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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the FB-bound yeast Ceramide Synthase | |||||||||
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![]() | Ceramide Synthase / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() very-long-chain ceramide synthase / acyl-CoA ceramide synthase complex / Sphingolipid de novo biosynthesis / sphingosine N-acyltransferase activity / ceramide biosynthetic process / nuclear periphery / nuclear envelope / endoplasmic reticulum membrane / endoplasmic reticulum 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
![]() | Schaefer J / Clausmeyer L / Koerner C / Moeller A / Froehlich F | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure of the yeast ceramide synthase. 著者: Jan-Hannes Schäfer / Lena Clausmeyer / Carolin Körner / Bianca M Esch / Verena N Wolf / Jennifer Sapia / Yara Ahmed / Stefan Walter / Stefano Vanni / Dovile Januliene / Arne Moeller / Florian Fröhlich / ![]() ![]() 要旨: Ceramides are essential lipids involved in forming complex sphingolipids and acting as signaling molecules. They result from the N-acylation of a sphingoid base and a CoA-activated fatty acid, a ...Ceramides are essential lipids involved in forming complex sphingolipids and acting as signaling molecules. They result from the N-acylation of a sphingoid base and a CoA-activated fatty acid, a reaction catalyzed by the ceramide synthase (CerS) family of enzymes. Yet, the precise structural details and catalytic mechanisms of CerSs have remained elusive. Here we used cryo-electron microscopy single-particle analysis to unravel the structure of the yeast CerS complex in both an active and a fumonisin B1-inhibited state. Our results reveal the complex's architecture as a dimer of Lip1 subunits bound to the catalytic subunits Lag1 and Lac1. Each catalytic subunit forms a hydrophobic crevice connecting the cytosolic site with the intermembrane space. The active site, located centrally in the tunnel, was resolved in a substrate preloaded state, representing one intermediate in ceramide synthesis. Our data provide evidence for competitive binding of fumonisin B1 to the acyl-CoA-binding tunnel. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 328.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 23.9 KB 23.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 14.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 121.6 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 347.6 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 7.4 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 322.1 MB 322.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 24 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 31.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8qtrMC ![]() 8qtnC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.68 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_18653_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_18653_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Heterotetrameric complex of yeast ceramide synthase with Lag1, La...
全体 | 名称: Heterotetrameric complex of yeast ceramide synthase with Lag1, Lac1 and Lip1 |
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要素 |
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-超分子 #1: Heterotetrameric complex of yeast ceramide synthase with Lag1, La...
超分子 | 名称: Heterotetrameric complex of yeast ceramide synthase with Lag1, Lac1 and Lip1 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 140 KDa |
-分子 #1: Ceramide synthase LAG1
分子 | 名称: Ceramide synthase LAG1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 37.150789 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: YREMNYRHSW LTPFFILVCV YSAYFLSGNR TESNPLHMFV AISYQVDGTD SYAKGIKDLS FVFFYMIFFT FLREFLMDVV IRPFTVYLN VTSEHRQKRM LEQMYAIFYC GVSGPFGLYI MYHSDLWLFK TKPMYRTYPV ITNPFLFKIF YLGQAAFWAQ Q ACVLVLQL ...文字列: YREMNYRHSW LTPFFILVCV YSAYFLSGNR TESNPLHMFV AISYQVDGTD SYAKGIKDLS FVFFYMIFFT FLREFLMDVV IRPFTVYLN VTSEHRQKRM LEQMYAIFYC GVSGPFGLYI MYHSDLWLFK TKPMYRTYPV ITNPFLFKIF YLGQAAFWAQ Q ACVLVLQL EKPRKDYKEL VFHHIVTLLL IWSSYVFHFT KMGLAIYITM DVSDFFLSLS KTLNYLNSVF TPFVFGLFVF FW IYLRHVV NIRILWSVLT EFRHEGNYVL NFATQQYKCW ISLPIVFVLI AALQLVNLYW LFLILRILYR LI UniProtKB: Ceramide synthase LAG1 |
-分子 #2: Ceramide synthase LAC1
分子 | 名称: Ceramide synthase LAC1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 35.802074 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: ISYRHAWIAP LMILIAVYSA YFTSGNTTKT NVLHRFVAVS YQIGDTNAYG KGINDLCFVF YYMIFFTFLR EFLMDVVIRP FAIRLHVTS KHRIKRIMEQ MYAIFYTGVS GPFGIYCMYH SDLWFFNTKA MYRTYPDFTN PFLFKVFYLG QAAFWAQQAC I LVLQLEKP ...文字列: ISYRHAWIAP LMILIAVYSA YFTSGNTTKT NVLHRFVAVS YQIGDTNAYG KGINDLCFVF YYMIFFTFLR EFLMDVVIRP FAIRLHVTS KHRIKRIMEQ MYAIFYTGVS GPFGIYCMYH SDLWFFNTKA MYRTYPDFTN PFLFKVFYLG QAAFWAQQAC I LVLQLEKP RKDHNELTFH HIVTLLLIWS SYVFHFTKMG LPIYITMDVS DFLLSFSKTL NYLDSGLAFF SFAIFVVAWI YL RHYINLK ILWSVLTQFR TEGNYVLNFA TQQYKCWISL PIVFVLIGAL QLVNLYWLFL IFRVL UniProtKB: Ceramide synthase LAC1 |
-分子 #3: Ceramide synthase subunit LIP1
分子 | 名称: Ceramide synthase subunit LIP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 15.347415 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: KIFNLFRVCF ISLLLIAAVE YFKYGTRINY EWFHCTPIKE PQSGSVIKLW ARGGPSCDKR GEYKTIVKRI TRDYEPNDEH LSFCIIEND NVPPVHYPIH EDKGEPGYVA YVGYDTDSEL VQELCADSTI YHM UniProtKB: Ceramide synthase subunit LIP1 |
-分子 #4: 1,2-Distearoyl-sn-glycerophosphoethanolamine
分子 | 名称: 1,2-Distearoyl-sn-glycerophosphoethanolamine / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 4 / 式: 3PE |
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分子量 | 理論値: 748.065 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-3PE: |
-分子 #5: Macrofusine
分子 | 名称: Macrofusine / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 2 / 式: WXE |
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分子量 | 理論値: 721.83 Da |
-分子 #6: hexacosanoic acid
分子 | 名称: hexacosanoic acid / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 2 / 式: 7PO |
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分子量 | 理論値: 396.69 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-7PO: |
-分子 #7: [(2S)-1-hexadecanoyloxy-3-[hydroxy-[(2S,3R,5S,6R)-2,3,4,5,6-penta...
分子 | 名称: [(2S)-1-hexadecanoyloxy-3-[hydroxy-[(2S,3R,5S,6R)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl]oxy-phosphoryl]oxy-propan-2-yl] heptadecanoate タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: PIJ |
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分子量 | 理論値: 825.059 Da |
-分子 #8: AMMONIUM ION
分子 | 名称: AMMONIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 2 / 式: NH4 |
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分子量 | 理論値: 18.038 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-NH4: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
緩衝液 | pH: 6.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |