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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the S. cerevisiae chromatin remodeler Yta7 hexamer bound to ATPgS in state I | |||||||||
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生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.6 Å | |||||||||
![]() | Wang F / Feng X / Li H | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: The Saccharomyces cerevisiae Yta7 ATPase hexamer contains a unique bromodomain tier that functions in nucleosome disassembly. 著者: Feng Wang / Xiang Feng / Qing He / Hua Li / Huilin Li / ![]() 要旨: The Saccharomyces cerevisiae Yta7 is a chromatin remodeler harboring a histone-interacting bromodomain (BRD) and two AAA+ modules. It is not well understood how Yta7 recognizes the histone H3 tail to ...The Saccharomyces cerevisiae Yta7 is a chromatin remodeler harboring a histone-interacting bromodomain (BRD) and two AAA+ modules. It is not well understood how Yta7 recognizes the histone H3 tail to promote nucleosome disassembly for DNA replication or RNA transcription. By cryo-EM analysis, here we show that Yta7 assembles a three-tiered hexamer with a top BRD tier, a middle AAA1 tier, and a bottom AAA2 tier. Unexpectedly, the Yta7 BRD stabilizes a four-stranded β-helix, termed BRD-interacting motif (BIM), of the largely disordered N-terminal region. The BIM motif is unique to the baker's yeast, and we show both BRD and BIM contribute to nucleosome recognition. We found that Yta7 binds both acetylated and nonacetylated H3 peptides but with a higher affinity for the unmodified peptide. This property is consistent with the absence of key residues of canonical BRDs involved in acetylated peptide recognition and the role of Yta7 in general nucleosome remodeling. Interestingly, the BRD tier exists in a spiral and a flat-ring form on top of the Yta7 AAA+ hexamer. The spiral is likely in a nucleosome-searching mode because the bottom BRD blocks the entry to the AAA+ chamber. The flat ring may be in a nucleosome disassembly state because the entry is unblocked and the H3 peptide has entered the AAA+ chamber and is stabilized by the AAA1 pore loops 1 and 2. Indeed, we show that the BRD tier is a flat ring when bound to the nucleosome. Overall, our study sheds light on the nucleosome disassembly by Yta7. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 206 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 20.6 KB 20.6 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 14.3 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 47.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 192.1 MB 193.7 MB 193.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 621.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 621 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 21.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 28 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Primary map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.828 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Raw map
ファイル | emd_26682_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Raw map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_26682_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_26682_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Complex of Yta7 and ATPgS (spiral BRD)
全体 | 名称: Complex of Yta7 and ATPgS (spiral BRD) |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex of Yta7 and ATPgS (spiral BRD)
超分子 | 名称: Complex of Yta7 and ATPgS (spiral BRD) / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 930 KDa |
-分子 #1: Yta7
分子 | 名称: Yta7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: HHHHHHHHHH TSGSMDYKDH DGDYKDHDID YKDDDDKMAR NLRNRRGSDV EDASNAKVGY ETQIKDENGI IHTTTRSLRK INYAEIEKVF DFLEDDQVMD KDETPVDVTS DEHHNNNQKG DDEDDDVDLV SPHENARTNE ELTNERNLRK RKAHDPEEDD ESFHEEDVDD ...文字列: HHHHHHHHHH TSGSMDYKDH DGDYKDHDID YKDDDDKMAR NLRNRRGSDV EDASNAKVGY ETQIKDENGI IHTTTRSLRK INYAEIEKVF DFLEDDQVMD KDETPVDVTS DEHHNNNQKG DDEDDDVDLV SPHENARTNE ELTNERNLRK RKAHDPEEDD ESFHEEDVDD DEEEEEADEF EDEYLDEDSK DNNRRRRAAD RKFVVPDPDD DEEYDEDDEE GDRISHSASS KRLKRANSRR TRSSRHPETP PPVRRALRSR TRHSRTSNEE NDDENDNSRN EALTLADEIR ELQEDSPIRE KRFLRERTKP VNYKLPPPLT ASNAEEFIDK NNNALSFHNP SPARRGRGGW NASQNSGPTR RLFPTGGPFG GNDVTTIFGK NTNFYNQVPS AFSDNNNNKL ILDSDSSDDE ILPLGVTPKT KKENTQKKKK KKPEIADLDP LGVDMNVNFD DIGGLDNYID QLKEMVALPL LYPELYQNFN ITPPRGVLFH GPPGTGKTLM ARALAASCSS DERKITFFMR KGADILSKWV GEAERQLRLL FEEAKKHQPS IIFFDEIDGL APVRSSKQEQ IHASIVSTLL ALMDGMDNRG QVIVIGATNR PDAVDPALRR PGRFDREFYF PLPDVKARFK ILQIQTRKWS SPLSTNFIDK LAFLTKGYGG ADLRSLCTEA ALISIQRSFP QIYRSNDKLL VDPSKIKVKV SDFMLALKKI VPSSARSTGS SPQPLPELIK PLLADQLNNL KNKLDYMLNI KDTTFQRNTS LLQNFIDYEE YSGEEEEHDK YGGNEDTSSF RSYEFFESMA ESQICKPRLL INGPKGNGQQ YVGAAILNYL EEFNVQNLDL ASLVSESSRT IEAAVVQSFM EAKKRQPSVV FIPNLDIWIN TIPENVILVL SGLFRSLQSN EKILLLCLAE NLDISEVKNG ILSDFAFDKN IFQLHKPSKE NITRYFSNLI ELLKTKPSDI PMKKRRVKPL PELQKVTSNA APTNFDENGE PLSEKVVLRR KLKSFQHQDM RLKNVLKIKL SGLMDLFKNR YKRFRKPPID DAFLVHLFEP ETSNDPNWQP AYIKDENMIL EVSTGRKFFN MDLDIVEERL WNGYYSEPKQ FLKDIELIYR DANTIGDRER VIKASEMFAN AQMGIEEIST PDFIQECKAT RQRDLERQEL FLEDEEKRAA MELEAKEQSQ ENILQEPDLK DNKANEFGVA AGNQLQAQLQ TTINTASIVN NSEVPQPIDT NLYKKEIPAA IPSAVDKEKA VIPEDSGANE EYTTELIQAT CTSEITTDDD ERARKEPKEN EDSLQTQVTE ENFSKIDANT NNINHVKEIQ SVNKPNSLHE TVEKRERSPI PKEVVEPEQG KKSDKELILT PEQIKKVSAC LIEHCQNFTV SQLEDVHSSV AKIIWKSKSA WDKTGTVDEI IKFLSE |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 10 mg/mL | ||||||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.6 構成要素:
詳細: Solution was made fresh and detergent was added to solve preference orientation issue. | ||||||||||||||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 101.325 kPa | ||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot 3S, blot forth 3. | ||||||||||||||||||||||||
詳細 | The sample was a novel chromatin remodeler and a AAA+ ATPase. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 193.0 K / 最高: 193.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 65.0 e/Å2 詳細: A total of 75 frames were recorded for each micrograph stack. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |
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