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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7tnq | ||||||||||||||||||
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タイトル | The symmetry-released subpellicular microtubule map from detergent-extracted Toxoplasma cells | ||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | CELL INVASION / parasites / Toxoplasma gondii / cytoskeleton / microtubules / tubulin | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein-disulfide reductase / thioredoxin-disulfide reductase (NADPH) activity / negative regulation of Wnt signaling pathway / negative regulation of protein ubiquitination / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / mitotic cell cycle / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / microtubule binding / microtubule ...protein-disulfide reductase / thioredoxin-disulfide reductase (NADPH) activity / negative regulation of Wnt signaling pathway / negative regulation of protein ubiquitination / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / mitotic cell cycle / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / microtubule binding / microtubule / cytoskeleton / hydrolase activity / GTPase activity / GTP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.4 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Sun, S.Y. / Pintilie, G.D. / Chen, M. | ||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 5件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2022 タイトル: Cryo-ET of parasites gives subnanometer insight into tubulin-based structures. 著者: Stella Y Sun / Li-Av Segev-Zarko / Muyuan Chen / Grigore D Pintilie / Michael F Schmid / Steven J Ludtke / John C Boothroyd / Wah Chiu / 要旨: Tubulin is a conserved protein that polymerizes into different forms of filamentous structures in , an obligate intracellular parasite in the phylum Apicomplexa. Two key tubulin-containing ...Tubulin is a conserved protein that polymerizes into different forms of filamentous structures in , an obligate intracellular parasite in the phylum Apicomplexa. Two key tubulin-containing cytoskeletal components are subpellicular microtubules (SPMTs) and conoid fibrils (CFs). The SPMTs help maintain shape and gliding motility, while the CFs are implicated in invasion. Here, we use cryogenic electron tomography to determine the molecular structures of the SPMTs and CFs in vitrified intact and detergent-extracted parasites. Subvolume densities from detergent-extracted parasites yielded averaged density maps at subnanometer resolutions, and these were related back to their architecture in situ. An intralumenal spiral lines the interior of the 13-protofilament SPMTs, revealing a preferred orientation of these microtubules relative to the parasite's long axis. Each CF is composed of nine tubulin protofilaments that display a comma-shaped cross-section, plus additional associated components. Conoid protrusion, a crucial step in invasion, is associated with an altered pitch of each CF. The use of basic building blocks of protofilaments and different accessory proteins in one organism illustrates the versatility of tubulin to form two distinct types of assemblies, SPMTs and CFs. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7tnq.cif.gz | 5.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7tnq.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7tnq.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7tnq_validation.pdf.gz | 2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7tnq_full_validation.pdf.gz | 2.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7tnq_validation.xml.gz | 671.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7tnq_validation.cif.gz | 1 MB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tn/7tnq ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tn/7tnq | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 26018MC 7tnsC 7tntC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 38817.699 Da / 分子数: 24 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ATCC 50611 / Me49 / 参照: UniProt: S8F1Y1 #2: タンパク質 | 分子量: 50166.645 Da / 分子数: 26 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ME49 / 参照: UniProt: P10873 #3: タンパク質 | 分子量: 50119.121 Da / 分子数: 26 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ATCC 50611 / Me49 / 参照: UniProt: A0A125YWG5 #4: タンパク質 | 分子量: 24939.332 Da / 分子数: 20 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ATCC 50611 / Me49 / 参照: UniProt: A0A125YMM3, protein-disulfide reductase #5: タンパク質 | 分子量: 21687.934 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ATCC 50611 / Me49 / 参照: UniProt: A0A125YFI4 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | Has protein modification | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: サブトモグラム平均法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: microtubule complex of tubulin and intra-luminal proteins タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) / 株: ME49 |
緩衝液 | pH: 7.2 / 詳細: Phosphate Buffered Saline |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Homemade |
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 295 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.9 sec. / 電子線照射量: 4.2 e/Å2 / Avg electron dose per subtomogram: 132 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 6 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 8.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 39122 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
EM volume selection | Num. of tomograms: 90 / Num. of volumes extracted: 39122 | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 7MIZ Accession code: 7MIZ / Source name: PDB / タイプ: experimental model |