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- EMDB-19941: Structure of a B-state intermediate committed to discard (Bd-I state) -
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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of a B-state intermediate committed to discard (Bd-I state) | |||||||||
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![]() | Helicase / G-patch protein / discard pathway / SPLICING | |||||||||
機能・相同性 | ![]() nucleolar peripheral inclusion body / mRNA Splicing - Major Pathway / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / spliceosomal complex disassembly / spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / post-mRNA release spliceosomal complex ...nucleolar peripheral inclusion body / mRNA Splicing - Major Pathway / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / spliceosomal complex disassembly / spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / snRNP binding / spindle pole body / regulatory ncRNA-mediated gene silencing / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA 5'-splice site recognition / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / protein K63-linked ubiquitination / U5 snRNA binding / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / pericentric heterochromatin / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P3 isomerase activity / RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P6 isomerase activity / peptidylprolyl isomerase / spliceosomal complex / RING-type E3 ubiquitin transferase / mRNA splicing, via spliceosome / metallopeptidase activity / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / nuclear envelope / protein folding / protein-macromolecule adaptor activity / molecular adaptor activity / cysteine-type deubiquitinase activity / RNA helicase activity / RNA helicase / DNA repair / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
![]() | Soni K / Wild K / Sinning I | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures of aberrant spliceosome intermediates on their way to disassembly. 著者: Komal Soni / Attila Horvath / Olexandr Dybkov / Merlin Schwan / Sasanan Trakansuebkul / Dirk Flemming / Klemens Wild / Henning Urlaub / Tamás Fischer / Irmgard Sinning / ![]() ![]() 要旨: Intron removal during pre-mRNA splicing is of extraordinary complexity and its disruption causes a vast number of genetic diseases in humans. While key steps of the canonical spliceosome cycle have ...Intron removal during pre-mRNA splicing is of extraordinary complexity and its disruption causes a vast number of genetic diseases in humans. While key steps of the canonical spliceosome cycle have been revealed by combined structure-function analyses, structural information on an aberrant spliceosome committed to premature disassembly is not available. Here, we report two cryo-electron microscopy structures of post-B spliceosome intermediates from Schizosaccharomyces pombe primed for disassembly. We identify the DEAH-box helicase-G-patch protein pair (Gih35-Gpl1, homologous to human DHX35-GPATCH1) and show how it maintains catalytic dormancy. In both structures, Gpl1 recognizes a remodeled active site introduced by an overstabilization of the U5 loop I interaction with the 5' exon leading to a single-nucleotide insertion at the 5' splice site. Remodeling is communicated to the spliceosome surface and the Ntr1 complex that mediates disassembly is recruited. Our data pave the way for a targeted analysis of splicing quality control. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 605.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 66.9 KB 66.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 19.8 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 115.3 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 669.9 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 18.2 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 541.9 MB 541.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9eshMC ![]() 9esiC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.822 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_19941_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_19941_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : Bd-I complex
+超分子 #1: Bd-I complex
+分子 #1: pre-mRNA
+分子 #2: U2snRNA
+分子 #3: U5snRNA
+分子 #4: U6snRNA
+分子 #5: Pre-mRNA-splicing factor spp42
+分子 #6: Pre-mRNA-splicing factor cwf10
+分子 #7: Pre-mRNA-splicing factor cwf17
+分子 #8: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #9: Small nuclear ribonucleoprotein-associated protein B
+分子 #10: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1
+分子 #11: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2
+分子 #12: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #13: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #14: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #15: Pre-mRNA-splicing factor prp5
+分子 #16: Pre-mRNA-processing protein 45
+分子 #17: Pre-mRNA-splicing factor cwf5
+分子 #18: Pre-mRNA-splicing factor cwf11
+分子 #19: Pre-mRNA-splicing factor cwf14
+分子 #20: Pre-mRNA-splicing factor cwf2
+分子 #21: Pre-mRNA-splicing factor cwf15
+分子 #22: Pre-mRNA-splicing factor cwf4
+分子 #23: Pre-mRNA-processing factor 19
+分子 #24: Pre-mRNA-splicing factor cdc5
+分子 #25: Pre-mRNA-splicing factor cwf3
+分子 #26: Pre-mRNA-splicing factor syf2
+分子 #27: Pre-mRNA-splicing factor cwf7
+分子 #28: Pre-mRNA-processing factor 17
+分子 #29: Pre-mRNA-splicing factor cwf21
+分子 #30: Pre-mRNA-splicing factor cwf22
+分子 #31: Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase ppi1
+分子 #32: UNK1
+分子 #33: G-patch domain-containing protein C1486.03
+分子 #34: UNK2
+分子 #35: Uncharacterized protein C20H4.06c
+分子 #36: Putative pre-mRNA-splicing factor ATP-dependent RNA helicase C20H4.09
+分子 #37: MAGNESIUM ION
+分子 #38: POTASSIUM ION
+分子 #39: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #40: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #41: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES pH 7.5, 100 mM NaCl, 1.5 mM MgCl2, 0.01% IGEPAL CA-630 | |||||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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ソフトウェア | 名称: SerialEM |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 13096 / 平均露光時間: 1.491 sec. / 平均電子線量: 49.4 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+
画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | ![]() PDB-9esh: |