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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-28804 | |||||||||
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タイトル | Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma brucei MC8 Knockdown mutant | |||||||||
マップデータ | Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma brucei MC8 Knockdown mutant | |||||||||
試料 |
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キーワード | flagella / axoneme / MIPs / MC8 Knockdown / STRUCTURAL PROTEIN | |||||||||
生物種 | Trypanosoma brucei (トリパノソーマ) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 16.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Shimogawa MM / Wang H | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: FAP106 is an interaction hub for assembling microtubule inner proteins at the cilium inner junction. 著者: Michelle M Shimogawa / Angeline S Wijono / Hui Wang / Jiayan Zhang / Jihui Sha / Natasha Szombathy / Sabeeca Vadakkan / Paula Pelayo / Keya Jonnalagadda / James Wohlschlegel / Z Hong Zhou / Kent L Hill / 要旨: Motility of pathogenic protozoa depends on flagella (synonymous with cilia) with axonemes containing nine doublet microtubules (DMTs) and two singlet microtubules. Microtubule inner proteins (MIPs) ...Motility of pathogenic protozoa depends on flagella (synonymous with cilia) with axonemes containing nine doublet microtubules (DMTs) and two singlet microtubules. Microtubule inner proteins (MIPs) within DMTs influence axoneme stability and motility and provide lineage-specific adaptations, but individual MIP functions and assembly mechanisms are mostly unknown. Here, we show in the sleeping sickness parasite Trypanosoma brucei, that FAP106, a conserved MIP at the DMT inner junction, is required for trypanosome motility and functions as a critical interaction hub, directing assembly of several conserved and lineage-specific MIPs. We use comparative cryogenic electron tomography (cryoET) and quantitative proteomics to identify MIP candidates. Using RNAi knockdown together with fitting of AlphaFold models into cryoET maps, we demonstrate that one of these candidates, MC8, is a trypanosome-specific MIP required for parasite motility. Our work advances understanding of MIP assembly mechanisms and identifies lineage-specific motility proteins that are attractive targets to consider for therapeutic intervention. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_28804.map.gz | 3.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-28804-v30.xml emd-28804.xml | 13.9 KB 13.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_28804.png | 72 KB | ||
その他 | emd_28804_half_map_1.map.gz emd_28804_half_map_2.map.gz | 3.4 MB 3.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28804 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28804 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_28804_validation.pdf.gz | 791.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_28804_full_validation.pdf.gz | 791.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_28804_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_28804_validation.cif.gz | 7.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28804 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28804 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28804.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma brucei MC8 Knockdown mutant | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 6.759 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma...
ファイル | emd_28804_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma brucei MC8 Knockdown mutant(half-map 1) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma...
ファイル | emd_28804_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Subtomographic average of flagellar axoneme doublet from Trypanosoma brucei MC8 Knockdown mutant(half-map 2) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Detergent-extracted flagellum of Trypanosoma brucei
全体 | 名称: Detergent-extracted flagellum of Trypanosoma brucei |
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要素 |
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-超分子 #1: Detergent-extracted flagellum of Trypanosoma brucei
超分子 | 名称: Detergent-extracted flagellum of Trypanosoma brucei / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Trypanosoma brucei (トリパノソーマ) / Organelle: flagella |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 2.68 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 16.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: PEET / 詳細: The FSC was performed by calcUnbiasedFSC from PEET / 使用したサブトモグラム数: 1936 |
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抽出 | トモグラム数: 52 / 使用した粒子像数: 3092 |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: PEET |