称: Cryptosporidium parvum sporozoite basal end |
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要素 |
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-超分子 #1: Cryptosporidium parvum sporozoite basal end
超分子 | 名称: Cryptosporidium parvum sporozoite basal end / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Cryptosporidium parvum Iowa (小形クリプトスポリジウム) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 310 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: Front blot for 4 seconds before plunging. |
詳細 | Excysted sporozoites from isolated oocysts |
切片作成 | その他: NO SECTIONING |
位置合わせマーカー | Manufacturer: Ted Pella, Inc / 直径: 10 nm |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
ソフトウェア | 名称: SerialEM (ver. 3.8) |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 61 / 平均露光時間: 0.4 sec. / 平均電子線量: 2.3 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 33000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Raw frames were gain normalized in serialEM and motion corrected using the alignframes command in IMOD |
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最終 再構成 | アルゴリズム: BACK PROJECTION / ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.11.5) / 使用した粒子像数: 61 |