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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9l5s | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the thermophile spliceosome (state B*Q1) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | SPLICING/RNA / Spilceosome / DHX15 / DHX35 / GPATCH1 / SPLICING-RNA complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() Delta14-sterol reductase activity / spliceosomal complex disassembly / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / ergosterol biosynthetic process / spliceosomal snRNP complex / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding ...Delta14-sterol reductase activity / spliceosomal complex disassembly / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / ergosterol biosynthetic process / spliceosomal snRNP complex / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / spliceosomal complex assembly / Prp19 complex / protein K63-linked ubiquitination / U5 snRNP / U6 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / RNA splicing / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / peptidylprolyl isomerase / spliceosomal complex / helicase activity / RING-type E3 ubiquitin transferase / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA processing / ubiquitin protein ligase activity / protein folding / hydrolase activity / RNA helicase / DNA repair / mRNA binding / endoplasmic reticulum membrane / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Li, Y. / Fischer, P. / Wang, M. / Yuan, R. / Meng, W. / Luehrmann, R. / Lau, B. / Hurt, E. / Cheng, J. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | 1件
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![]() | ![]() タイトル: Structural insights into spliceosome fidelity: DHX35-GPATCH1- mediated rejection of aberrant splicing substrates. 著者: Yi Li / Paulina Fischer / Mengjiao Wang / Qianxing Zhou / Aixia Song / Rui Yuan / Wanyu Meng / Fei Xavier Chen / Reinhard Lührmann / Benjamin Lau / Ed Hurt / Jingdong Cheng / ![]() ![]() 要旨: The spliceosome, a highly dynamic macromolecular assembly, catalyzes the precise removal of introns from pre-mRNAs. Recent studies have provided comprehensive structural insights into the step-wise ...The spliceosome, a highly dynamic macromolecular assembly, catalyzes the precise removal of introns from pre-mRNAs. Recent studies have provided comprehensive structural insights into the step-wise assembly, catalytic splicing and final disassembly of the spliceosome. However, the molecular details of how the spliceosome recognizes and rejects suboptimal splicing substrates remained unclear. Here, we show cryo-electron microscopy structures of spliceosomal quality control complexes from a thermophilic eukaryote, Chaetomium thermophilum. The spliceosomes, henceforth termed B*, are stalled at a catalytically activated state but prior to the first splicing reaction due to an aberrant 5' splice site conformation. This state is recognized by G-patch protein GPATCH1, which is docked onto PRP8-EN and -RH domains and has recruited the cognate DHX35 helicase to its U2 snRNA substrate. In B*, DHX35 has dissociated the U2/branch site helix, while the disassembly helicase DHX15 is docked close to its U6 RNA 3'-end substrate. Our work thus provides mechanistic insights into the concerted action of two spliceosomal helicases in maintaining splicing fidelity by priming spliceosomes that are bound to aberrant splice substrates for disassembly. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 792.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 810.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 182.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 309.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 62842MC ![]() 9l5rC ![]() 9l5tC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 4種, 4分子 2568
#1: RNA鎖 | 分子量: 61393.840 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 36997.824 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 32443.285 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 170940748 |
#37: RNA鎖 | 分子量: 7235.635 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 , 17種, 17分子 ACEFJNSWY1zlmpCYCkCb
#4: タンパク質 | 分子量: 285131.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
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#6: タンパク質 | 分子量: 113867.617 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 38229.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S9U7 |
#8: タンパク質 | 分子量: 25360.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SDJ6 |
#10: タンパク質 | 分子量: 82195.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S0H7 |
#14: タンパク質 | 分子量: 17176.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S4Q2 |
#15: タンパク質 | 分子量: 18361.811 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S1V3, peptidylprolyl isomerase |
#20: タンパク質 | 分子量: 61222.004 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S2N1 |
#22: タンパク質 | 分子量: 161045.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SFN9 |
#23: タンパク質 | 分子量: 75861.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 74989.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0RZD6, RNA helicase |
#27: タンパク質 | 分子量: 10727.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0RY82 |
#28: タンパク質 | 分子量: 66785.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S405 |
#30: タンパク質 | 分子量: 21425.543 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SHQ3 |
#34: タンパク質 | 分子量: 56472.395 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SI54 |
#35: タンパク質 | 分子量: 5634.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
#36: タンパク質 | 分子量: 59591.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 3種, 3分子 BKT
#5: タンパク質 | 分子量: 36945.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S5N3 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 25550.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SDM8 |
#16: タンパク質 | 分子量: 54207.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S066 |
-Putative pre-mRNA splicing ... , 8種, 8分子 ILM0PVZCV
#9: タンパク質 | 分子量: 97944.164 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S620 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 86636.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S8A6 |
#17: タンパク質 | 分子量: 42241.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0RYD8 |
#18: タンパク質 | 分子量: 45885.184 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S7S7 |
#21: タンパク質 | 分子量: 28956.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S754 |
#32: タンパク質 | 分子量: 26329.277 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S4I7 |
#33: タンパク質 | 分子量: 76518.102 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S5W9 |
#38: タンパク質 | 分子量: 28376.967 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0RZZ0 |
-Pre-mRNA-processing ... , 2種, 5分子 qtrsR
#13: タンパク質 | 分子量: 51844.324 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SFY0, RING-type E3 ubiquitin transferase #19: タンパク質 | | 分子量: 65034.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SF87 |
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-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 4種, 4分子 jkou
#25: タンパク質 | 分子量: 10967.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0S8J0 |
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#26: タンパク質 | 分子量: 9259.763 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SI53 |
#29: タンパク質 | 分子量: 13033.093 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0RZL0 |
#31: タンパク質 | 分子量: 12708.680 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: G0SG70 |
-非ポリマー , 4種, 7分子 






#39: 化合物 | ChemComp-M7M / |
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#40: 化合物 | ChemComp-MG / |
#41: 化合物 | ChemComp-GTP / |
#42: 化合物 | ChemComp-ZN / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Spliceosome in state B*Q1 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#38 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: Relion / タイプ: NONE | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 66478 / 対称性のタイプ: POINT |