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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1142 | |||||||||
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タイトル | Localization of the coactivator Cdh1 and the cullin subunit Apc2 in a cryo-electron microscopy model of vertebrate APC/C. | |||||||||
マップデータ | This is a 3D map of the Xenopus APC/C in complex with an activator Cdh1 | |||||||||
試料 |
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生物種 | Xenopus laevis (アフリカツメガエル) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 24.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Dube P / Herzog F / Peters JM / Stark H | |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2005 タイトル: Localization of the coactivator Cdh1 and the cullin subunit Apc2 in a cryo-electron microscopy model of vertebrate APC/C. 著者: Prakash Dube / Franz Herzog / Christian Gieffers / Bjoern Sander / Dietmar Riedel / Shirley A Müller / Andreas Engel / Jan-Michael Peters / Holger Stark / 要旨: The anaphase-promoting complex/cyclosome (APC/C) is a ubiquitin ligase with essential functions in mitosis, meiosis, and G1 phase of the cell cycle. APC/C recognizes substrates via coactivator ...The anaphase-promoting complex/cyclosome (APC/C) is a ubiquitin ligase with essential functions in mitosis, meiosis, and G1 phase of the cell cycle. APC/C recognizes substrates via coactivator proteins such as Cdh1, and bound substrates are ubiquitinated by E2 enzymes that interact with a hetero-dimer of the RING subunit Apc11 and the cullin Apc2. We have obtained three-dimensional (3D) models of human and Xenopus APC/C by angular reconstitution and random conical tilt (RCT) analyses of negatively stained cryo-electron microscopy (cryo-EM) preparations, have determined the masses of these particles by scanning transmission electron microscopy (STEM), and have mapped the locations of Cdh1 and Apc2. These proteins are located on the same side of the asymmetric APC/C, implying that this is where substrates are ubiquitinated. We have further identified a large flexible domain in APC/C that adopts a different orientation upon Cdh1 binding. Cdh1 may thus activate APC/C both by recruiting substrates and by inducing conformational changes. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1142.map.gz | 14.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1142-v30.xml emd-1142.xml | 8.1 KB 8.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1142.gif | 8.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1142 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1142 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1142_validation.pdf.gz | 233.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1142_full_validation.pdf.gz | 232.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1142_validation.xml.gz | 5.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1142 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1142 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1142.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 15.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is a 3D map of the Xenopus APC/C in complex with an activator Cdh1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.318 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Anaphase Promoting Complex
全体 | 名称: Anaphase Promoting Complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: Anaphase Promoting Complex
超分子 | 名称: Anaphase Promoting Complex / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Monomer / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 1.5 MDa |
-分子 #1: Anaphase Promoting Complex
分子 | 名称: Anaphase Promoting Complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Xenopus laevis (アフリカツメガエル) / 別称: Xenopus |
-分子 #2: Cdh1
分子 | 名称: Cdh1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 集合状態: Monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Xenopus laevis (アフリカツメガエル) / 別称: Xenopus |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 / 詳細: 20 mM Hepes, 150 mM NaCl, 0.5 mM DTT |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: carbon sandwich with 2% x/v uranyl formate |
凍結 | 凍結剤: NITROGEN |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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撮影 | 平均電子線量: 15 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 90500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 倍率(公称値): 90500 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Each particle |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 24.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Imagic-5 |