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- PDB-8c4h: CryoEM structure of the Hendra henipavirus nucleocapsid sauronoid... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8c4h
タイトルCryoEM structure of the Hendra henipavirus nucleocapsid sauronoid assembly multimer
要素
  • Nucleocapsid
  • RNA (84-MER)
キーワードVIRAL PROTEIN / Nucleoprotein / RNA-binding protein / Sauronoid
機能・相同性
機能・相同性情報


helical viral capsid / viral nucleocapsid / host cell cytoplasm / ribonucleoprotein complex / structural molecule activity / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Paramyxovirus nucleocapsid protein / Paramyxovirus nucleocapsid protein
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA / RNA (> 10) / Nucleocapsid
類似検索 - 構成要素
生物種Hendra henipavirus (ウイルス)
Escherichia coli BL21 (大腸菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.485 Å
データ登録者Passchier, T.C. / Maskell, D.P. / Edwards, T.A. / Barr, J.N.
資金援助European Union, 1件
組織認可番号国
H2020 Marie Curie Actions of the European Commission721367European Union
引用ジャーナル: Sci Rep / 年: 2024
タイトル: The cryoEM structure of the Hendra henipavirus nucleoprotein reveals insights into paramyxoviral nucleocapsid architectures.
著者: Tim C Passchier / Joshua B R White / Daniel P Maskell / Matthew J Byrne / Neil A Ranson / Thomas A Edwards / John N Barr /
要旨: We report the first cryoEM structure of the Hendra henipavirus nucleoprotein in complex with RNA, at 3.5 Å resolution, derived from single particle analysis of a double homotetradecameric RNA-bound ...We report the first cryoEM structure of the Hendra henipavirus nucleoprotein in complex with RNA, at 3.5 Å resolution, derived from single particle analysis of a double homotetradecameric RNA-bound N protein ring assembly exhibiting D14 symmetry. The structure of the HeV N protein adopts the common bi-lobed paramyxoviral N protein fold; the N-terminal and C-terminal globular domains are bisected by an RNA binding cleft containing six RNA nucleotides and are flanked by the N-terminal and C-terminal arms, respectively. In common with other paramyxoviral nucleocapsids, the lateral interface between adjacent N and N protomers involves electrostatic and hydrophobic interactions mediated primarily through the N-terminal arm and globular domains with minor contribution from the C-terminal arm. However, the HeV N multimeric assembly uniquely identifies an additional protomer-protomer contact between the N N-terminus and N C-terminal arm linker. The model presented here broadens the understanding of RNA-bound paramyxoviral nucleocapsid architectures and provides a platform for further insight into the molecular biology of HeV, as well as the development of antiviral interventions.
履歴
登録2023年1月4日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02024年6月26日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
C: Nucleocapsid
D: Nucleocapsid
E: Nucleocapsid
F: Nucleocapsid
G: Nucleocapsid
H: Nucleocapsid
I: Nucleocapsid
J: Nucleocapsid
K: Nucleocapsid
L: Nucleocapsid
M: Nucleocapsid
N: Nucleocapsid
A: Nucleocapsid
1: RNA (84-MER)
B: Nucleocapsid
a: Nucleocapsid
2: RNA (84-MER)
b: Nucleocapsid
c: Nucleocapsid
d: Nucleocapsid
e: Nucleocapsid
f: Nucleocapsid
g: Nucleocapsid
h: Nucleocapsid
i: Nucleocapsid
j: Nucleocapsid
k: Nucleocapsid
l: Nucleocapsid
m: Nucleocapsid
n: Nucleocapsid


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)1,690,50330
ポリマ－1,690,50330
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 ...
Nucleocapsid


分子量: 58541.320 Da / 分子数: 28 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Hendra henipavirus (ウイルス) / プラスミド: pET28a / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): Rosetta2 / 参照: UniProt: A0A1L7B858
#2: RNA鎖 RNA (84-MER)


分子量: 25672.984 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
株: Rosetta 2 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): Rosetta 2

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Sauronoid assembly of Hendra henipavirus nucleoprotein
タイプ: COMPLEX
詳細: Recombinantly expressed Hendra henipavirus nucleoprotein forming sauronoid complexes.
Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 1.691779 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Hendra henipavirus (ウイルス)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株: Rosetta 2 / プラスミド: pET28a
ウイルスについての詳細単離: SPECIES / タイプ: VIRION
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER
グリッドのタイプ: PELCO Ultrathin Carbon with Lacey Carbon
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 281 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 75000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2800 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 700 nm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 1.5 sec. / 電子線照射量: 59.7 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3548

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1RELION3.1粒子像選択
2EPU画像取得
4Gctf1.18CTF補正
10RELION3.1初期オイラー角割当
11RELION3.1最終オイラー角割当
12RELION3.1分類
13RELION3.1３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: D14 (2回x14回 2面回転対称)
3次元再構成解像度: 3.485 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 5683 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00289570
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.455121792
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d6.03614022
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.03614112
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00415036

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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