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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ekp | |||||||||
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タイトル | Apo rat TRPV2 in nanodiscs, state 1 | |||||||||
要素 | Transient receptor potential cation channel subfamily V member 2 | |||||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / Ion channel / TRP channel / Membrane protein / tetramer | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 growth cone membrane / TRP channels / response to temperature stimulus / positive regulation of calcium ion import / endomembrane system / positive regulation of axon extension / axonal growth cone / monoatomic cation channel activity / calcium channel activity / melanosome ...growth cone membrane / TRP channels / response to temperature stimulus / positive regulation of calcium ion import / endomembrane system / positive regulation of axon extension / axonal growth cone / monoatomic cation channel activity / calcium channel activity / melanosome / lamellipodium / positive regulation of cold-induced thermogenesis / cell body / negative regulation of cell population proliferation / axon / cell surface / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Rattus norvegicus (ドブネズミ) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.75 Å | |||||||||
データ登録者 | Pumroy, R.A. / Moiseenkova-Bell, V.Y. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2024 タイトル: Functional and structural insights into activation of TRPV2 by weak acids. 著者: Ferdinand M Haug / Ruth A Pumroy / Akshay Sridhar / Sebastian Pantke / Florian Dimek / Tabea C Fricke / Axel Hage / Christine Herzog / Frank G Echtermeyer / Jeanne de la Roche / Adrian Koh / ...著者: Ferdinand M Haug / Ruth A Pumroy / Akshay Sridhar / Sebastian Pantke / Florian Dimek / Tabea C Fricke / Axel Hage / Christine Herzog / Frank G Echtermeyer / Jeanne de la Roche / Adrian Koh / Abhay Kotecha / Rebecca J Howard / Erik Lindahl / Vera Moiseenkova-Bell / Andreas Leffler / 要旨: Transient receptor potential (TRP) ion channels are involved in the surveillance or regulation of the acid-base balance. Here, we demonstrate that weak carbonic acids, including acetic acid, lactic ...Transient receptor potential (TRP) ion channels are involved in the surveillance or regulation of the acid-base balance. Here, we demonstrate that weak carbonic acids, including acetic acid, lactic acid, and CO activate and sensitize TRPV2 through a mechanism requiring permeation through the cell membrane. TRPV2 channels in cell-free inside-out patches maintain weak acid-sensitivity, but protons applied on either side of the membrane do not induce channel activation or sensitization. The involvement of proton modulation sites for weak acid-sensitivity was supported by the identification of titratable extracellular (Glu495, Glu561) and intracellular (His521) residues on a cryo-EM structure of rat TRPV2 (rTRPV2) treated with acetic acid. Molecular dynamics simulations as well as patch clamp experiments on mutant rTRPV2 constructs confirmed that these residues are critical for weak acid-sensitivity. We also demonstrate that the pore residue Glu609 dictates an inhibition of weak acid-induced currents by extracellular calcium. Finally, TRPV2-expression in HEK293 cells is associated with an increased weak acid-induced cytotoxicity. Together, our data provide new insights into weak acids as endogenous modulators of TRPV2. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8ekp.cif.gz | 493.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8ekp.ent.gz | 407.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8ekp.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8ekp_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8ekp_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8ekp_validation.xml.gz | 77 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8ekp_validation.cif.gz | 110.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ek/8ekp ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ek/8ekp | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 86798.891 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Rattus norvegicus (ドブネズミ) / 遺伝子: Trpv2, Sac2b, Vrl1 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q9WUD2 #2: 化合物 | ChemComp-PEX / 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Tetramer of apo wild type rat TRPV2 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.3504 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Rattus norvegicus (ドブネズミ) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 14000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 6000 nm |
撮影 | 平均露光時間: 3.54 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C4 (4回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.75 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 23986 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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