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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12960 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the Sulfolobus acidocaldarius RNA polymerase at 2.88 A | |||||||||
マップデータ | sharpened map obtained from Autosharpen (Phenix v.1.15), box size 332 pixels | |||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase / transcription / Archaea / Crenarchaea | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 3 iron, 4 sulfur cluster binding / RNA polymerase III activity / RNA polymerase II activity / RNA polymerase I activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity ...3 iron, 4 sulfur cluster binding / RNA polymerase III activity / RNA polymerase II activity / RNA polymerase I activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Sulfolobus acidocaldarius (strain ATCC 33909 / DSM 639 / JCM 8929 / NBRC 15157 / NCIMB 11770) (好気性・好酸性) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Pilotto S / Fouqueau T | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Structural basis of RNA polymerase inhibition by viral and host factors. 著者: Simona Pilotto / Thomas Fouqueau / Natalya Lukoyanova / Carol Sheppard / Soizick Lucas-Staat / Luis Miguel Díaz-Santín / Dorota Matelska / David Prangishvili / Alan C M Cheung / Finn Werner / 要旨: RNA polymerase inhibition plays an important role in the regulation of transcription in response to environmental changes and in the virus-host relationship. Here we present the high-resolution ...RNA polymerase inhibition plays an important role in the regulation of transcription in response to environmental changes and in the virus-host relationship. Here we present the high-resolution structures of two such RNAP-inhibitor complexes that provide the structural bases underlying RNAP inhibition in archaea. The Acidianus two-tailed virus encodes the RIP factor that binds inside the DNA-binding channel of RNAP, inhibiting transcription by occlusion of binding sites for nucleic acid and the transcription initiation factor TFB. Infection with the Sulfolobus Turreted Icosahedral Virus induces the expression of the host factor TFS4, which binds in the RNAP funnel similarly to eukaryotic transcript cleavage factors. However, TFS4 allosterically induces a widening of the DNA-binding channel which disrupts trigger loop and bridge helix motifs. Importantly, the conformational changes induced by TFS4 are closely related to inactivated states of RNAP in other domains of life indicating a deep evolutionary conservation of allosteric RNAP inhibition. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12960.map.gz | 125.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12960-v30.xml emd-12960.xml | 37.6 KB 37.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_12960_fsc.xml | 11.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_12960.png | 104.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-12960.cif.gz | 9.5 KB | ||
その他 | emd_12960_half_map_1.map.gz emd_12960_half_map_2.map.gz | 110.2 MB 110.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12960 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12960 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12960_validation.pdf.gz | 823.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12960_full_validation.pdf.gz | 822.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12960_validation.xml.gz | 19.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12960_validation.cif.gz | 25.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12960 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12960 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12960.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 139.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | sharpened map obtained from Autosharpen (Phenix v.1.15), box size 332 pixels | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.085 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: half1 map obtained from Refine3D (Relion v.3.0), box size 332 pixels
ファイル | emd_12960_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half1 map obtained from Refine3D (Relion v.3.0), box size 332 pixels | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2 map obtained from Refine3D (Relion v.3.0), box size 332 pixels
ファイル | emd_12960_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half2 map obtained from Refine3D (Relion v.3.0), box size 332 pixels | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : apo-RNA polymerase
+超分子 #1: apo-RNA polymerase
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit A'
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit B
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit A''
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit D
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerase subunit E
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerase, subunit F
+分子 #7: DNA-directed RNA polymerase, subunit G
+分子 #8: DNA-directed RNA polymerase subunit H
+分子 #9: DNA-directed RNA polymerase subunit K
+分子 #10: DNA-directed RNA polymerase subunit L
+分子 #11: DNA-directed RNA polymerase subunit N
+分子 #12: DNA-directed RNA polymerase subunit P
+分子 #13: Conserved protein
+分子 #14: MAGNESIUM ION
+分子 #15: ZINC ION
+分子 #16: FE3-S4 CLUSTER
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.06 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7 構成要素:
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR 詳細: The grid was coated with graphene oxide prior to use | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 94 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | |||||||||||||||
詳細 | The sample was crosslinked with bis(sulfosuccinimidyl)suberate (BS3) |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1676 / 平均電子線量: 44.46 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode for a total of 40 frames in super-resolution mode and with a tilt of 30 degrees |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.3 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 57.7772 / 当てはまり具合の基準: CC |
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得られたモデル | PDB-7ok0: |