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万見- EMDB-19941: Structure of a B-state intermediate committed to discard (Bd-I state) -
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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Structure of a B-state intermediate committed to discard (Bd-I state) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Helicase / G-patch protein / discard pathway / SPLICING | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報nucleolar peripheral inclusion body / mRNA Splicing - Major Pathway / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / spliceosomal complex disassembly / spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / post-mRNA release spliceosomal complex ...nucleolar peripheral inclusion body / mRNA Splicing - Major Pathway / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / spliceosomal complex disassembly / spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / snRNP binding / spindle pole body / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / regulatory ncRNA-mediated gene silencing / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type spliceosomal complex / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2 snRNP / U1 snRNP / U4 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / mRNA 5'-splice site recognition / spliceosomal complex assembly / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / U5 snRNA binding / protein K63-linked ubiquitination / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / U1 snRNA binding / pericentric heterochromatin / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / peptidylprolyl isomerase / spliceosomal complex / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / mRNA splicing, via spliceosome / RING-type E3 ubiquitin transferase / metallopeptidase activity / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / nuclear envelope / protein folding / protein-macromolecule adaptor activity / molecular adaptor activity / cysteine-type deubiquitinase activity / RNA helicase activity / RNA helicase / DNA repair / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Soni K / Wild K / Sinning I | |||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2025タイトル: Structures of aberrant spliceosome intermediates on their way to disassembly. 著者: Komal Soni / Attila Horvath / Olexandr Dybkov / Merlin Schwan / Sasanan Trakansuebkul / Dirk Flemming / Klemens Wild / Henning Urlaub / Tamás Fischer / Irmgard Sinning / ![]() 要旨: Intron removal during pre-mRNA splicing is of extraordinary complexity and its disruption causes a vast number of genetic diseases in humans. While key steps of the canonical spliceosome cycle have ...Intron removal during pre-mRNA splicing is of extraordinary complexity and its disruption causes a vast number of genetic diseases in humans. While key steps of the canonical spliceosome cycle have been revealed by combined structure-function analyses, structural information on an aberrant spliceosome committed to premature disassembly is not available. Here, we report two cryo-electron microscopy structures of post-B spliceosome intermediates from Schizosaccharomyces pombe primed for disassembly. We identify the DEAH-box helicase-G-patch protein pair (Gih35-Gpl1, homologous to human DHX35-GPATCH1) and show how it maintains catalytic dormancy. In both structures, Gpl1 recognizes a remodeled active site introduced by an overstabilization of the U5 loop I interaction with the 5' exon leading to a single-nucleotide insertion at the 5' splice site. Remodeling is communicated to the spliceosome surface and the Ntr1 complex that mediates disassembly is recruited. Our data pave the way for a targeted analysis of splicing quality control. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_19941.map.gz | 605.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-19941-v30.xml emd-19941.xml | 66.9 KB 66.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_19941_fsc.xml | 19.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_19941.png | 115.3 KB | ||
| マスクデータ | emd_19941_msk_1.map | 669.9 MB | マスクマップ | |
| Filedesc metadata | emd-19941.cif.gz | 18.2 KB | ||
| その他 | emd_19941_half_map_1.map.gz emd_19941_half_map_2.map.gz | 541.9 MB 541.2 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19941 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19941 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_19941_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_19941_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_19941_validation.xml.gz | 28 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_19941_validation.cif.gz | 37.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19941 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19941 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 9eshMC ![]() 9esiC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_19941.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 669.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.822 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
| ファイル | emd_19941_msk_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
| ファイル | emd_19941_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
| ファイル | emd_19941_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : Bd-I complex
+超分子 #1: Bd-I complex
+分子 #1: pre-mRNA
+分子 #2: U2snRNA
+分子 #3: U5snRNA
+分子 #4: U6snRNA
+分子 #5: Pre-mRNA-splicing factor spp42
+分子 #6: Pre-mRNA-splicing factor cwf10
+分子 #7: Pre-mRNA-splicing factor cwf17
+分子 #8: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #9: Small nuclear ribonucleoprotein-associated protein B
+分子 #10: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1
+分子 #11: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2
+分子 #12: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #13: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #14: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #15: Pre-mRNA-splicing factor prp5
+分子 #16: Pre-mRNA-processing protein 45
+分子 #17: Pre-mRNA-splicing factor cwf5
+分子 #18: Pre-mRNA-splicing factor cwf11
+分子 #19: Pre-mRNA-splicing factor cwf14
+分子 #20: Pre-mRNA-splicing factor cwf2
+分子 #21: Pre-mRNA-splicing factor cwf15
+分子 #22: Pre-mRNA-splicing factor cwf4
+分子 #23: Pre-mRNA-processing factor 19
+分子 #24: Pre-mRNA-splicing factor cdc5
+分子 #25: Pre-mRNA-splicing factor cwf3
+分子 #26: Pre-mRNA-splicing factor syf2
+分子 #27: Pre-mRNA-splicing factor cwf7
+分子 #28: Pre-mRNA-processing factor 17
+分子 #29: Pre-mRNA-splicing factor cwf21
+分子 #30: Pre-mRNA-splicing factor cwf22
+分子 #31: Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase ppi1
+分子 #32: UNK1
+分子 #33: G-patch domain-containing protein C1486.03
+分子 #34: UNK2
+分子 #35: Uncharacterized protein C20H4.06c
+分子 #36: Putative pre-mRNA-splicing factor ATP-dependent RNA helicase C20H4.09
+分子 #37: MAGNESIUM ION
+分子 #38: POTASSIUM ION
+分子 #39: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #40: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #41: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES pH 7.5, 100 mM NaCl, 1.5 mM MgCl2, 0.01% IGEPAL CA-630 | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS | |||||||||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| ソフトウェア | 名称: SerialEM |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 13096 / 平均露光時間: 1.491 sec. / 平均電子線量: 49.4 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]() PDB-9esh: |
ムービー
コントローラー
万見について



キーワード
データ登録者
ドイツ, 2件
引用















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FIELD EMISSION GUN

