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万見
- EMDB-20561: Pod structure of Shigella T3SS -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20561
タイトルPod structure of Shigella T3SS
マップデータ
試料
  • 複合体: Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system
生物種Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 18.0 Å
データ登録者Liu J
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious DiseasesNIAID R01 AI123351 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical SciencesNIGMS P30 GM110761 米国
引用ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2019
タイトル: The cytoplasmic domain of MxiG interacts with MxiK and directs assembly of the sorting platform in the type III secretion system.
著者: Shoichi Tachiyama / Yunjie Chang / Meenakumari Muthuramalingam / Bo Hu / Michael L Barta / Wendy L Picking / Jun Liu / William D Picking /
要旨: Many Gram-negative bacteria use type III secretion systems (T3SSs) to inject virulence effector proteins into eukaryotic cells. The T3SS apparatus (T3SA) is structurally conserved among diverse ...Many Gram-negative bacteria use type III secretion systems (T3SSs) to inject virulence effector proteins into eukaryotic cells. The T3SS apparatus (T3SA) is structurally conserved among diverse bacterial pathogens and consists of a cytoplasmic sorting platform, an envelope-spanning basal body, and an extracellular needle with tip complex. The sorting platform is essential for effector recognition and powering secretion. Studies using bacterial "minicells" have revealed an unprecedented level of structural detail of the sorting platform; however, many of the structure-function relationships within this complex remain enigmatic. Here, we report on improved cryo-electron tomographic approaches to enhance the resolution of the T3SA sorting platform (at ≤2 nm resolution) done in concert with biochemical and genetic methods to define the sorting platform interactome and interactions with the T3SA inner membrane ring (IR). We observed that the sorting platform consists of "pods" with 6-fold symmetry that interact with the Spa47 ATPase via radial extensions comprising MxiN. Most importantly, MxiK maintained an interaction with the IR via specific interactions with the cytoplasmic domain of the IR protein MxiG (MxiG), which is a noncanonical forkhead-associated domain, and MxiK has an elongated structure that interacts with the IR via MxiG T4 lysozyme-mediated insertional mutagenesis of MxiK revealed its orientation within the sorting platform and enabled disruption of interactions with its binding partners, which abolished sorting platform assembly. Finally, a comparison with the homologous interactions in the T3SS sorting platform revealed clear differences in their IR-sorting platform interfaces that have possible mechanistic implications.
履歴
登録2019年8月6日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年11月6日-
マップ公開2019年11月6日-
更新2019年12月25日-
現状2019年12月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_20561.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20561.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 22.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.6 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.015 / ムービー #1: 0.015
最小 - 最大-0.18442513 - 0.32694602
平均 (標準偏差)0.00070833997 (±0.024923632)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ180180180
Spacing180180180
セルA=B=C: 467.99997 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.62.62.6
M x/y/z180180180
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z468.000468.000468.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-200-200-200
NX/NY/NZ401401401
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS180180180
D min/max/mean-0.1840.3270.001

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system

全体名称: Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system
要素
  • 複合体: Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system

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超分子 #1: Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system

超分子名称: Pos structure of Shigella flexneri type III secretion system
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 詳細: wild type
由来(天然)生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌) / 株: SF5a

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 7
グリッド材質: COPPER / メッシュ: 200
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI POLARA 300
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C6 (6回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 18.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 4488
抽出トモグラム数: 922 / 使用した粒子像数: 4488
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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