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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1785 | |||||||||
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タイトル | The Structure of a COPII Tubule | |||||||||
マップデータ | Isosurface contour map of Subvolume averaged Cuboctahedron cage. | |||||||||
試料 |
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キーワード | Secretory pathway / Cryo-electron microscopy / Cryo-electron tomography / COPII / cargo / Subvolume averaging | |||||||||
機能・相同性 | intracellular protein transport / WD40 repeat 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 85.0 Å | |||||||||
データ登録者 | ODonnell J / Maddox K / Stagg S | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2011 タイトル: The structure of a COPII tubule. 著者: Jason O'Donnell / Kerry Maddox / Scott Stagg / 要旨: Nearly a third of all eukaryotic proteins are transported from the ER to the Golgi apparatus through the secretory pathway using COPII coated vesicles. Evidence suggests that this transport occurs ...Nearly a third of all eukaryotic proteins are transported from the ER to the Golgi apparatus through the secretory pathway using COPII coated vesicles. Evidence suggests that this transport occurs via 500-900 Å vesicles that bud from the ER membrane. It has been shown that procollagen molecules utilize the COPII proteins for transport, but it is unclear how the COPII coat can accommodate these ∼3000 Å long molecules. We now present a cryogenic electron tomographic reconstruction of a Sec13/31 tubule that is approximately 3300 Å long containing a hollow cylindrical interior that is 300 Å in diameter, dimensions that are consistent with those that are required to encapsulate a procollagen molecule wrapped in a membrane and accessory COPII components. This structure suggests a novel mechanism that the COPII coat may employ to transport elongated cargo. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1785.map.gz | 2.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1785-v30.xml emd-1785.xml | 9.9 KB 9.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1785.jpg | 50.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1785 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1785 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1785_validation.pdf.gz | 193.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1785_full_validation.pdf.gz | 192.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1785_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1785 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1785 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1785.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 26.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Isosurface contour map of Subvolume averaged Cuboctahedron cage. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 9.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Oligomeric assembly of Sec13-31 proteins
全体 | 名称: Oligomeric assembly of Sec13-31 proteins |
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要素 |
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-超分子 #1000: Oligomeric assembly of Sec13-31 proteins
超分子 | 名称: Oligomeric assembly of Sec13-31 proteins / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 24-mer made by Interlocked Cuboctahedrons / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 8.14 MDa |
-分子 #1: SEC13R
分子 | 名称: SEC13R / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Sec13 / コピー数: 12 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human / 細胞: Sf9 |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | GO: intracellular protein transport / InterPro: WD40 repeat |
-分子 #2: SEC31L1
分子 | 名称: SEC31L1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Sec31 / コピー数: 12 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human / 細胞: Sf9 |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | GO: intracellular protein transport / InterPro: WD40 repeat |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM Tris-Cl, pH 7.5, 700 mM KOAc, 1mM MgOAc, 10mM DTT |
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グリッド | 詳細: Quantifoil 2/2, 400 mesh copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: OTHER 詳細: Vitrification instrument: FEI Vitrobot. Grid plasma cleaned for 30s with Gatan Solarus 950 plasma cleaner using a ratio of 75-25 of Argon-Oxygen. 手法: Temperature of chamber was 4 degrees C. 0 seconds drain time. Single blot. 0 mm offset. 3 ul sample applied to grid. Blot for 2.5 seconds before plunging. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM300FEG/T |
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撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 64 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 24000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder. 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Max angle: 64 ° |
-画像解析
詳細 | The Subvolume motif was selected using the program PROTOMO. Average number of tilts used in the 3D reconstructions: 250. Average tomographic tilt angle increment: 2. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 85.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: PROTOMO |