[日本語] English
万見
- PDB-7plm: CryoEM reconstruction of pyruvate ferredoxin oxidoreductase (PFOR... -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7plm
タイトルCryoEM reconstruction of pyruvate ferredoxin oxidoreductase (PFOR) in anaerobic conditions
要素Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase
キーワードOXIDOREDUCTASE / 4Fe-4S / anaerobic / PYRUVATE CATABOLISM / Electron Transport
機能・相同性
機能・相同性情報


pyruvate synthase / pyruvate synthase activity / thiamine pyrophosphate binding / electron transport chain / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / response to oxidative stress / iron ion binding / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase / Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase, EKR domain / Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase, EKR domain superfamily / Domain of unknown function / Domain of unknown function / : / Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase, core domain II / Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase core domain II / Pyruvate flavodoxin/ferredoxin oxidoreductase, pyrimidine binding domain / Pyruvate flavodoxin/ferredoxin oxidoreductase, thiamine diP-bdg ...Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase / Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase, EKR domain / Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase, EKR domain superfamily / Domain of unknown function / Domain of unknown function / : / Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase, core domain II / Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase core domain II / Pyruvate flavodoxin/ferredoxin oxidoreductase, pyrimidine binding domain / Pyruvate flavodoxin/ferredoxin oxidoreductase, thiamine diP-bdg / Pyruvate-flavodoxin oxidoreductase, central domain / Pyruvate/ketoisovalerate oxidoreductase, catalytic domain / Pyruvate ferredoxin/flavodoxin oxidoreductase / Transketolase C-terminal/Pyruvate-ferredoxin oxidoreductase domain II / Thiamine pyrophosphate enzyme, C-terminal TPP-binding / Thiamine pyrophosphate enzyme, C-terminal TPP binding domain / Thiamin diphosphate-binding fold / 4Fe-4S dicluster domain / 4Fe-4S ferredoxin, iron-sulphur binding, conserved site / 4Fe-4S ferredoxin-type iron-sulfur binding region signature. / 4Fe-4S ferredoxin-type iron-sulfur binding domain profile. / 4Fe-4S ferredoxin-type, iron-sulphur binding domain
類似検索 - ドメイン・相同性
IRON/SULFUR CLUSTER / THIAMINE DIPHOSPHATE / Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase
類似検索 - 構成要素
生物種Desulfocurvibacter africanus (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å
データ登録者Cherrier, M.V. / Vernede, X. / Fenel, D. / Martin, L. / Arragain, B. / Neumann, E. / Fontecilla Camps, J.C. / Schoehn, G. / Nicolet, Y.
資金援助 フランス, 4件
組織認可番号国
Agence Nationale de la Recherche (ANR)ANR-15-IDEX-02 フランス
Grenoble Instruct-ERIC Center (ISBG)UMS 3518 CNRS-CEA-UGA-EMBL フランス
French Infrastructure for Integrated Structural Biology (FRISBI)ANR-10-INSB-05-02 フランス
Grenoble Alliance for Integrated Structural Cell Biology (GRAL)ANR-10-LABX-49-01 フランス
引用ジャーナル: Biomolecules / 年: 2022
タイトル: Oxygen-Sensitive Metalloprotein Structure Determination by Cryo-Electron Microscopy.
著者: Mickaël V Cherrier / Xavier Vernède / Daphna Fenel / Lydie Martin / Benoit Arragain / Emmanuelle Neumann / Juan C Fontecilla-Camps / Guy Schoehn / Yvain Nicolet /
要旨: Metalloproteins are involved in key cell processes such as photosynthesis, respiration, and oxygen transport. However, the presence of transition metals (notably iron as a component of [Fe-S] ...Metalloproteins are involved in key cell processes such as photosynthesis, respiration, and oxygen transport. However, the presence of transition metals (notably iron as a component of [Fe-S] clusters) often makes these proteins sensitive to oxygen-induced degradation. Consequently, their study usually requires strict anaerobic conditions. Although X-ray crystallography has been the method of choice for solving macromolecular structures for many years, recently electron microscopy has also become an increasingly powerful structure-solving technique. We have used our previous experience with cryo-crystallography to develop a method to prepare cryo-EM grids in an anaerobic chamber and have applied it to solve the structures of apoferritin and the 3 [FeS]-containing pyruvate ferredoxin oxidoreductase (PFOR) at 2.40 Å and 2.90 Å resolution, respectively. The maps are of similar quality to the ones obtained under air, thereby validating our method as an improvement in the structural investigation of oxygen-sensitive metalloproteins by cryo-EM.
履歴
登録2021年8月31日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02022年3月23日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12022年4月6日Group: Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title

-
構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
A: Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase
B: Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)270,75914
ポリマ－267,6702
非ポリマー3,08912
水2,054114
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area30120 Å2
ΔGint-294 kcal/mol
Surface area70780 Å2
手法PISA

-
要素

-
タンパク質 , 1種, 2分子 AB

#1: タンパク質 Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase / PFOR / POR / Pyruvate synthase


分子量: 133835.109 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Desulfocurvibacter africanus (バクテリア)
遺伝子: por
発現宿主: Desulfocurvibacter africanus (バクテリア)
参照: UniProt: P94692, pyruvate synthase

-
非ポリマー , 5種, 126分子

#2: 化合物
ChemComp-SF4 / IRON/SULFUR CLUSTER


分子量: 351.640 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / 式: Fe4S4
#3: 化合物 ChemComp-TPP / THIAMINE DIPHOSPHATE / 3-[(4-アミノ-2-メチル-5-ピリミジニル)メチル]-4-メチル-5-[2-(ホスホノオキシホスフィナトオキシ)(以下略)


分子量: 425.314 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: C12H19N4O7P2S / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#4: 化合物 ChemComp-CA / CALCIUM ION / カルシウムジカチオン


分子量: 40.078 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Ca
#5: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 114 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

-
詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

-
試料調製

構成要素名称: PYRUVATE FERREDOXIN OXIDOREDUCTASE / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: NATURAL
分子量値: 0.267360 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Desulfocurvibacter africanus (バクテリア)
緩衝液pH: 8.4
緩衝液成分濃度: 10 mM / 名称: Tris
試料濃度: 2.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Monodisperse
試料支持グリッドの材料: COPPER/RHODIUM / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 295 K

-
電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: TFS GLACIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 3500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 500 nm
撮影電子線照射量: 60 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1304
画像スキャン動画フレーム数/画像: 60 / 利用したフレーム数/画像: 2-60

-
解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: (1.20.1_4487:phenix.real_space_refine) / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1RELION3.1粒子像選択
4CTFFIND4.1CTF補正
7PHENIXモデルフィッティング
9RELION3.1初期オイラー角割当
10RELION3.1最終オイラー角割当
12RELION3.1３次元再構成
13PHENIXモデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C2 (2回回転対称)
3次元再構成解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 180868 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: RECIPROCAL
原子モデル構築PDB-ID: 1B0P

1b0p


PDB chain-ID: A
精密化交差検証法: THROUGHOUT
原子変位パラメータBiso max: 100.48 Å2 / Biso mean: 32.3636 Å2 / Biso min: 0 Å2

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る