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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29423 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of Escherichia coli CedA in complex with transcription initiation complex | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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キーワード | Escherichia coli / CedA / initiation complex / TRANSCRIPTION / TRANSFERASE-DNA complex | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation ...RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / cell division / response to antibiotic / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.76 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Liu M / Vassyliev N / Nudler E | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2024 タイトル: General transcription factor from Escherichia coli with a distinct mechanism of action. 著者: Nikita Vasilyev / Mengjie M J Liu / Vitaly Epshtein / Ilya Shamovsky / Evgeny Nudler / 要旨: Gene expression in Escherichia coli is controlled by well-established mechanisms that activate or repress transcription. Here, we identify CedA as an unconventional transcription factor specifically ...Gene expression in Escherichia coli is controlled by well-established mechanisms that activate or repress transcription. Here, we identify CedA as an unconventional transcription factor specifically associated with the RNA polymerase (RNAP) σ holoenzyme. Structural and biochemical analysis of CedA bound to RNAP reveal that it bridges distant domains of β and σ subunits to stabilize an open-promoter complex. CedA does so without contacting DNA. We further show that cedA is strongly induced in response to amino acid starvation, oxidative stress and aminoglycosides. CedA provides a basal level of tolerance to these clinically relevant antibiotics, as well as to rifampicin and peroxide. Finally, we show that CedA modulates transcription of hundreds of bacterial genes, which explains its pleotropic effect on cell physiology and pathogenesis. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29423.map.gz | 168.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29423-v30.xml emd-29423.xml | 27.8 KB 27.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_29423.png | 193.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-29423.cif.gz | 9.2 KB | ||
その他 | emd_29423_half_map_1.map.gz emd_29423_half_map_2.map.gz | 165.2 MB 165.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29423 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29423 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29423_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_29423_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29423_validation.xml.gz | 15 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29423_validation.cif.gz | 17.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29423 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29423 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8ftdMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29423.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.852 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_29423_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_29423_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Escherichia coli CedA in complex with initiation complex
+超分子 #1: Escherichia coli CedA in complex with initiation complex
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #8: Cell division activator CedA
+分子 #6: Transcription Unit ssrA Promoter Non-template DNA
+分子 #7: Transcription Unit ssrA Promoter Template DNA
+分子 #9: CHAPSO
+分子 #10: MAGNESIUM ION
+分子 #11: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 4 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: 15mA |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 IS (4k x 4k) / 平均電子線量: 1.416 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER 詳細: The initial model was created in-house using CryoSPARC |
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最終 再構成 | アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.76 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 177841 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD 詳細: The initial model was created in-house using CryoSPARC |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / 詳細: Final refinement was performed using CryoSPARC |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: OTHER |
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得られたモデル | PDB-8ftd: |