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万見
- EMDB-29358: TFIIIA-TFIIIC complex bound to 5S rRNA gene -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-29358
タイトルTFIIIA-TFIIIC complex bound to 5S rRNA gene
マップデータrelion postprocessed map
試料
  • 複合体: TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene
キーワードtranscription factor / TRANSCRIPTION-DNA complex
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.62 Å
データ登録者Talyzina A / He Y
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS) 米国
American Cancer Society 米国
National Institutes of Health/National Cancer Institute (NIH/NCI) 米国
引用ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023
タイトル: Structural basis of TFIIIC-dependent RNA polymerase III transcription initiation.
著者: Anna Talyzina / Yan Han / Chiranjib Banerjee / Susan Fishbain / Alexis Reyes / Reza Vafabakhsh / Yuan He /
要旨: RNA polymerase III (Pol III) is responsible for transcribing 5S ribosomal RNA (5S rRNA), tRNAs, and other short non-coding RNAs. Its recruitment to the 5S rRNA promoter requires transcription factors ...RNA polymerase III (Pol III) is responsible for transcribing 5S ribosomal RNA (5S rRNA), tRNAs, and other short non-coding RNAs. Its recruitment to the 5S rRNA promoter requires transcription factors TFIIIA, TFIIIC, and TFIIIB. Here, we use cryoelectron microscopy (cryo-EM) to visualize the S. cerevisiae complex of TFIIIA and TFIIIC bound to the promoter. Gene-specific factor TFIIIA interacts with DNA and acts as an adaptor for TFIIIC-promoter interactions. We also visualize DNA binding of TFIIIB subunits, Brf1 and TBP (TATA-box binding protein), which results in the full-length 5S rRNA gene wrapping around the complex. Our smFRET study reveals that the DNA within the complex undergoes both sharp bending and partial dissociation on a slow timescale, consistent with the model predicted from our cryo-EM results. Our findings provide new insights into the transcription initiation complex assembly on the 5S rRNA promoter and allow us to directly compare Pol III and Pol II transcription adaptations.
履歴
登録2023年1月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年7月19日-
マップ公開2023年7月19日-
更新2023年8月16日-
現状2023年8月16日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_29358.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_29358.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈relion postprocessed map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.158 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.05
最小 - 最大-0.050740995 - 0.16287401
平均 (標準偏差)0.0017677826 (±0.011089959)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ132132132
Spacing132132132
セルA=B=C: 284.856 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: deepemhancer map

ファイルemd_29358_additional_1.map
注釈deepemhancer map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half2

ファイルemd_29358_half_map_1.map
注釈half2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half1

ファイルemd_29358_half_map_2.map
注釈half1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene

全体名称: TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene
要素
  • 複合体: TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene

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超分子 #1: TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene

超分子名称: TFIIIA-TFIIIC-Brf1-TBP complex bound to 5SrRNA gene / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#10
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 810 kDa/nm

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.02 mg/mL
緩衝液pH: 7.9
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 2176308
初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Map from negatively stained sample
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.62 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 109548
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 3次元分類クラス数: 5 / 平均メンバー数/クラス: 30000 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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