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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8a1e | ||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Rabies virus glycoprotein in complex with Fab fragments of 17C7 and 1112-1 neutralizing antibodies | ||||||||||||||||||||||||
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![]() | VIRAL PROTEIN / Viral Glycoprotein / Antibody / Complex | ||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | Rhabdovirus glycoprotein / Rhabdovirus spike glycoprotein / membrane => GO:0016020 / viral envelope / virion membrane / Glycoprotein![]() | ||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.83 Å | ||||||||||||||||||||||||
![]() | Ng, W.M. / Fedosyuk, S. / English, S. / Augusto, G. / Berg, A. / Thorley, L. / Haselon, A.S. / Segireddy, R.R. / Bowden, T.A. / Douglas, A.D. | ||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure of trimeric pre-fusion rabies virus glycoprotein in complex with two protective antibodies. 著者: Weng M Ng / Sofiya Fedosyuk / Solomon English / Gilles Augusto / Adam Berg / Luke Thorley / Anna-Sophie Haselon / Rameswara R Segireddy / Thomas A Bowden / Alexander D Douglas / ![]() 要旨: Rabies virus (RABV) causes lethal encephalitis and is responsible for approximately 60,000 deaths per year. As the sole virion-surface protein, the rabies virus glycoprotein (RABV-G) mediates host- ...Rabies virus (RABV) causes lethal encephalitis and is responsible for approximately 60,000 deaths per year. As the sole virion-surface protein, the rabies virus glycoprotein (RABV-G) mediates host-cell entry. RABV-G's pre-fusion trimeric conformation displays epitopes bound by protective neutralizing antibodies that can be induced by vaccination or passively administered for post-exposure prophylaxis. We report a 2.8-Å structure of a RABV-G trimer in the pre-fusion conformation, in complex with two neutralizing and protective monoclonal antibodies, 17C7 and 1112-1, that recognize distinct epitopes. One of these antibodies is a licensed prophylactic (17C7, Rabishield), which we show locks the protein in pre-fusion conformation. Targeted mutations can similarly stabilize RABV-G in the pre-fusion conformation, a key step toward structure-guided vaccine design. These data reveal the higher-order architecture of a key therapeutic target and the structural basis of neutralization by antibodies binding two key antigenic sites, and this will facilitate the development of improved vaccines and prophylactic antibodies. | ||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 169.2 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 127.3 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 15073MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 | ![]()
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 56494.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: Pasteur vaccins / PV / 発現宿主: ![]() |
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#2: 抗体 | 分子量: 13227.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#3: 抗体 | 分子量: 11754.044 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#4: 抗体 | 分子量: 11668.073 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#5: 抗体 | 分子量: 13426.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Rabies virus glycoprotein (chain A) in complex with Fab 1112-1 (chains B and C) and Fab 17C7 (chains D and E) タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | |||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.33 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() | |||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: ![]() | |||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Purified sample was concentrated and mixed with 0.07% n-octyl-beta-d-glucoside to final concentrations of 1 mg/mL. | |||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | |||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K 詳細: Blot for 3.5 seconds at -15 N blot force before plunging. |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 3.7 sec. / 電子線照射量: 44.4 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 12884 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
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解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3112037 詳細: Particles were automatically picked using circular blobs with a diameter of 80-150 Angstrom on cryoSPARC. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C3 (3回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.83 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 458014 / 詳細: cryoSPARC non-uniform refinement was used. / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 108 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL 詳細: Model building was performed with Coot and refined with Phenix. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 59.69 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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