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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8cww | ||||||
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タイトル | Structure of S. cerevisiae Hop1 CBR bound to a nucleosome | ||||||
要素 |
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キーワード | DNA BINDING PROTEIN/DNA / meiosis / recombination / chromosome axis / nucleosome / PHD / winged helix / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | ||||||
機能・相同性 | DNA / DNA (> 10) / DNA (> 100) 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.74 Å | ||||||
データ登録者 | Gu, Y. / Ur, S.N. / Milano, C.R. / Tromer, E.C. / Vale-Silva, L.A. / Hochwagen, A. / Corbett, K.D. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2024 タイトル: Chromatin binding by HORMAD proteins regulates meiotic recombination initiation. 著者: Carolyn R Milano / Sarah N Ur / Yajie Gu / Jessie Zhang / Rachal Allison / George Brown / Matthew J Neale / Eelco C Tromer / Kevin D Corbett / Andreas Hochwagen / 要旨: The meiotic chromosome axis coordinates chromosome organization and interhomolog recombination in meiotic prophase and is essential for fertility. In S. cerevisiae, the HORMAD protein Hop1 mediates ...The meiotic chromosome axis coordinates chromosome organization and interhomolog recombination in meiotic prophase and is essential for fertility. In S. cerevisiae, the HORMAD protein Hop1 mediates the enrichment of axis proteins at nucleosome-rich islands through a central chromatin-binding region (CBR). Here, we use cryoelectron microscopy to show that the Hop1 CBR directly recognizes bent nucleosomal DNA through a composite interface in its PHD and winged helix-turn-helix domains. Targeted disruption of the Hop1 CBR-nucleosome interface causes a localized reduction of axis protein binding and meiotic DNA double-strand breaks (DSBs) in axis islands and leads to defects in chromosome synapsis. Synthetic effects with mutants of the Hop1 regulator Pch2 suggest that nucleosome binding delays a conformational switch in Hop1 from a DSB-promoting, Pch2-inaccessible state to a DSB-inactive, Pch2-accessible state to regulate the extent of meiotic DSB formation. Phylogenetic analyses of meiotic HORMADs reveal an ancient origin of the CBR, suggesting that the mechanisms we uncover are broadly conserved. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8cww.cif.gz | 408.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8cww.ent.gz | 258.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8cww.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8cww_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8cww_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8cww_validation.xml.gz | 41.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8cww_validation.cif.gz | 65.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/cw/8cww ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/cw/8cww | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 5種, 9分子 PAEBFCGDH
#1: タンパク質 | 分子量: 24239.928 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: GenBank:DAA08478.1 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: HOP1, YIL072W / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
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#2: タンパク質 | 分子量: 15303.930 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: GenBank:CAD89679.1 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) #3: タンパク質 | 分子量: 11263.231 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: GenBank:NP_001087926.1 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) #4: タンパク質 | 分子量: 13978.241 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: GenBank:CAD89676.1 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) #5: タンパク質 | 分子量: 13524.752 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: GenBank:CAD89678.1 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) |
-Widom 601 DNA (146- ... , 2種, 2分子 IJ
#6: DNA鎖 | 分子量: 45274.840 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Escherichia coli (大腸菌) |
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#7: DNA鎖 | 分子量: 44856.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Escherichia coli (大腸菌) |
-非ポリマー , 1種, 2分子
#8: 化合物 |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Complex of Hop1 CBR domain bound to nucleosome / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#7 / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||
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分子量 | 値: 0.223 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 20mM Tris 7.5, 50mM NaCl, 1mM DTT, 1mM EDTA | ||||||||||||
試料 | 濃度: 0.8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm |
撮影 | 平均露光時間: 10 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.74 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 139629 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 110.4 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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