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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8imx | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of GPI-T with a chimeric GPI-anchored protein | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / cryo-EM / glycosylphosphatidylinositol / GPI / GPI anchored protein / GPI-AP / membrane protein complex | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報GPI anchored protein biosynthesis / GPI-anchor transamidase activity / attachment of GPI anchor to protein / GPI-anchor transamidase complex / GPI anchor biosynthetic process / GPI anchor binding / protein retention in ER lumen / Attachment of GPI anchor to uPAR / 転移酵素; 含窒素の基を移すもの; H2N-アミノ基を移すもの / Post-translational modification: synthesis of GPI-anchored proteins ...GPI anchored protein biosynthesis / GPI-anchor transamidase activity / attachment of GPI anchor to protein / GPI-anchor transamidase complex / GPI anchor biosynthetic process / GPI anchor binding / protein retention in ER lumen / Attachment of GPI anchor to uPAR / 転移酵素; 含窒素の基を移すもの; H2N-アミノ基を移すもの / Post-translational modification: synthesis of GPI-anchored proteins / natural killer cell lectin-like receptor binding / natural killer cell activation / regulation of receptor signaling pathway via JAK-STAT / natural killer cell mediated cytotoxicity / antigen processing and presentation of endogenous peptide antigen via MHC class Ib / antigen processing and presentation of endogenous peptide antigen via MHC class I via ER pathway, TAP-independent / bioluminescence / generation of precursor metabolites and energy / positive regulation of T cell mediated cytotoxicity / neuron differentiation / neuron apoptotic process / cytoplasmic vesicle / immune response / receptor ligand activity / external side of plasma membrane / centrosome / endoplasmic reticulum membrane / cell surface / endoplasmic reticulum / mitochondrion / proteolysis / : / extracellular region / membrane / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) Clavularia sp. (無脊椎動物)synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.85 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Xu, Y. / Li, T. / Qu, Q. / Li, D. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023タイトル: Structures of liganded glycosylphosphatidylinositol transamidase illuminate GPI-AP biogenesis. 著者: Yidan Xu / Tingting Li / Zixuan Zhou / Jingjing Hong / Yulin Chao / Zhini Zhu / Ying Zhang / Qianhui Qu / Dianfan Li / ![]() 要旨: Many eukaryotic receptors and enzymes rely on glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchors for membrane localization and function. The transmembrane complex GPI-T recognizes diverse proproteins at a ...Many eukaryotic receptors and enzymes rely on glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchors for membrane localization and function. The transmembrane complex GPI-T recognizes diverse proproteins at a signal peptide region that lacks consensus sequence and replaces it with GPI via a transamidation reaction. How GPI-T maintains broad specificity while preventing unintentional cleavage is unclear. Here, substrates- and products-bound human GPI-T structures identify subsite features that enable broad proprotein specificity, inform catalytic mechanism, and reveal a multilevel safeguard mechanism against its promiscuity. In the absence of proproteins, the catalytic site is invaded by a locally stabilized loop. Activation requires energetically unfavorable rearrangements that transform the autoinhibitory loop into crucial catalytic cleft elements. Enzyme-proprotein binding in the transmembrane and luminal domains respectively powers the conformational rearrangement and induces a competent cleft. GPI-T thus integrates various weak specificity regions to form strong selectivity and prevent accidental activation. These findings provide important mechanistic insights into GPI-anchored protein biogenesis. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8imx.cif.gz | 507 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8imx.ent.gz | 376.1 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8imx.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/im/8imx ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/im/8imx | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 35575MC ![]() 8imyC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-タンパク質 , 4種, 4分子 DGKU
| #1: タンパク質 | 分子量: 35573.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: A chimera proprotein containing the N- and C-terminal signal peptide of ULBP2, and a thermostable green fluorescence protein replacing the main part of ULBP2. 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: ULBP2, N2DL2, RAET1H, UNQ463/PRO791 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BZM5, UniProt: Q9U6Y3 |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 96990.352 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: GPAA1, GAA1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43292, UniProt: Q9U6Y3 |
| #3: タンパク質 | 分子量: 73443.062 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: PIGK, GPI8 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト)参照: UniProt: Q92643, UniProt: Q9U6Y3, 加水分解酵素 |
| #6: タンパク質 | 分子量: 77141.695 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: PIGU, CDC91L1, PSEC0205, UNQ3055/PRO9875 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9H490, UniProt: Q9U6Y3 |
-GPI transamidase component PIG- ... , 2種, 2分子 ST
| #4: タンパク質 | 分子量: 90421.062 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: PIGS, UNQ1873/PRO4316 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96S52, UniProt: Q9U6Y3 |
|---|---|
| #5: タンパク質 | 分子量: 94207.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) Clavularia sp. (無脊椎動物)遺伝子: PIGT, CGI-06, PSEC0163, UNQ716/PRO1379 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q969N2, UniProt: Q9U6Y3 |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 P
| #7: タンパク質・ペプチド | 分子量: 323.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-糖 , 3種, 4分子 


| #8: 多糖 | 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | ||
|---|---|---|---|
| #14: 糖 | | #18: 糖 | ChemComp-PA1 / | |
-非ポリマー , 10種, 26分子 


















| #9: 化合物 | ChemComp-Y01 / #10: 化合物 | ChemComp-MG / | #11: 化合物 | ChemComp-6OU / [( #12: 化合物 | ChemComp-AJP / | #13: 化合物 | ChemComp-CA / | #15: 化合物 | ChemComp-LBN / | #16: 化合物 | ChemComp-80T / [( | #17: 化合物 | #19: 化合物 | ChemComp-05E / | #20: 化合物 | ChemComp-81Q / [( | |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Complex of GPI-T with a chimeric GPI-anchored protein タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#6 / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||||||||||
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| 分子量 | 値: 469 kDa/nm / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||
| 由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | pH: 8 詳細: 0.1 % Digitonin, 150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, pH 8.0 | ||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm |
| 撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
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解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||
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| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3170202 | ||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.85 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 34261 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
Clavularia sp. (無脊椎動物)
中国, 1件
引用






PDBj




FIELD EMISSION GUN