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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0697 | |||||||||||||||
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タイトル | 200kV MicroED structure of FUS (37-42) SYSGYS solved from single crystal at 0.67 A | |||||||||||||||
マップデータ | 2Fo-Fc map | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | FUS / MicroED / Ultrahigh resolution / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mRNA stabilization / intracellular membraneless organelle / regulation of RNA splicing / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / mRNA 3'-UTR binding / molecular condensate scaffold activity / transcription coregulator activity ...mRNA stabilization / intracellular membraneless organelle / regulation of RNA splicing / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / mRNA 3'-UTR binding / molecular condensate scaffold activity / transcription coregulator activity / protein homooligomerization / amyloid fibril formation / transcription coactivator activity / chromatin binding / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / DNA binding / RNA binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||
手法 | 電子線結晶学 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 0.67 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Zhou H / Luo F | |||||||||||||||
資金援助 | 中国, 4件
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引用 | ジャーナル: Anal Chem / 年: 2019 タイトル: Programming Conventional Electron Microscopes for Solving Ultrahigh-Resolution Structures of Small and Macro-Molecules. 著者: Heng Zhou / Feng Luo / Zhipu Luo / Dan Li / Cong Liu / Xueming Li / 要旨: Microcrystal electron diffraction (MicroED) is becoming a powerful tool in determining the crystal structures of biological macromolecules and small organic compounds. However, wide applications of ...Microcrystal electron diffraction (MicroED) is becoming a powerful tool in determining the crystal structures of biological macromolecules and small organic compounds. However, wide applications of this technique are still limited by the special requirement for radiation-tolerated movie-mode camera and the lack of automated data collection methods. Herein, we develop a stage-camera synchronization scheme to minimize the hardware requirements and enable the use of the conventional electron cryo-microscope with a single-frame CCD camera, which ensures not only the acquisition of ultrahigh-resolution diffraction data but also low cost in practice. This method renders the structure determination of both peptide and small organic compounds at ultrahigh resolution up to ∼0.60 Å with unambiguous assignment of nearly all hydrogen atoms. The present work provides a widely applicable solution for routine structure determination of MicroED and demonstrates the capability of the low-end 120 kV microscope with a CCD camera in solving ultrahigh resolution structures of both organic compounds and biological macromolecules. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0697.map.gz | 1.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0697-v30.xml emd-0697.xml | 12.6 KB 12.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_0697.png | 49.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-0697.cif.gz | 4.2 KB | ||
その他 | emd_0697_additional.map.gz emd_0697_additional_1.map.gz | 1.7 MB 1.7 MB | ||
Filedesc structureFactors | emd_0697_sf.cif.gz | 124.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0697 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0697 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0697_validation.pdf.gz | 476.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0697_full_validation.pdf.gz | 475.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0697_validation.xml.gz | 4.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_0697_validation.cif.gz | 4.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0697 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0697 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6kj2MC 0696C 0698C 0699C 6kj1C 6kj3C 6kj4C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0697.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 9.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 2Fo-Fc map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X: 0.15092 Å / Y: 0.16497 Å / Z: 0.15554 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: Fo-Fc map
ファイル | emd_0697_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | Fo-Fc map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Fo-Fc map
ファイル | emd_0697_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Fo-Fc map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : FUS LC RAC1
全体 | 名称: FUS LC RAC1 |
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要素 |
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-超分子 #1: FUS LC RAC1
超分子 | 名称: FUS LC RAC1 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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-分子 #1: RNA-binding protein FUS
分子 | 名称: RNA-binding protein FUS / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 662.648 Da |
配列 | 文字列: SYSGYS UniProtKB: RNA-binding protein FUS |
-分子 #2: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線結晶学 |
試料の集合状態 | 3D array |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 平均電子線量: 0.05 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: DIFFRACTION / カメラ長: 520 mm |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 0.67 Å / 解像度の算出法: DIFFRACTION PATTERN/LAYERLINES |
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Crystallography statistics | Number intensities measured: 9323 / Number structure factors: 3780 / Fourier space coverage: 58.77 / R sym: 0.123 / R merge: 0.123 / Overall phase error: 40.93 / Overall phase residual: 40.93 / Phase error rejection criteria: 1 / High resolution: 0.67 Å / 殻 - Shell ID: 1 / 殻 - High resolution: 0.67 Å / 殻 - Low resolution: 0.69 Å / 殻 - Number structure factors: 227 / 殻 - Phase residual: 1 / 殻 - Fourier space coverage: 35.97 / 殻 - Multiplicity: 1.99 |
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-6kj2: |