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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-27938 | |||||||||
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タイトル | Mycobacterium tuberculosis RNAP paused elongation complex with Escherichia coli NusG transcription factor | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase / transcription factor / elongation / pausing / transcription-transferase-DNA complex / TRANSCRIPTION-DNA-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 transcription elongation-coupled chromatin remodeling / DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription ...transcription elongation-coupled chromatin remodeling / DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis (結核菌) / Escherichia coli (大腸菌) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.71 Å | |||||||||
データ登録者 | Delbeau M / Darst SA / Campbell EA | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023 タイトル: Structural and functional basis of the universal transcription factor NusG pro-pausing activity in Mycobacterium tuberculosis. 著者: Madeleine Delbeau / Expery O Omollo / Ruby Froom / Steven Koh / Rachel A Mooney / Mirjana Lilic / Joshua J Brewer / Jeremy Rock / Seth A Darst / Elizabeth A Campbell / Robert Landick / 要旨: Transcriptional pauses mediate regulation of RNA biogenesis. DNA-encoded pause signals trigger pausing by stabilizing RNA polymerase (RNAP) swiveling and inhibiting DNA translocation. The N-terminal ...Transcriptional pauses mediate regulation of RNA biogenesis. DNA-encoded pause signals trigger pausing by stabilizing RNA polymerase (RNAP) swiveling and inhibiting DNA translocation. The N-terminal domain (NGN) of the only universal transcription factor, NusG/Spt5, modulates pausing through contacts to RNAP and DNA. Pro-pausing NusGs enhance pauses, whereas anti-pausing NusGs suppress pauses. Little is known about pausing and NusG in the human pathogen Mycobacterium tuberculosis (Mtb). We report that MtbNusG is pro-pausing. MtbNusG captures paused, swiveled RNAP by contacts to the RNAP protrusion and nontemplate-DNA wedged between the NGN and RNAP gate loop. In contrast, anti-pausing Escherichia coli (Eco) NGN contacts the MtbRNAP gate loop, inhibiting swiveling and pausing. Using CRISPR-mediated genetics, we show that pro-pausing NGN is required for mycobacterial fitness. Our results define an essential function of mycobacterial NusG and the structural basis of pro- versus anti-pausing NusG activity, with broad implications for the function of all NusG orthologs. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_27938.map.gz | 96.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-27938-v30.xml emd-27938.xml | 24.3 KB 24.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_27938.png | 45.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-27938.cif.gz | 8.1 KB | ||
その他 | emd_27938_half_map_1.map.gz emd_27938_half_map_2.map.gz | 95.6 MB 95.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27938 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27938 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_27938_validation.pdf.gz | 1010.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_27938_full_validation.pdf.gz | 1010.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_27938_validation.xml.gz | 13.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_27938_validation.cif.gz | 15.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27938 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27938 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_27938.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.03 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_27938_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_27938_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Mycobacterium tuberculosis RNAP paused elongation complex with Es...
+超分子 #1: Mycobacterium tuberculosis RNAP paused elongation complex with Es...
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: Transcription termination/antitermination protein NusG
+分子 #6: DNA (54-MER)
+分子 #7: DNA (54-MER)
+分子 #8: RNA (42-MER)
+分子 #9: ZINC ION
+分子 #10: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 51.84 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.71 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 80855 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |