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万見
- EMDB-2763: CryoEM structure of a partial yeast 48S preinitiation complex -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-2763
タイトルCryoEM structure of a partial yeast 48S preinitiation complex
マップデータReconstruction of a partial 48S preinitiation complex from yeast. In order to see all the components it is recommended to apply a gaussian filter of 1.5 width and then visualize it at a contour level of 0.02.
試料
  • 試料: Partial yeast 48S preinitiation complex
  • 複合体: Ribosome small subunit
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 1
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 1A
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 2
  • RNA: Initiator transfer RNA
  • RNA: Messenger RNA
キーワードEukaryotic translation initiation / 48S / small ribosome subunit.
機能・相同性
機能・相同性情報


formation of translation initiation ternary complex / Recycling of eIF2:GDP / Cellular response to mitochondrial stress / ABC-family proteins mediated transport / methionyl-initiator methionine tRNA binding / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / multi-eIF complex / eukaryotic 43S preinitiation complex ...formation of translation initiation ternary complex / Recycling of eIF2:GDP / Cellular response to mitochondrial stress / ABC-family proteins mediated transport / methionyl-initiator methionine tRNA binding / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / multi-eIF complex / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / positive regulation of translational fidelity / protein-synthesizing GTPase / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / Translation initiation complex formation / Ribosomal scanning and start codon recognition / Formation of a pool of free 40S subunits / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / ribosomal small subunit binding / 90S preribosome / regulation of translational fidelity / translation regulator activity / translation initiation factor binding / translation initiation factor activity / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / translational initiation / maintenance of translational fidelity / cytoplasmic stress granule / rRNA processing / double-stranded RNA binding / regulation of translation / ribosome binding / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / GTPase activity / mRNA binding / protein kinase binding / GTP binding / nucleolus / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
Eukaryotic translation initiation factor SUI1 / SUI1 domain superfamily / Translation initiation factor SUI1 / Translation initiation factor SUI1 family profile. / SUI1 domain / Translation initiation factor IF2/IF5 domain / Translation initiation factor IF2/IF5, N-terminal / Translation initiation factor IF2/IF5, zinc-binding / Translation initiation factor IF2/IF5 / Domain found in IF2B/IF5 ...Eukaryotic translation initiation factor SUI1 / SUI1 domain superfamily / Translation initiation factor SUI1 / Translation initiation factor SUI1 family profile. / SUI1 domain / Translation initiation factor IF2/IF5 domain / Translation initiation factor IF2/IF5, N-terminal / Translation initiation factor IF2/IF5, zinc-binding / Translation initiation factor IF2/IF5 / Domain found in IF2B/IF5 / domain present in translation initiation factor eIF2B and eIF5 / Translation initiation factor 1A (eIF-1A), conserved site / Eukaryotic initiation factor 1A signature. / eukaryotic translation initiation factor 1A / Translation initiation factor 1A (eIF-1A) / Translation initiation factor 2, alpha subunit / Translation initiation factor 2, alpha subunit, middle domain superfamily / Translation initiation factor 2, alpha subunit, C-terminal / IF2a, S1-like domain / Eukaryotic translation initiation factor 2 alpha subunit / Initiation factor eIF2 gamma, C-terminal / Initiation factor eIF2 gamma, domain 2 / Initiation factor eIF2 gamma, GTP-binding domain / Initiation factor eIF2 gamma, C terminal / : / RNA-binding domain, S1, IF1 type / Translation initiation factor 1A / IF-1 / S1 domain IF1 type profile. / Translation elongation factor EF1A/initiation factor IF2gamma, C-terminal / S1 domain profile. / : / Ribosomal protein S26e signature. / Ribosomal protein L41 / Ribosomal protein L41 / Ribosomal protein S21e, conserved site / Ribosomal protein S21e signature. / : / Ribosomal protein S12e signature. / Ribosomal protein S26e / Ribosomal protein S26e superfamily / Ribosomal protein S26e / Ribosomal protein S12e / Ribosomal protein S19e, conserved site / Ribosomal protein S19e signature. / Ribosomal protein S5, eukaryotic/archaeal / Small (40S) ribosomal subunit Asc1/RACK1 / Ribosomal protein S21e / Ribosomal protein S21e superfamily / Ribosomal protein S21e / Ribosomal protein S2, eukaryotic / S27a-like superfamily / Translation elongation factor EFTu-like, domain 2 / 40S Ribosomal protein S10 / : / Ribosomal protein S7e signature. / Plectin/S10, N-terminal / Plectin/S10 domain / Ribosomal protein S8e subdomain, eukaryotes / Ribosomal protein S10, eukaryotic/archaeal / Ribosomal protein S30 / Ribosomal protein S17e, conserved site / Ribosomal protein S30 / Ribosomal protein S17e signature. / Ribosomal protein S3Ae, conserved site / Ribosomal protein S3Ae signature. / Ribosomal protein S25 / S25 ribosomal protein / Ribosomal protein S27a / Ribosomal protein S27a / Ribosomal protein S27a / Ribosomal protein S2, eukaryotic/archaeal / 40S ribosomal protein S29/30S ribosomal protein S14 type Z / Ribosomal protein S27e signature. / Ribosomal protein S3, eukaryotic/archaeal / Ribosomal protein S4e, N-terminal, conserved site / Ribosomal protein S4e signature. / 40S ribosomal protein S4, C-terminal domain / 40S ribosomal protein S4 C-terminus / Ribosomal protein S8e, conserved site / Ribosomal protein S8e signature. / Elongation factor Tu domain 2 / Ribosomal protein S19e / Ribosomal protein S19e / Ribosomal_S19e / Ribosomal protein S6, eukaryotic / Ribosomal protein S19A/S15e / Ribosomal protein S7e / Ribosomal protein S7e / 40S ribosomal protein S1/3, eukaryotes / Ribosomal protein S17e / Ribosomal protein S17e-like superfamily / Ribosomal S17 / 40S ribosomal protein S11, N-terminal / Ribosomal_S17 N-terminal / Ribosomal S24e conserved site / Ribosomal protein S24e signature. / : / Ribosomal protein S4e, N-terminal / RS4NT (NUC023) domain / Ribosomal protein S4, KOW domain
類似検索 - ドメイン・相同性
KLLA0B11231p / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit beta / Small ribosomal subunit protein eS32A / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha / Small ribosomal subunit protein uS11 / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit gamma / Eukaryotic translation initiation factor eIF-1 / Small ribosomal subunit protein eS28 / Eukaryotic translation initiation factor 1A / Ubiquitin-ribosomal protein eS31 fusion protein ...KLLA0B11231p / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit beta / Small ribosomal subunit protein eS32A / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha / Small ribosomal subunit protein uS11 / Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit gamma / Eukaryotic translation initiation factor eIF-1 / Small ribosomal subunit protein eS28 / Eukaryotic translation initiation factor 1A / Ubiquitin-ribosomal protein eS31 fusion protein / Small ribosomal subunit protein uS10 / KLLA0F18040p / Small ribosomal subunit protein uS5 / KLLA0F07843p / 40S ribosomal protein S12 / Small ribosomal subunit protein eS6 / RP21 / 40S ribosomal protein S8 / Small ribosomal subunit protein uS2 / Small ribosomal subunit protein RACK1 / 40S ribosomal protein S27 / Small ribosomal subunit protein uS14 / KLLA0D10659p / Small ribosomal subunit protein uS3 / 40S ribosomal protein S26 / 40S ribosomal protein S7 / 40S ribosomal protein S24 / 40S ribosomal protein S30 / KLLA0B08173p / Small ribosomal subunit protein uS8 / 40S ribosomal protein S25 / Small ribosomal subunit protein eS1 / 40S ribosomal protein S4 / KLLA0B01562p / KLLA0B01474p / RP41 / S16a / Small ribosomal subunit protein eS21 / Small ribosomal subunit protein uS9
類似検索 - 構成要素
生物種Kluyveromyces lactis (酵母) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å
データ登録者Hussain T / Llacer JL / Fernandez IS / Savva CG / Ramakrishnan V
引用ジャーナル: Cell / 年: 2014
タイトル: Structural changes enable start codon recognition by the eukaryotic translation initiation complex.
著者: Tanweer Hussain / Jose L Llácer / Israel S Fernández / Antonio Munoz / Pilar Martin-Marcos / Christos G Savva / Jon R Lorsch / Alan G Hinnebusch / V Ramakrishnan /
要旨: During eukaryotic translation initiation, initiator tRNA does not insert fully into the P decoding site on the 40S ribosomal subunit. This conformation (POUT) is compatible with scanning mRNA for the ...During eukaryotic translation initiation, initiator tRNA does not insert fully into the P decoding site on the 40S ribosomal subunit. This conformation (POUT) is compatible with scanning mRNA for the AUG start codon. Base pairing with AUG is thought to promote isomerization to a more stable conformation (PIN) that arrests scanning and promotes dissociation of eIF1 from the 40S subunit. Here, we present a cryoEM reconstruction of a yeast preinitiation complex at 4.0 Å resolution with initiator tRNA in the PIN state, prior to eIF1 release. The structure reveals stabilization of the codon-anticodon duplex by the N-terminal tail of eIF1A, changes in the structure of eIF1 likely instrumental in its subsequent release, and changes in the conformation of eIF2. The mRNA traverses the entire mRNA cleft and makes connections to the regulatory domain of eIF2?, eIF1A, and ribosomal elements that allow recognition of context nucleotides surrounding the AUG codon.
履歴
登録2014年8月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2014年10月1日-
マップ公開2014年11月5日-
更新2015年7月8日-
現状2015年7月8日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.065
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.065
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-3j81
  • 表面レベル: 0.065
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

EMD-2763.png

emd_2763.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_2763.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 100.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Reconstruction of a partial 48S preinitiation complex from yeast. In order to see all the components it is recommended to apply a gaussian filter of 1.5 width and then visualize it at a contour level of 0.02.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.34 Å/pix.
x 300 pix.
= 402. Å		1.34 Å/pix.
x 300 pix.
= 402. Å		1.34 Å/pix.
x 300 pix.
= 402. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.34 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.065 / ムービー #1: 0.065
最小 - 最大-0.16446616 - 0.46707994
平均 (標準偏差)0.00025123 (±0.02283158)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ300300300
Spacing300300300
セルA=B=C: 402.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.341.341.34
M x/y/z300300300
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z402.000402.000402.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS300300300
D min/max/mean-0.1640.4670.000

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添付データ

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添付マップデータ: emd 2763 additional 1.map

ファイルemd_2763_additional_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Partial yeast 48S preinitiation complex

全体名称: Partial yeast 48S preinitiation complex
要素
  • 試料: Partial yeast 48S preinitiation complex
  • 複合体: Ribosome small subunit
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 1
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 1A
  • タンパク質・ペプチド: Eukaryotic initiation factor 2
  • RNA: Initiator transfer RNA
  • RNA: Messenger RNA

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超分子 #1000: Partial yeast 48S preinitiation complex

超分子名称: Partial yeast 48S preinitiation complex / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 1 / Number unique components: 6
分子量理論値: 1.4 MDa

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超分子 #1: Ribosome small subunit

超分子名称: Ribosome small subunit / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: 40S / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: SSU 40S, SSU RNA 18S
由来(天然)生物種: Kluyveromyces lactis (酵母)
分子量理論値: 1.2 MDa

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分子 #1: Eukaryotic initiation factor 1

分子名称: Eukaryotic initiation factor 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: eIF1 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's yeast
分子量理論値: 12.3 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 組換株: Rosetta / 組換プラスミド: pTYB2
配列UniProtKB: Eukaryotic translation initiation factor eIF-1

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分子 #2: Eukaryotic initiation factor 1A

分子名称: Eukaryotic initiation factor 1A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: eIF1A / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: baker's yeast
分子量理論値: 17.4 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 組換株: Rosetta / 組換プラスミド: pTYB2
配列UniProtKB: Eukaryotic translation initiation factor 1A

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分子 #3: Eukaryotic initiation factor 2

分子名称: Eukaryotic initiation factor 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / Name.synonym: eIF2
詳細: Uniprot codes are: alpha-P20459 beta-P09064 gamma-P32481
コピー数: 1 / 集合状態: Three subunits, alpha, beta, gamma / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's yeast
分子量理論値: 124 KDa
組換発現生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 組換株: GP3511

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分子 #4: Initiator transfer RNA

分子名称: Initiator transfer RNA / タイプ: rna / ID: 4 / Name.synonym: Met-tRNAi
詳細: Doble mutation (G31U:C39A) when compared with yeast WT initiator tRNA.
分類: TRANSFER / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's yeast
分子量理論値: 23 KDa
配列文字列:
AGCGCCGUGG CGCAGUGGAA GCGCGCAGGU CUCAUAAACC UGAUGUCCUC GGAUCGAAAC CGAGCGGCGC UACCA

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分子 #5: Messenger RNA

分子名称: Messenger RNA / タイプ: rna / ID: 5 / Name.synonym: mRNA / 分類: OTHER / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 7.4 KDa
配列文字列:
GGAAUCUCUC UCUAUGCUCU CUCUC

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.17 mg/mL
緩衝液pH: 6.5
詳細: 20mM MES-KOH, 40mM K-acetate, 10mM NH4-acetate, 8mM Mg-acetate, 2mM DTT
グリッド詳細: Quantifoil R2/2 400 mesh copper grids with 4-5 nm thin carbon on top
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / Timed resolved state: 30 second incubation time / 手法: Blot for 2.5 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI POLARA 300
アライメント法Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 59,000 times magnification
詳細Complete dataset was collected in 5 non-consecutive sessions
日付2013年10月28日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
実像数: 1791 / 平均電子線量: 28 e/Å2
詳細: Complete dataset was collected in 5 non-consecutive sessions
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率（補正後）: 104478 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 0.004 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.0016 µm / 倍率（公称値）: 78000
試料ステージ試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN
実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Particles were semi-automatically picked with the e2boxer.py program of EMAN2
CTF補正詳細: Each particle
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Relion / 使用した粒子像数: 29698
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3u5b
PDB 未公開エントリ


Chain - Chain ID: 2
ソフトウェア名称: Chimera, refmac
精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC
得られたモデル

PDB-3j81:
CryoEM structure of a partial yeast 48S preinitiation complex

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原子モデル構築 2

初期モデルPDB ID:

3u5c
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: Chimera, refmac
精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC
得られたモデル

PDB-3j81:
CryoEM structure of a partial yeast 48S preinitiation complex

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原子モデル構築 3

初期モデルPDB ID:

3v11

ソフトウェア名称: Chimera, refmac
精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC
得られたモデル

PDB-3j81:
CryoEM structure of a partial yeast 48S preinitiation complex

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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