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万見
- EMDB-15996: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymeras... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-15996
タイトルEarly transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
マップデータLoc-Scale filtered
試料
  • 複合体: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase acidic protein
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase basic protein 2
    • RNA: 5' vRNA
    • RNA: 3' vRNA
    • RNA: mRNA
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE
  • リガンド: water
キーワードInfluenza / viral RNA-dependent RNA polymerase / antiviral drug / nucleoside analogue / T705 (favipiravir) / T1106 / cap-dependent transcription / backtracking / VIRAL PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


cap snatching / viral transcription / symbiont-mediated suppression of host mRNA transcription via inhibition of RNA polymerase II activity / host cell mitochondrion / 7-methylguanosine mRNA capping / virion component / endonuclease activity / host cell cytoplasm / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / RNA-directed RNA polymerase ...cap snatching / viral transcription / symbiont-mediated suppression of host mRNA transcription via inhibition of RNA polymerase II activity / host cell mitochondrion / 7-methylguanosine mRNA capping / virion component / endonuclease activity / host cell cytoplasm / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / host cell nucleus / RNA binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB2 / PB2, C-terminal / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / : / : / Influenza RNA polymerase PB2 N-terminal region / Influenza RNA polymerase PB2 second domain / : / : ...Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB2 / PB2, C-terminal / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / : / : / Influenza RNA polymerase PB2 N-terminal region / Influenza RNA polymerase PB2 second domain / : / : / Influenza RNA polymerase PB2 middle domain / Influenza RNA polymerase PB2 C-terminal domain / : / Influenza RNA polymerase PB2 6th domain / : / Influenza RNA polymerase PB2 CAP binding domain / : / Influenza RNA polymerase PB2 helical domain / Polymerase acidic protein / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA, endonuclease domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA / RNA-directed RNA polymerase, negative-strand RNA virus / RdRp of negative ssRNA viruses with segmented genomes catalytic domain profile.
類似検索 - ドメイン・相同性
Polymerase basic protein 2 / RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / Polymerase acidic protein
類似検索 - 構成要素
生物種Influenza B virus (B/Memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス) / Influenza B virus (B型インフルエンザウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.34 Å
データ登録者Cusack S / Kouba T
資金援助 フランス, 1件
OrganizationGrant number国
French National Research Agency フランス
引用ジャーナル: Cell Rep / 年: 2023
タイトル: Direct observation of backtracking by influenza A and B polymerases upon consecutive incorporation of the nucleoside analog T1106.
著者: Tomas Kouba / Anna Dubankova / Petra Drncova / Elisa Donati / Pietro Vidossich / Valentina Speranzini / Alex Pflug / Johanna Huchting / Chris Meier / Marco De Vivo / Stephen Cusack /
要旨: The antiviral pseudo-base T705 and its de-fluoro analog T1106 mimic adenine or guanine and can be competitively incorporated into nascent RNA by viral RNA-dependent RNA polymerases. Although ...The antiviral pseudo-base T705 and its de-fluoro analog T1106 mimic adenine or guanine and can be competitively incorporated into nascent RNA by viral RNA-dependent RNA polymerases. Although dispersed, single pseudo-base incorporation is mutagenic, consecutive incorporation causes polymerase stalling and chain termination. Using a template encoding single and then consecutive T1106 incorporation four nucleotides later, we obtained a cryogenic electron microscopy structure of stalled influenza A/H7N9 polymerase. This shows that the entire product-template duplex backtracks by 5 nt, bringing the singly incorporated T1106 to the +1 position, where it forms an unexpected T1106:U wobble base pair. Similar structures show that influenza B polymerase also backtracks after consecutive T1106 incorporation, regardless of whether prior single incorporation has occurred. These results give insight into the unusual mechanism of chain termination by pyrazinecarboxamide base analogs. Consecutive incorporation destabilizes the proximal end of the product-template duplex, promoting irreversible backtracking to a more energetically favorable overall configuration.
履歴
登録2022年10月20日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年12月28日-
マップ公開2022年12月28日-
更新2024年7月24日-
現状2024年7月24日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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添付画像

emd_15996.png

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_15996.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
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軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.65 Å/pix.
x 420 pix.
= 270.9 Å		0.65 Å/pix.
x 420 pix.
= 270.9 Å		0.65 Å/pix.
x 420 pix.
= 270.9 Å

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ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.645 Å
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ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.24
最小 - 最大-0.2908768 - 0.93070394
平均 (標準偏差)0.0026803974 (±0.028314402)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ420420420
Spacing420420420
セルA=B=C: 270.9 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Relion post-processed

ファイルemd_15996_additional_1.map
注釈Relion post-processed
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

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ヒストグラム

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ハーフマップ: Half-map

ファイルemd_15996_half_map_1.map
注釈Half-map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half-map

ファイルemd_15996_half_map_2.map
注釈Half-map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymeras...

全体名称: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
要素
  • 複合体: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase acidic protein
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase basic protein 2
    • RNA: 5' vRNA
    • RNA: 3' vRNA
    • RNA: mRNA
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE
  • リガンド: water

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超分子 #1: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymeras...

超分子名称: Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B/Memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス)

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分子 #1: Polymerase acidic protein

分子名称: Polymerase acidic protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
EC番号: 加水分解酵素; エステル加水分解酵素
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B/Memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス)
株: B/Memphis/13/2003
分子量理論値: 85.822781 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: GSHHHHHHHH GSGSMDTFIT RNFQTTIIQK AKNTMAEFSE DPELQPAMLF NICVHLEVCY VISDMNFLDE EGKAYTALEG QGKEQNLRP QYEVIEGMPR TIAWMVQRSL AQEHGIETPK YLADLFDYKT KRFIEVGITK GLADDYFWKK KEKLGNSMEL M IFSYNQDY ...文字列:
GSHHHHHHHH GSGSMDTFIT RNFQTTIIQK AKNTMAEFSE DPELQPAMLF NICVHLEVCY VISDMNFLDE EGKAYTALEG QGKEQNLRP QYEVIEGMPR TIAWMVQRSL AQEHGIETPK YLADLFDYKT KRFIEVGITK GLADDYFWKK KEKLGNSMEL M IFSYNQDY SLSNESSLDE EGKGRVLSRL TELQAELSLK NLWQVLIGEE DVEKGIDFKL GQTISRLRDI SVPAGFSNFE GM RSYIDNI DPKGAIERNL ARMSPLVSVT PKKLTWEDLR PIGPHIYNHE LPEVPYNAFL LMSDELGLAN MTEGKSKKPK TLA KECLEK YSTLRDQTDP ILIMKSEKAN ENFLWKLWRD CVNTISNEEM SNELQKTNYA KWATGDGLTY QKIMKEVAID DETM CQEEP KIPNKCRVAA WVQTEMNLLS TLTSKRALDL PEIGPDVAPV EHVGSERRKY FVNEINYCKA STVMMKYVLF HTSLL NESN ASMGKYKVIP ITNRVVNEKG ESFDMLYGLA VKGQSHLRGD TDVVTVVTFE FSSTDPRVDS GKWPKYTVFR IGSLFV SGR EKSVYLYCRV NGTNKIQMKW GMEARRCLLQ SMQQMEAIVE QESSIQGYDM TKACFKGDRV NSPKTFSIGT QEGKLVK GS FGKALRVIFT KCLMHYVFGN AQLEGFSAES RRLLLLIQAL KDRKGPWVFD LEGMYSGIEE CISNNPWVIQ SAYWFNEW L GFEKEGSKVL ESVDEIMDEG SGSGENLYFQ

UniProtKB: Polymerase acidic protein

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分子 #2: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit

分子名称: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B/Memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス)
株: B/Memphis/13/2003
分子量理論値: 86.207016 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: GSGSGSGSGM NINPYFLFID VPIQAAISTT FPYTGVPPYS HGTGTGYTID TVIRTHEYSN KGKQYISDVT GCTMVDPTNG PLPEDNEPS AYAQLDCVLE ALDRMDEEHP GLFQAASQNA METLMVTTVD KLTQGRQTFD WTVCRNQPAA TALNTTITSF R LNDLNGAD ...文字列:
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UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit

+
分子 #3: Polymerase basic protein 2

分子名称: Polymerase basic protein 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B/Memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス)
株: B/Memphis/13/2003
分子量理論値: 90.844109 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: GSGSGSGSGM TLAKIELLKQ LLRDNEAKTV LKQTTVDQYN IIRKFNTSRI EKNPSLRMKW AMCSNFPLAL TKGDMANRIP LEYKGIQLK TNAEDIGTKG QMCSIAAVTW WNTYGPIGDT EGFERVYESF FLRKMRLDNA TWGRITFGPV ERVRKRVLLN P LTKEMPPD ...文字列:
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UniProtKB: Polymerase basic protein 2

+
分子 #4: 5' vRNA

分子名称: 5' vRNA / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B型インフルエンザウイルス)
分子量理論値: 4.49574 KDa
配列文字列:
AGUAGUAACA AGUU

+
分子 #5: 3' vRNA

分子名称: 3' vRNA / タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B型インフルエンザウイルス)
分子量理論値: 6.698029 KDa
配列文字列:
UAUACAACUG ACGAGGCUAU U

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分子 #6: mRNA

分子名称: mRNA / タイプ: rna / ID: 6 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Influenza B virus (B型インフルエンザウイルス)
分子量理論値: 6.308756 KDa
配列文字列:
AUCUAUAAUA GCCUC(K1F)UC(K1F)(K1F)

+
分子 #7: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

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分子 #8: P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE

分子名称: P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE
タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 1 / 式: GTA
分子量理論値: 787.441 Da
Chemical component information

ChemComp-GTA:
P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE / 7-メチルグアノシン-7-イウム5′-三りん酸Oγ-(5′-アデノシル)

+
分子 #9: water

分子名称: water / タイプ: ligand / ID: 9 / コピー数: 95 / 式: HOH
分子量理論値: 18.015 Da
Chemical component information

ChemComp-HOH:
WATER

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:

6t0v

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.34 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 302395
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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