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- EMDB-19043: MAP7 MTBD (microtubule binding domain) decorated Taxol stabilized... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-19043
タイトルMAP7 MTBD (microtubule binding domain) decorated Taxol stabilized microtubule (13pf) protofilament
マップデータUnsharpened map of MAP7 MTBD bound Taxol stabilized microtubule protofilament
試料
  • 複合体: Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol stabilized microtubule
    • 複合体: Tubulin
      • タンパク質・ペプチド: Tubulin alpha-1B chain
      • タンパク質・ペプチド: Tubulin beta chain
    • 複合体: Microtubule associated protein 7 (MAP7)
      • タンパク質・ペプチド: Microtubule associated protein 7 (MAP7)
キーワードMicrotubule associated protein 7(MAP 7) / microtubule binding domain / Taxol stabilized microtubule / cryo-EM / STRUCTURAL PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane / Hedgehog 'off' state / Cilium Assembly / Intraflagellar transport / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / Carboxyterminal post-translational modifications of tubulin / RHOH GTPase cycle / Sealing of the nuclear envelope (NE) by ESCRT-III / Kinesins / PKR-mediated signaling ...Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane / Hedgehog 'off' state / Cilium Assembly / Intraflagellar transport / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / Carboxyterminal post-translational modifications of tubulin / RHOH GTPase cycle / Sealing of the nuclear envelope (NE) by ESCRT-III / Kinesins / PKR-mediated signaling / The role of GTSE1 in G2/M progression after G2 checkpoint / Aggrephagy / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / Mitotic Prometaphase / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / Separation of Sister Chromatids / RHO GTPases activate IQGAPs / RHO GTPases Activate Formins / HSP90 chaperone cycle for steroid hormone receptors (SHR) in the presence of ligand / MHC class II antigen presentation / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / microtubule associated complex / COPI-mediated anterograde transport / response to osmotic stress / establishment or maintenance of cell polarity / protein localization to plasma membrane / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / microtubule cytoskeleton / mitotic cell cycle / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / basolateral plasma membrane / microtubule / axon / signaling receptor binding / GTPase activity / GTP binding / perinuclear region of cytoplasm / structural molecule activity / metal ion binding / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Microtubule-associated protein 7 family / : / MAP7 (E-MAP-115) family / Alpha tubulin / Tubulin-beta mRNA autoregulation signal. / Beta tubulin, autoregulation binding site / Beta tubulin / Tubulin / Tubulin, C-terminal / Tubulin C-terminal domain ...Microtubule-associated protein 7 family / : / MAP7 (E-MAP-115) family / Alpha tubulin / Tubulin-beta mRNA autoregulation signal. / Beta tubulin, autoregulation binding site / Beta tubulin / Tubulin / Tubulin, C-terminal / Tubulin C-terminal domain / Tubulin, conserved site / Tubulin subunits alpha, beta, and gamma signature. / Tubulin/FtsZ family, C-terminal domain / Tubulin/FtsZ-like, C-terminal domain / Tubulin/FtsZ, C-terminal / Tubulin/FtsZ, 2-layer sandwich domain / Tubulin/FtsZ family, GTPase domain / Tubulin/FtsZ family, GTPase domain / Tubulin/FtsZ, GTPase domain / Tubulin/FtsZ, GTPase domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Tubulin beta chain / Ensconsin / Tubulin alpha-1B chain
類似検索 - 構成要素
生物種Sus scrofa (ブタ) / Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å
データ登録者Bangera M / Moores CA
資金援助 英国, 1件
OrganizationGrant number国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MR/R000352/1 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: A structural and dynamic visualization of the interaction between MAP7 and microtubules.
著者: Agnes Adler / Mamata Bangera / J Wouter Beugelink / Salima Bahri / Hugo van Ingen / Carolyn A Moores / Marc Baldus /
要旨: Microtubules (MTs) are key components of the eukaryotic cytoskeleton and are essential for intracellular organization, organelle trafficking and mitosis. MT tasks depend on binding and interactions ...Microtubules (MTs) are key components of the eukaryotic cytoskeleton and are essential for intracellular organization, organelle trafficking and mitosis. MT tasks depend on binding and interactions with MT-associated proteins (MAPs). MT-associated protein 7 (MAP7) has the unusual ability of both MT binding and activating kinesin-1-mediated cargo transport along MTs. Additionally, the protein is reported to stabilize MTs with its 112 amino-acid long MT-binding domain (MTBD). Here we investigate the structural basis of the interaction of MAP7 MTBD with the MT lattice. Using a combination of solid and solution-state nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy with electron microscopy, fluorescence anisotropy and isothermal titration calorimetry, we shed light on the binding mode of MAP7 to MTs at an atomic level. Our results show that a combination of interactions between MAP7 and MT lattice extending beyond a single tubulin dimer and including tubulin C-terminal tails contribute to formation of the MAP7-MT complex.
履歴
登録2023年12月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年3月13日-
マップ公開2024年3月13日-
更新2024年3月13日-
現状2024年3月13日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_19043.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_19043.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 343 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Unsharpened map of MAP7 MTBD bound Taxol stabilized microtubule protofilament
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.07 Å/pix.
x 448 pix.
= 478.016 Å		1.07 Å/pix.
x 448 pix.
= 478.016 Å		1.07 Å/pix.
x 448 pix.
= 478.016 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.067 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.32
最小 - 最大-0.49003446 - 1.284008
平均 (標準偏差)-0.006542572 (±0.040346976)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ448448448
Spacing448448448
セルA=B=C: 478.01602 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Unsharpened C1 reconstruction of MAP7 MTBD bound Taxol...

ファイルemd_19043_additional_1.map
注釈Unsharpened C1 reconstruction of MAP7 MTBD bound Taxol stabilized 13pf microtubule
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Unsharpened half map 1

ファイルemd_19043_half_map_1.map
注釈Unsharpened half map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Unsharpened half map 2

ファイルemd_19043_half_map_2.map
注釈Unsharpened half map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol...

全体名称: Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol stabilized microtubule
要素
  • 複合体: Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol stabilized microtubule
    • 複合体: Tubulin
      • タンパク質・ペプチド: Tubulin alpha-1B chain
      • タンパク質・ペプチド: Tubulin beta chain
    • 複合体: Microtubule associated protein 7 (MAP7)
      • タンパク質・ペプチド: Microtubule associated protein 7 (MAP7)

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超分子 #1: Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol...

超分子名称: Complex of MAP7 MTBD (microtubule binding domain) with 13pf Taxol stabilized microtubule
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
分子量理論値: 13 kDa/nm

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超分子 #2: Tubulin

超分子名称: Tubulin / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2
由来(天然)生物種: Sus scrofa (ブタ)

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超分子 #3: Microtubule associated protein 7 (MAP7)

超分子名称: Microtubule associated protein 7 (MAP7) / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Tubulin alpha-1B chain

分子名称: Tubulin alpha-1B chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Sus scrofa (ブタ)
配列文字列: MRECISIHVG QAGVQIGNAC WELYCLEHGI QPDGQMPSDK TIGGGDDSFN TFFSETGAGK HVPRAVFVDL EPTVIDEVRT GTYRQLFHPE QLITGKEDAA NNYARGHYTI GKEIIDLVLD RIRKLADQCT GLQGFLVFHS FGGGTGSGFT SLLMERLSVD YGKKSKLEFS ...文字列:
MRECISIHVG QAGVQIGNAC WELYCLEHGI QPDGQMPSDK TIGGGDDSFN TFFSETGAGK HVPRAVFVDL EPTVIDEVRT GTYRQLFHPE QLITGKEDAA NNYARGHYTI GKEIIDLVLD RIRKLADQCT GLQGFLVFHS FGGGTGSGFT SLLMERLSVD YGKKSKLEFS IYPAPQVSTA VVEPYNSILT THTTLEHSDC AFMVDNEAIY DICRRNLDIE RPTYTNLNRL ISQIVSSITA SLRFDGALNV DLTEFQTNLV PYPRIHFPLA TYAPVISAEK AYHEQLSVAE ITNACFEPAN QMVKCDPRHG KYMACCLLYR GDVVPKDVNA AIATIKTKRS IQFVDWCPTG FKVGINYQPP TVVPGGDLAK VQRAVCMLSN TTAIAEAWAR LDHKFDLMYA KRAFVHWYVG EGMEEGEFSE AREDMAALEK DYEEVGVDSV EGEGEEEGEE Y

UniProtKB: Tubulin alpha-1B chain

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分子 #2: Tubulin beta chain

分子名称: Tubulin beta chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Sus scrofa (ブタ)
配列文字列: MREIVHIQAG QCGNQIGAKF WEVISDEHGI DPTGSYHGDS DLQLERINVY YNEAAGNKYV PRAILVDLEP GTMDSVRSGP FGQIFRPDNF VFGQSGAGNN WAKGHYTEGA ELVDSVLDVV RKESESCDCL QGFQLTHSLG GGTGSGMGTL LISKIREEYP DRIMNTFSVV ...文字列:
MREIVHIQAG QCGNQIGAKF WEVISDEHGI DPTGSYHGDS DLQLERINVY YNEAAGNKYV PRAILVDLEP GTMDSVRSGP FGQIFRPDNF VFGQSGAGNN WAKGHYTEGA ELVDSVLDVV RKESESCDCL QGFQLTHSLG GGTGSGMGTL LISKIREEYP DRIMNTFSVV PSPKVSDTVV EPYNATLSVH QLVENTDETY CIDNEALYDI CFRTLKLTTP TYGDLNHLVS ATMSGVTTCL RFPGQLNADL RKLAVNMVPF PRLHFFMPGF APLTSRGSQQ YRALTVPELT QQMFDAKNMM AACDPRHGRY LTVAAVFRGR MSMKEVDEQM LNVQNKNSSY FVEWIPNNVK TAVCDIPPRG LKMSATFIGN STAIQELFKR ISEQFTAMFR RKAFLHWYTG EGMDEMEFTE AESNMNDLVS EYQQYQDATA DEQGEFEEEG EEDEA

UniProtKB: Tubulin beta chain

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分子 #3: Microtubule associated protein 7 (MAP7)

分子名称: Microtubule associated protein 7 (MAP7) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
VLRVDDRQRL ARERREEREK QLAAREIVWL EREERARQHY EKHLEERKKR LEEQRQKEER RRAAVEEKRR QRLEEDKERH EAVVRRTMER SQKPKQKHNR WSWGGSLHGS P

UniProtKB: Ensconsin

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 6.5 / 構成要素 - 名称: BRB80 / 詳細: 80mM PIPES, 2mM MgCl2, 1mM EGTA
グリッドモデル: C-flat-2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 40 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細: MAP7 MTBD decorated Taxol stabilized microtubules were applied to a glow discharged grid in a Vitrobot, incubated for 30 seconds at 25 degrees following which excess liquid was blotted off ...詳細: MAP7 MTBD decorated Taxol stabilized microtubules were applied to a glow discharged grid in a Vitrobot, incubated for 30 seconds at 25 degrees following which excess liquid was blotted off and the grid was plunge frozen in liquid ethane..
詳細Tubulin mixed with GTP was incubated in a water bath maintained at 37 degrees for 1 hour followed by addition of Taxol and further incubation for 3 hours. Taxol stabilized microtubules were pelleted in an ultracentrifuge and resuspended in BRB80 buffer. Polymerized microtubules were incubated with MAP7 MTBD in a water bath maintained at 30 degrees for 10 minutes.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 49.93 e/Å2
詳細: Movies were collected in counting mode fractionated over 50 frames
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.4 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 217718
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

25156

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 40100
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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