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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8x51 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Gabija GajA in complex with DNA(focused refinement) | ||||||
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![]() | DNA BINDING PROTEIN/DNA / endonuclease / Complex / DNA BINDING / DNA BINDING PROTEIN / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() endonuclease activity / defense response to virus / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.92 Å | ||||||
![]() | Li, J. / Wang, Z. / Wang, L. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures and activation mechanism of the Gabija anti-phage system. 著者: Jing Li / Rui Cheng / Zhiming Wang / Wuliu Yuan / Jun Xiao / Xinyuan Zhao / Xinran Du / Shiyu Xia / Lianrong Wang / Bin Zhu / Longfei Wang / ![]() ![]() 要旨: Prokaryotes have evolved intricate innate immune systems against phage infection. Gabija is a highly widespread prokaryotic defence system that consists of two components, GajA and GajB. GajA ...Prokaryotes have evolved intricate innate immune systems against phage infection. Gabija is a highly widespread prokaryotic defence system that consists of two components, GajA and GajB. GajA functions as a DNA endonuclease that is inactive in the presence of ATP. Here, to explore how the Gabija system is activated for anti-phage defence, we report its cryo-electron microscopy structures in five states, including apo GajA, GajA in complex with DNA, GajA bound by ATP, apo GajA-GajB, and GajA-GajB in complex with ATP and Mg. GajA is a rhombus-shaped tetramer with its ATPase domain clustered at the centre and the topoisomerase-primase (Toprim) domain located peripherally. ATP binding at the ATPase domain stabilizes the insertion region within the ATPase domain, keeping the Toprim domain in a closed state. Upon ATP depletion by phages, the Toprim domain opens to bind and cleave the DNA substrate. GajB, which docks on GajA, is activated by the cleaved DNA, ultimately leading to prokaryotic cell death. Our study presents a mechanistic landscape of Gabija activation. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 216.5 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 166.8 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 38058MC ![]() 8jq9C ![]() 8jqbC ![]() 8jqcC ![]() 8wy4C ![]() 8wy5C ![]() 8x5iC ![]() 8x5nC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 67079.469 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: gajA, IIE_04982 / 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: J8H9C1, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 #2: DNA鎖 | | 分子量: 6393.154 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) #3: DNA鎖 | | 分子量: 6487.263 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) #4: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Binary complex of GajA with dsDNA / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1400 nm |
撮影 | 電子線照射量: 1.25 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.92 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 570317 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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