+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qdx | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | E. coli DNA gyrase bound to a DNA crossover | ||||||
要素 |
| ||||||
キーワード | ISOMERASE / DNA-protein complex / type IIA topoisomerase DNA gyrase | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus ...negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / DNA-templated transcription / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
データ登録者 | Vayssieres, M. / Lamour, V. | ||||||
資金援助 | フランス, 1件
| ||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2024 タイトル: Structural basis of DNA crossover capture by DNA gyrase. 著者: Marlène Vayssières / Nils Marechal / Long Yun / Brian Lopez Duran / Naveen Kumar Murugasamy / Jonathan M Fogg / Lynn Zechiedrich / Marc Nadal / Valérie Lamour / 要旨: DNA supercoiling must be precisely regulated by topoisomerases to prevent DNA entanglement. The interaction of type IIA DNA topoisomerases with two DNA molecules, enabling the transport of one duplex ...DNA supercoiling must be precisely regulated by topoisomerases to prevent DNA entanglement. The interaction of type IIA DNA topoisomerases with two DNA molecules, enabling the transport of one duplex through the transient double-stranded break of the other, remains elusive owing to structures derived solely from single linear duplex DNAs lacking topological constraints. Using cryo-electron microscopy, we solved the structure of DNA gyrase bound to a negatively supercoiled minicircle DNA. We show how DNA gyrase captures a DNA crossover, revealing both conserved molecular grooves that accommodate the DNA helices. Together with molecular tweezer experiments, the structure shows that the DNA crossover is of positive chirality, reconciling the binding step of gyrase-mediated DNA relaxation and supercoiling in a single structure. | ||||||
履歴 |
|
-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
---|
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qdx.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb8qdx.ent.gz | 971.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8qdx.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8qdx_validation.pdf.gz | 903.3 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 8qdx_full_validation.pdf.gz | 933.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | 8qdx_validation.xml.gz | 76.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8qdx_validation.cif.gz | 120.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qd/8qdx ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qd/8qdx | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 18342MC 8qqsC 8qquC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 97072.578 Da / 分子数: 2 / 変異: Y122F / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: gyrA / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AES4 #2: タンパク質 | 分子量: 90073.922 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) 遺伝子: gyrB, acrB, cou, himB, hisU, nalC, parA, pcbA, b3699, JW5625 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) 参照: UniProt: P0AES6, DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) #3: DNA鎖 | | 分子量: 35849.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) #4: DNA鎖 | | 分子量: 36913.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
| ||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
分子量 | 値: 0.745 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
| ||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) |
| ||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドのタイプ: Homemade | ||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 0.01 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 46 e/Å2 / 検出モード: COUNTING / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 91247 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
|