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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ozv | ||||||||||||||||||
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タイトル | SARS-CoV-2 RdRp with Molnupiravir/ NHC in the template strand base-paired with G | ||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | VIRAL PROTEIN / SARS-CoV-2 / RNA-dependent RNA polymerase / Molnupiravir (NHC) | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs ...protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs / Translation of Replicase and Assembly of the Replication Transcription Complex / TRAF3-dependent IRF activation pathway / Replication of the SARS-CoV-2 genome / snRNP Assembly / double membrane vesicle viral factory outer membrane / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エキソリボヌクレアーゼ / SARS coronavirus main proteinase / host cell endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment / 3'-5'-RNA exonuclease activity / symbiont-mediated suppression of host NF-kappaB cascade / 5'-3' DNA helicase activity / host cell endosome / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / symbiont-mediated degradation of host mRNA / mRNA guanylyltransferase / symbiont-mediated suppression of host ISG15-protein conjugation / G-quadruplex RNA binding / mRNA (guanine-N7)-methyltransferase / omega peptidase activity / methyltransferase cap1 / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of IRF3 activity / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / host cell Golgi apparatus / symbiont-mediated perturbation of host ubiquitin-like protein modification / DNA helicase / mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase activity / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / ubiquitinyl hydrolase 1 / cysteine-type deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; システインプロテアーゼ / host cell perinuclear region of cytoplasm / single-stranded RNA binding / host cell endoplasmic reticulum membrane / viral protein processing / lyase activity / RNA helicase / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway / induction by virus of host autophagy / viral translational frameshifting / RNA-directed RNA polymerase / copper ion binding / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / virus-mediated perturbation of host defense response / lipid binding / DNA-templated transcription / host cell nucleus / SARS-CoV-2 activates/modulates innate and adaptive immune responses / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) synthetic construct (人工物) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Kabinger, F. / Stiller, C. / Schmitzova, J. / Dienemann, C. / Kokic, G. / Hillen, H.S. / Hoebartner, C. / Cramer, P. | ||||||||||||||||||
資金援助 | ドイツ, 5件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Mechanism of molnupiravir-induced SARS-CoV-2 mutagenesis. 著者: Florian Kabinger / Carina Stiller / Jana Schmitzová / Christian Dienemann / Goran Kokic / Hauke S Hillen / Claudia Höbartner / Patrick Cramer / 要旨: Molnupiravir is an orally available antiviral drug candidate currently in phase III trials for the treatment of patients with COVID-19. Molnupiravir increases the frequency of viral RNA mutations and ...Molnupiravir is an orally available antiviral drug candidate currently in phase III trials for the treatment of patients with COVID-19. Molnupiravir increases the frequency of viral RNA mutations and impairs SARS-CoV-2 replication in animal models and in humans. Here, we establish the molecular mechanisms underlying molnupiravir-induced RNA mutagenesis by the viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). Biochemical assays show that the RdRp uses the active form of molnupiravir, β-D-N-hydroxycytidine (NHC) triphosphate, as a substrate instead of cytidine triphosphate or uridine triphosphate. When the RdRp uses the resulting RNA as a template, NHC directs incorporation of either G or A, leading to mutated RNA products. Structural analysis of RdRp-RNA complexes that contain mutagenesis products shows that NHC can form stable base pairs with either G or A in the RdRp active center, explaining how the polymerase escapes proofreading and synthesizes mutated RNA. This two-step mutagenesis mechanism probably applies to various viral polymerases and can explain the broad-spectrum antiviral activity of molnupiravir. #1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2021 タイトル: Mechanism of molnupiravir-induced SARS-CoV-2 mutagenesis 著者: Kabinger, F. / Stiller, C. / Schmitzova, J. / Dienemann, C. / Hillen, H.S. / Hobartner, C. / Cramer, P. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ozv.cif.gz | 207 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ozv.ent.gz | 155.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7ozv.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7ozv_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7ozv_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7ozv_validation.xml.gz | 38 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7ozv_validation.cif.gz | 55.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oz/7ozv ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oz/7ozv | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Non-structural protein ... , 2種, 2分子 BC
#2: タンパク質 | 分子量: 24161.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) 遺伝子: rep, 1a-1b / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P0DTD1 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 9279.776 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) 遺伝子: rep, 1a-1b / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P0DTD1 |
-RNA鎖 , 2種, 2分子 PT
#4: RNA鎖 | 分子量: 10258.101 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#5: RNA鎖 | 分子量: 10539.256 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-タンパク質 / 非ポリマー , 2種, 3分子 A
#1: タンパク質 | 分子量: 106780.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) 遺伝子: rep, 1a-1b 発現宿主: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) 参照: UniProt: P0DTD1 |
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#6: 化合物 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: RdRp / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 値: 183.81 kDa/nm / 実験値: NO |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 59.6 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.19.2_4158: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア | 名称: SerialEM / バージョン: 3.8 / カテゴリ: 画像取得 | ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 851168 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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