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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ri8 | ||||||
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タイトル | The structure of BAM in MSP2N2 nanodiscs | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / BAM / EspP / hybrid barrel | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Bam protein complex / Gram-negative-bacterium-type cell outer membrane assembly / protein insertion into membrane / cell outer membrane / cell adhesion / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.5 Å | ||||||
データ登録者 | Wu, R.R. / Noinaj, N. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Plasticity within the barrel domain of BamA mediates a hybrid-barrel mechanism by BAM. 著者: Runrun Wu / Jeremy W Bakelar / Karl Lundquist / Zijian Zhang / Katie M Kuo / David Ryoo / Yui Tik Pang / Chen Sun / Tommi White / Thomas Klose / Wen Jiang / James C Gumbart / Nicholas Noinaj / 要旨: In Gram-negative bacteria, the biogenesis of β-barrel outer membrane proteins is mediated by the β-barrel assembly machinery (BAM). The mechanism employed by BAM is complex and so far- incompletely ...In Gram-negative bacteria, the biogenesis of β-barrel outer membrane proteins is mediated by the β-barrel assembly machinery (BAM). The mechanism employed by BAM is complex and so far- incompletely understood. Here, we report the structures of BAM in nanodiscs, prepared using polar lipids and native membranes, where we observe an outward-open state. Mutations in the barrel domain of BamA reveal that plasticity in BAM is essential, particularly along the lateral seam of the barrel domain, which is further supported by molecular dynamics simulations that show conformational dynamics in BAM are modulated by the accessory proteins. We also report the structure of BAM in complex with EspP, which reveals an early folding intermediate where EspP threads from the underside of BAM and incorporates into the barrel domain of BamA, supporting a hybrid-barrel budding mechanism in which the substrate is folded into the membrane sequentially rather than as a single unit. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ri8.cif.gz | 275.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ri8.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7ri8.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7ri8_validation.pdf.gz | 725.9 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7ri8_full_validation.pdf.gz | 850.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7ri8_validation.xml.gz | 63.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7ri8_validation.cif.gz | 94 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ri/7ri8 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ri/7ri8 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 90643.383 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: bamA, yaeT, yzzN, yzzY, b0177, JW0172 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A940 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 41918.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: bamB, FKC84_09770, JJT18_05970, JK375_05550 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A507WQ69 |
#3: タンパク質 | 分子量: 36875.277 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: W8SZY2 |
#4: タンパク質 | 分子量: 27858.350 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: C3SYV7 |
#5: タンパク質 | 分子量: 13530.256 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: bamE, GQM18_22650, HVW95_21150 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A3L5AP29 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Structure of BAM in nanodiscs using MSP2N2 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 210 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 濃度: 3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドのタイプ: Quantifoil R3.5/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
撮影 | 電子線照射量: 44.77 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.18rc1_3777: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 72244 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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