+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11851 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Atomic structure of the poxvirus initially transcribing complex in conformation 3 | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | Vaccinia / Virus / RNA polymerase / DNA-dependent / initiation complex / poxvirus / poxviridae / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 viral transcription / RNA polymerase I activity / DNA-directed RNA polymerase complex / nucleotidyltransferase activity / DNA-templated transcription termination / virion component / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / DNA-binding transcription factor activity ...viral transcription / RNA polymerase I activity / DNA-directed RNA polymerase complex / nucleotidyltransferase activity / DNA-templated transcription termination / virion component / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / DNA-binding transcription factor activity / DNA-templated transcription / DNA binding / zinc ion binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Vaccinia virus GLV-1h68 (ウイルス) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.01 Å | |||||||||
データ登録者 | Grimm C / Bartuli J | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Structural basis of the complete poxvirus transcription initiation process. 著者: Clemens Grimm / Julia Bartuli / Bettina Boettcher / Aladar A Szalay / Utz Fischer / 要旨: Poxviruses express their genes in the cytoplasm of infected cells using a virus-encoded multi-subunit polymerase (vRNAP) and unique transcription factors. We present cryo-EM structures that uncover ...Poxviruses express their genes in the cytoplasm of infected cells using a virus-encoded multi-subunit polymerase (vRNAP) and unique transcription factors. We present cryo-EM structures that uncover the complete transcription initiation phase of the poxvirus vaccinia. In the pre-initiation complex, the heterodimeric early transcription factor VETFs/l adopts an arc-like shape spanning the polymerase cleft and anchoring upstream and downstream promoter elements. VETFI emerges as a TBP-like protein that inserts asymmetrically into the DNA major groove, triggers DNA melting, ensures promoter recognition and enforces transcription directionality. The helicase VETFs fosters promoter melting and the phospho-peptide domain (PPD) of vRNAP subunit Rpo30 enables transcription initiation. An unprecedented upstream promoter scrunching mechanism assisted by the helicase NPH-I probably fosters promoter escape and transition into elongation. Our structures shed light on unique mechanisms of poxviral gene expression and aid the understanding of thus far unexplained universal principles in transcription. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11851.map.gz | 7.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-11851-v30.xml emd-11851.xml | 26 KB 26 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_11851.png | 65.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-11851.cif.gz | 9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11851 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11851 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11851_validation.pdf.gz | 379.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_11851_full_validation.pdf.gz | 379.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11851_validation.xml.gz | 6.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_11851_validation.cif.gz | 7.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11851 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11851 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11851.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.0635 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Vaccinia transcription pre-initiation complex
+超分子 #1: Vaccinia transcription pre-initiation complex
+超分子 #2: DNA-directed RNA polymerase and Protein H4
+超分子 #3: RNA
+超分子 #4: Synthetic promoter DNA oligomer, template strand
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase 147 kDa polypeptide
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase 35 kDa subunit
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerase 19 kDa subunit
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerase 18 kDa subunit
+分子 #7: Protein H4
+分子 #8: DNA-directed RNA polymerase 7 kDa subunit
+分子 #10: DNA-directed RNA polymerase 30 kDa polypeptide
+分子 #9: RNA (5'-R(P*AP*UP*AP*AP*A)-3')
+分子 #11: Synthetic promoter DNA oligomer, template strand
+分子 #12: MAGNESIUM ION
+分子 #13: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.15 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | monodisperse sample prepared by sucrose gradient centrifugation |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 3 / 平均露光時間: 74.99 sec. / 平均電子線量: 78.9 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
---|---|
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.01 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 96165 |
初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |