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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15905 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the E.coli 70S ribosome in complex with the antibiotic Myxovalargin B. | |||||||||
マップデータ | Post-processed masked map | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation ...ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Myxococcus fulvus (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Koller TO / Graf M / Wilson DN | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: J Am Chem Soc / 年: 2023 タイトル: The Myxobacterial Antibiotic Myxovalargin: Biosynthesis, Structural Revision, Total Synthesis, and Molecular Characterization of Ribosomal Inhibition. 著者: Timm O Koller / Ullrich Scheid / Teresa Kösel / Jennifer Herrmann / Daniel Krug / Helena I M Boshoff / Bertrand Beckert / Joanna C Evans / Jan Schlemmer / Becky Sloan / Danielle M Weiner / ...著者: Timm O Koller / Ullrich Scheid / Teresa Kösel / Jennifer Herrmann / Daniel Krug / Helena I M Boshoff / Bertrand Beckert / Joanna C Evans / Jan Schlemmer / Becky Sloan / Danielle M Weiner / Laura E Via / Atica Moosa / Thomas R Ioerger / Michael Graf / Boris Zinshteyn / Maha Abdelshahid / Fabian Nguyen / Stefan Arenz / Franziska Gille / Maik Siebke / Tim Seedorf / Oliver Plettenburg / Rachel Green / Anna-Luisa Warnke / Joachim Ullrich / Ralf Warrass / Clifton E Barry / Digby F Warner / Valerie Mizrahi / Andreas Kirschning / Daniel N Wilson / Rolf Müller / 要旨: Resistance of bacterial pathogens against antibiotics is declared by WHO as a major global health threat. As novel antibacterial agents are urgently needed, we re-assessed the broad-spectrum ...Resistance of bacterial pathogens against antibiotics is declared by WHO as a major global health threat. As novel antibacterial agents are urgently needed, we re-assessed the broad-spectrum myxobacterial antibiotic myxovalargin and found it to be extremely potent against . To ensure compound supply for further development, we studied myxovalargin biosynthesis in detail enabling production via fermentation of a native producer. Feeding experiments as well as functional genomics analysis suggested a structural revision, which was eventually corroborated by the development of a concise total synthesis. The ribosome was identified as the molecular target based on resistant mutant sequencing, and a cryo-EM structure revealed that myxovalargin binds within and completely occludes the exit tunnel, consistent with a mode of action to arrest translation during a late stage of translation initiation. These studies open avenues for structure-based scaffold improvement toward development as an antibacterial agent. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15905.map.gz | 25 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-15905-v30.xml emd-15905.xml | 70.2 KB 70.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_15905_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_15905.png | 87.6 KB | ||
その他 | emd_15905_additional_1.map.gz emd_15905_additional_2.map.gz emd_15905_half_map_1.map.gz emd_15905_half_map_2.map.gz | 166.1 MB 138.9 MB 140.5 MB 140.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15905 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15905 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_15905_validation.pdf.gz | 769.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_15905_full_validation.pdf.gz | 768.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_15905_validation.xml.gz | 20.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_15905_validation.cif.gz | 26.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15905 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15905 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8b7yMC 7qq3C C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15905.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Post-processed masked map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.053 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: post-processed map
ファイル | emd_15905_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | post-processed map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: 3D refined map
ファイル | emd_15905_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | 3D refined map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half-map2
ファイル | emd_15905_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half-map2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half-map1
ファイル | emd_15905_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half-map1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Cryo-EM structure of the E.coli 70S ribosome in complex with the ...
+超分子 #1: Cryo-EM structure of the E.coli 70S ribosome in complex with the ...
+分子 #1: 23S ribosomal RNA
+分子 #2: 5S ribosomal RNA
+分子 #29: P-tRNA fMet
+分子 #30: 16S ribosomal RNA
+分子 #51: messenger RNA
+分子 #3: 50S ribosomal protein L2
+分子 #4: 50S ribosomal protein L3
+分子 #5: 50S ribosomal protein L4
+分子 #6: 50S ribosomal protein L6
+分子 #7: 50S ribosomal protein L13
+分子 #8: 50S ribosomal protein L14
+分子 #9: 50S ribosomal protein L15
+分子 #10: 50S ribosomal protein L16
+分子 #11: 50S ribosomal protein L17
+分子 #12: 50S ribosomal protein L18
+分子 #13: 50S ribosomal protein L19
+分子 #14: 50S ribosomal protein L20
+分子 #15: 50S ribosomal protein L21
+分子 #16: 50S ribosomal protein L22
+分子 #17: 50S ribosomal protein L23
+分子 #18: 50S ribosomal protein L24
+分子 #19: 50S ribosomal protein L25
+分子 #20: 50S ribosomal protein L27
+分子 #21: 50S ribosomal protein L28
+分子 #22: 50S ribosomal protein L29
+分子 #23: 50S ribosomal protein L30
+分子 #24: 50S ribosomal protein L32
+分子 #25: 50S ribosomal protein L33
+分子 #26: 50S ribosomal protein L34
+分子 #27: 50S ribosomal protein L35
+分子 #28: 50S ribosomal protein L36
+分子 #31: 30S ribosomal protein S2
+分子 #32: 30S ribosomal protein S3
+分子 #33: 30S ribosomal protein S4
+分子 #34: 30S ribosomal protein S5
+分子 #35: 30S ribosomal protein S6
+分子 #36: 30S ribosomal protein S7
+分子 #37: 30S ribosomal protein S8
+分子 #38: 30S ribosomal protein S9
+分子 #39: 30S ribosomal protein S10
+分子 #40: 30S ribosomal protein S11
+分子 #41: 30S ribosomal protein S12
+分子 #42: 30S ribosomal protein S13
+分子 #43: 30S ribosomal protein S14
+分子 #44: 30S ribosomal protein S15
+分子 #45: 30S ribosomal protein S16
+分子 #46: 30S ribosomal protein S17
+分子 #47: 30S ribosomal protein S18
+分子 #48: 30S ribosomal protein S19
+分子 #49: 30S ribosomal protein S20
+分子 #50: 30S ribosomal protein S21
+分子 #52: Myxovalargin B
+分子 #53: MAGNESIUM ION
+分子 #54: ZINC ION
+分子 #55: N-FORMYLMETHIONINE
+分子 #56: SPERMIDINE
+分子 #57: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - Film thickness: 20.0 nm |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 2.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |