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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9vx6 | |||||||||||||||||||||
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| タイトル | Helical structure of gRNA-tDNA SPARDA complex | |||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | CELL INVASION / Cryo-EM / SPARDA / pAgo | |||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) 機能・相同性情報 | |||||||||||||||||||||
| 生物種 | Bacteriophage sp. (ファージ) Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア) | |||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.64 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Li, Y. / Zheng, Q. / Li, S. / Jiang, Y. | |||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2026タイトル: Filament assembly induced by the recognition of target DNA activates the prokaryotic Argonaute SPARDA system. 著者: Wanyue Zhang / Yuchen Jiang / Yu Li / Xiangkai Zhen / Shuying Xu / Ning-Shao Xia / Shaowei Li / Xurong Wang / Qingbing Zheng / Songying Ouyang / ![]() 要旨: The short prokaryotic Argonaute (pAgo) proteins, in conjunction with their associated effector molecules, constitute a defence mechanism in prokaryotes that protects against phage infections. The ...The short prokaryotic Argonaute (pAgo) proteins, in conjunction with their associated effector molecules, constitute a defence mechanism in prokaryotes that protects against phage infections. The SPARDA is characterized by its collateral nuclease activity, which, upon activation through target DNA recognition, non-specifically cleaves a wide range of nucleic acid substrates. Nevertheless, the structural underpinnings of its collateral activity have remained elusive. In this study, we investigate the NbaSPARDA system from Novosphingopyxis baekryungensis and reveal that RNA-guided DNA recognition triggers the assembly of a higher-order filamentous structure. This filamentation is essential for the tetramerization of the DREN nuclease domain, which in turn facilitates the accumulation and cleavage of substrate nucleic acids. Through the determination of the gRNA-bound and RNA-DNA duplex-bound cryo-EM structures, we delineate a sequential monomer-dimer-monomer-filament transition during SPARDA activation. These insights collectively elucidate a filament-dependent activation mechanism underpinning the short pAgo-mediated immune response, which is crucial for antiviral defence. | |||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 9vx6.cif.gz | 689.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb9vx6.ent.gz | 557.6 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 9vx6.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/vx/9vx6 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/vx/9vx6 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 65406MC ![]() 9vx1C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-DNA鎖 , 2種, 5分子 LEIQM
| #1: DNA鎖 | 分子量: 6139.976 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bacteriophage sp. (ファージ) / 発現宿主: Bacteriophage sp. (ファージ)#5: DNA鎖 | | 分子量: 3364.208 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bacteriophage sp. (ファージ) / 発現宿主: Bacteriophage sp. (ファージ) |
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-RNA鎖 , 2種, 5分子 RFJVN
| #2: RNA鎖 | 分子量: 6390.879 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)発現宿主: Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)#6: RNA鎖 | | 分子量: 3466.130 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)発現宿主: Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア) |
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-タンパク質 , 2種, 8分子 SOWUTPYX
| #3: タンパク質 | 分子量: 54492.809 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)発現宿主: Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)#4: タンパク質 | 分子量: 50419.645 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)発現宿主: Bacteria Latreille et al. 1825 (昆虫) |
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-詳細
| Has protein modification | N |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: HELICAL ARRAY / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: gRNA-tDNA SPARDA complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア) |
| 由来(組換発現) | 生物種: Bacteria Latreille et al. 1825 (昆虫) |
| 緩衝液 | pH: 7.4 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 48 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||
| らせん対称 | 回転角度/サブユニット: 80 ° / 軸方向距離/サブユニット: 130 Å / らせん対称軸の対称性: C1 | ||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.64 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 57938 / 対称性のタイプ: HELICAL |
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Bacteriophage sp. (ファージ)
Novosphingopyxis baekryungensis (バクテリア)
中国, 1件
引用


PDBj
































































Bacteria Latreille et al. 1825 (昆虫)
FIELD EMISSION GUN