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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Flexible reconstruction of a pre-catalytic spliceosome (EMPIAR-10180) using DynaMight | |||||||||
![]() | local resolution filtered map from the DynaMight half maps | |||||||||
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![]() | Spliceosome / SPLICING | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.98 Å | |||||||||
![]() | Schwab J / Scheres SHW | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure of a pre-catalytic spliceosome. 著者: Clemens Plaschka / Pei-Chun Lin / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: Intron removal requires assembly of the spliceosome on precursor mRNA (pre-mRNA) and extensive remodelling to form the spliceosome's catalytic centre. Here we report the cryo-electron microscopy ...Intron removal requires assembly of the spliceosome on precursor mRNA (pre-mRNA) and extensive remodelling to form the spliceosome's catalytic centre. Here we report the cryo-electron microscopy structure of the yeast Saccharomyces cerevisiae pre-catalytic B complex spliceosome at near-atomic resolution. The mobile U2 small nuclear ribonucleoprotein particle (snRNP) associates with U4/U6.U5 tri-snRNP through the U2/U6 helix II and an interface between U4/U6 di-snRNP and the U2 snRNP SF3b-containing domain, which also transiently contacts the helicase Brr2. The 3' region of the U2 snRNP is flexibly attached to the SF3b-containing domain and protrudes over the concave surface of tri-snRNP, where the U1 snRNP may reside before its release from the pre-mRNA 5' splice site. The U6 ACAGAGA sequence forms a hairpin that weakly tethers the 5' splice site. The B complex proteins Prp38, Snu23 and Spp381 bind the Prp8 N-terminal domain and stabilize U6 ACAGAGA stem-pre-mRNA and Brr2-U4 small nuclear RNA interactions. These results provide important insights into the events leading to active site formation. #1: ![]() タイトル: DynaMight: estimating molecular motions with improved reconstruction from cryo-EM images 著者: Schwab J / Kimanius D / Burt A / Dendooven T / Scheres SHW | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 70.6 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 13.9 KB 13.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 79.6 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 4 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 116 MB 116 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 922.1 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 921.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 13.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 16 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | local resolution filtered map from the DynaMight half maps | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: unfiltered, unmasked half map reconstructed with DynaMight
ファイル | emd_19791_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | unfiltered, unmasked half map reconstructed with DynaMight | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: unfiltered, unmasked half map reconstructed with DynaMight
ファイル | emd_19791_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | unfiltered, unmasked half map reconstructed with DynaMight | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Pre-catalytic B complex Spliceosome
全体 | 名称: Pre-catalytic B complex Spliceosome |
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要素 |
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-超分子 #1: Pre-catalytic B complex Spliceosome
超分子 | 名称: Pre-catalytic B complex Spliceosome / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 56.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.3 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.35000000000000003 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.98 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 44537 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 5.0) |