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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29397 | |||||||||
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タイトル | Structure of Mycobacterium smegmatis Rsh bound to a 70S translation initiation complex | |||||||||
マップデータ | M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | starvation sensing / RelA/SpoT homologue / Mycobacterium / 70S initiation complex / TRANSLATION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 GTP diphosphokinase / GTP diphosphokinase activity / guanosine tetraphosphate biosynthetic process / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / kinase activity / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity ...GTP diphosphokinase / GTP diphosphokinase activity / guanosine tetraphosphate biosynthetic process / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / kinase activity / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / ribosomal large subunit assembly / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / mRNA binding / ATP binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.76 Å | |||||||||
データ登録者 | Majumdar S / Sharma MR / Manjari SR / Banavali NK / Agrawal RK | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2023 タイトル: Starvation sensing by mycobacterial RelA/SpoT homologue through constitutive surveillance of translation. 著者: Yunlong Li / Soneya Majumdar / Ryan Treen / Manjuli R Sharma / Jamie Corro / Howard B Gamper / Swati R Manjari / Jerome Prusa / Nilesh K Banavali / Christina L Stallings / Ya-Ming Hou / ...著者: Yunlong Li / Soneya Majumdar / Ryan Treen / Manjuli R Sharma / Jamie Corro / Howard B Gamper / Swati R Manjari / Jerome Prusa / Nilesh K Banavali / Christina L Stallings / Ya-Ming Hou / Rajendra K Agrawal / Anil K Ojha / 要旨: The stringent response, which leads to persistence of nutrient-starved mycobacteria, is induced by activation of the RelA/SpoT homolog (Rsh) upon entry of a deacylated-tRNA in a translating ribosome. ...The stringent response, which leads to persistence of nutrient-starved mycobacteria, is induced by activation of the RelA/SpoT homolog (Rsh) upon entry of a deacylated-tRNA in a translating ribosome. However, the mechanism by which Rsh identifies such ribosomes in vivo remains unclear. Here, we show that conditions inducing ribosome hibernation result in loss of intracellular Rsh in a Clp protease-dependent manner. This loss is also observed in nonstarved cells using mutations in Rsh that block its interaction with the ribosome, indicating that Rsh association with the ribosome is important for Rsh stability. The cryo-EM structure of the Rsh-bound 70S ribosome in a translation initiation complex reveals unknown interactions between the ACT domain of Rsh and components of the ribosomal L7/L12 stalk base, suggesting that the aminoacylation status of A-site tRNA is surveilled during the first cycle of elongation. Altogether, we propose a surveillance model of Rsh activation that originates from its constitutive interaction with the ribosomes entering the translation cycle. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29397.map.gz | 380.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29397-v30.xml emd-29397.xml | 78.9 KB 78.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_29397_fsc.xml | 17.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_29397.png | 36.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-29397.cif.gz | 15 KB | ||
その他 | emd_29397_additional_1.map.gz emd_29397_half_map_1.map.gz emd_29397_half_map_2.map.gz | 374 MB 382.1 MB 382.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29397 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29397 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29397_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_29397_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29397_validation.xml.gz | 25.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29397_validation.cif.gz | 34.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29397 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29397 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8fr8MC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29397.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 476.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.84744 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex- Composite Map
ファイル | emd_29397_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex- Composite Map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex half map 1
ファイル | emd_29397_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex half map 1
ファイル | emd_29397_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | M. smegmatis 70S-Rsh-fMet-tRNA complex half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Mycobacterium smegmatis 70S ribosome bound to Rsh, and initiator ...
+超分子 #1: Mycobacterium smegmatis 70S ribosome bound to Rsh, and initiator ...
+分子 #1: 50S ribosomal protein L33 2
+分子 #2: 50S ribosomal protein L28
+分子 #4: 30S ribosomal protein S19
+分子 #6: 30S ribosomal protein S13
+分子 #7: 50S ribosomal protein L16
+分子 #8: 50S ribosomal protein eL31
+分子 #10: 50S ribosomal protein L2
+分子 #11: 50S ribosomal protein L3
+分子 #12: 50S ribosomal protein L4
+分子 #13: 50S ribosomal protein L5
+分子 #14: 50S ribosomal protein L6
+分子 #15: 50S ribosomal protein L9
+分子 #16: 50S ribosomal protein L10
+分子 #17: 50S ribosomal protein L11
+分子 #18: 50S ribosomal protein L13
+分子 #19: 50S ribosomal protein L14
+分子 #20: 50S ribosomal protein L15
+分子 #21: 50S ribosomal protein L17
+分子 #22: 50S ribosomal protein L18
+分子 #23: 50S ribosomal protein L19
+分子 #24: 50S ribosomal protein L20
+分子 #25: 50S ribosomal protein L21
+分子 #26: 50S ribosomal protein L22
+分子 #27: 50S ribosomal protein L23
+分子 #28: 50S ribosomal protein L24
+分子 #29: 50S ribosomal protein L25
+分子 #30: 50S ribosomal protein L27
+分子 #31: 50S ribosomal protein L29
+分子 #32: 50S ribosomal protein L30
+分子 #33: 50S ribosomal protein L32
+分子 #34: 50S ribosomal protein L34
+分子 #35: 50S ribosomal protein L35
+分子 #36: 50S ribosomal protein L36
+分子 #38: 30S ribosomal protein S22
+分子 #39: 30S ribosomal protein S3
+分子 #40: 30S ribosomal protein S4
+分子 #41: 30S ribosomal protein S5
+分子 #42: 30S ribosomal protein S6
+分子 #43: 30S ribosomal protein S7
+分子 #44: 30S ribosomal protein S8
+分子 #45: 30S ribosomal protein S9
+分子 #46: 30S ribosomal protein S10
+分子 #47: 30S ribosomal protein S11
+分子 #48: 30S ribosomal protein S12
+分子 #49: 30S ribosomal protein S15
+分子 #50: 30S ribosomal protein S16
+分子 #51: 30S ribosomal protein S17
+分子 #52: 30S ribosomal protein S20
+分子 #53: 30S ribosomal protein S2
+分子 #55: GTP pyrophosphokinase RelA
+分子 #56: 50S ribosomal protein L31
+分子 #57: 30S ribosomal protein S18 1
+分子 #58: 30S ribosomal protein S14
+分子 #3: fMet tRNA (77-MER)
+分子 #5: 5S rRNA (118-MER)
+分子 #9: 23S rRNA (3119-MER)
+分子 #37: 16S rRNA (1511-MER)
+分子 #54: mRNA
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 66.59 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-8fr8: |