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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Upright KimA dimer with bound c-di-AMP from B. subtilis | |||||||||
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![]() | potassium importer / second messenger / c-di-AMP / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | : / Amino acid/polyamine transporter I / Amino acid permease / symporter activity / potassium ion transport / metal ion binding / plasma membrane / Potassium transporter KimA![]() | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
![]() | Vonck J / Wieferig JP | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cyclic di-AMP traps proton-coupled K transporters of the KUP family in an inward-occluded conformation. 著者: Michael F Fuss / Jan-Philip Wieferig / Robin A Corey / Yvonne Hellmich / Igor Tascón / Joana S Sousa / Phillip J Stansfeld / Janet Vonck / Inga Hänelt / ![]() ![]() ![]() 要旨: Cyclic di-AMP is the only known essential second messenger in bacteria and archaea, regulating different proteins indispensable for numerous physiological processes. In particular, it controls ...Cyclic di-AMP is the only known essential second messenger in bacteria and archaea, regulating different proteins indispensable for numerous physiological processes. In particular, it controls various potassium and osmolyte transporters involved in osmoregulation. In Bacillus subtilis, the K/H symporter KimA of the KUP family is inactivated by c-di-AMP. KimA sustains survival at potassium limitation at low external pH by mediating potassium ion uptake. However, at elevated intracellular K concentrations, further K accumulation would be toxic. In this study, we reveal the molecular basis of how c-di-AMP binding inhibits KimA. We report cryo-EM structures of KimA with bound c-di-AMP in detergent solution and reconstituted in amphipols. By combining structural data with functional assays and molecular dynamics simulations we reveal how c-di-AMP modulates transport. We show that an intracellular loop in the transmembrane domain interacts with c-di-AMP bound to the adjacent cytosolic domain. This reduces the mobility of transmembrane helices at the cytosolic side of the K binding site and therefore traps KimA in an inward-occluded conformation. #1: ![]() タイトル: Cyclic di-AMP traps proton-coupled K+ transporters of the KUP family in an inward-occluded conformation 著者: Fuss MF / Wieferig JP / Corey R / Hellmich Y / Tascon I / Sousa JS / Stansfeld P / Vonck J / Haenelt I | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 65.6 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 25.7 KB 25.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 9.4 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 74.8 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.6 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | 52.9 MB 54.7 MB 54.7 MB 65.6 MB 53.4 MB 53.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8b71MC ![]() 8b70C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.831 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: unsharpened map
ファイル | emd_15895_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | unsharpened map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Halfmap2 focused refinement half-dimer
ファイル | emd_15895_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Halfmap2 focused refinement half-dimer | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Halfmap1 focused refinement half-dimer
ファイル | emd_15895_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Halfmap1 focused refinement half-dimer | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Focused refinement half-dimer
ファイル | emd_15895_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | Focused refinement half-dimer | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_15895_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_15895_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Upright dimer KimA with c-di-AMP bound
全体 | 名称: Upright dimer KimA with c-di-AMP bound |
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要素 |
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-超分子 #1: Upright dimer KimA with c-di-AMP bound
超分子 | 名称: Upright dimer KimA with c-di-AMP bound / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 134 KDa |
-分子 #1: Potassium transporter KimA
分子 | 名称: Potassium transporter KimA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 66.838977 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MYHSIKRFLI GKPLKSQAAG EQKLTKLKAL AMLSSDALSS VAYGTEQILI ILATISAAAF WYSIPIAVGV LILLLALILS YRQIIYAYP QGGGAYIVSK ENLGEKPGLI AGGSLLVDYI LTVAVSISAG TDAITSAFPA LHDYHVPIAI FLVLVIMILN L RGLSESAS ...文字列: MYHSIKRFLI GKPLKSQAAG EQKLTKLKAL AMLSSDALSS VAYGTEQILI ILATISAAAF WYSIPIAVGV LILLLALILS YRQIIYAYP QGGGAYIVSK ENLGEKPGLI AGGSLLVDYI LTVAVSISAG TDAITSAFPA LHDYHVPIAI FLVLVIMILN L RGLSESAS ILAYPVYLFV VALLVLIAVG LFKLMTGQID QPAHHTSLGT PVAGITLFLL LKAFSSGCSA LTGVEAISNA IP AFKNPPA RNAARTLAMM GILLAILFSG ITVLAYGYGT APKPDETVVS QIASETFGRN VFYYVIQGVT SLILVLAANT GFS AFPQLA FNLARDQYMP RMFTVRGDRL GFSNGIIFLG FASIVLIILF GGQTEHLIPL YAVGVFIPFT LSQTGMCMKW IKQK PKGWI GKMLINSCGA LISFMVLSIL FVTKFNVVWP VLIFMPIVVL LFFAIKNHYT AVGEQLRIVD KEPEEIKGTV VIVPV AGVT TVVQKSIHYA KSLSDQVIAV HVSFDREQEK KFEKRWEELN NGVRLVTLHS SYRSLVHPFD KFLETVEAKA KKEQFS VMV LFPQFITKKR WHTILHNQSA FLLRVRLFWK KDIMVATLPY HFKK UniProtKB: Potassium transporter KimA |
-分子 #2: (2R,3R,3aS,5R,7aR,9R,10R,10aS,12R,14aR)-2,9-bis(6-amino-9H-purin-...
分子 | 名称: (2R,3R,3aS,5R,7aR,9R,10R,10aS,12R,14aR)-2,9-bis(6-amino-9H-purin-9-yl)octahydro-2H,7H-difuro[3,2-d:3',2'-j][1,3,7,9,2,8 ]tetraoxadiphosphacyclododecine-3,5,10,12-tetrol 5,12-dioxide タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 2 / 式: 2BA |
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分子量 | 理論値: 658.412 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 2.25 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 400 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | Reconstituted in amphipols PMAL C8 |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 55.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.1 µm |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |