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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6u9g | ||||||
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タイトル | Structure of Francisella PdpA-VgrG Complex, half-lidded | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSPORT PROTEIN / T6SS Central Spike / Complex | ||||||
機能・相同性 | symbiont cell surface / host cell cytoplasm / Uncharacterized protein / Uncharacterized protein 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Francisella tularensis subsp. novicida (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.98 Å | ||||||
データ登録者 | Yang, X. / Clemens, D.L. / Lee, B.-Y. / Cui, Y. / Zhou, Z.H. / Horwitz, M.A. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2019 タイトル: Atomic Structure of the Francisella T6SS Central Spike Reveals a Unique α-Helical Lid and a Putative Cargo. 著者: Xue Yang / Daniel L Clemens / Bai-Yu Lee / Yanxiang Cui / Z Hong Zhou / Marcus A Horwitz / 要旨: Francisella bacteria rely on a phylogenetically distinct type VI secretion system (T6SS) to escape host phagosomes and cause the fatal disease tularemia, but the structural and molecular mechanisms ...Francisella bacteria rely on a phylogenetically distinct type VI secretion system (T6SS) to escape host phagosomes and cause the fatal disease tularemia, but the structural and molecular mechanisms involved are unknown. Here we report the atomic structure of the Francisella T6SS central spike complex, obtained by cryo-electron microscopy. Our structural and functional studies demonstrate that, unlike the single-protein spike composition of other T6SS subtypes, Francisella T6SS's central spike is formed by two proteins, PdpA and VgrG, akin to T4-bacteriophage gp27 and gp5, respectively, and that PdpA has unique characteristics, including a putative cargo within its cavity and an N-terminal helical lid. Structure-guided mutagenesis demonstrates that the PdpA N-terminal lid and C-terminal spike are essential to Francisella T6SS function. PdpA is thus both an adaptor, connecting VgrG to the tube, and a likely carrier of secreted cargo. These findings are important to understanding Francisella pathogenicity and designing therapeutics to combat tularemia. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6u9g.cif.gz | 412.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6u9g.ent.gz | 331.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6u9g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6u9g_validation.pdf.gz | 740.5 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6u9g_full_validation.pdf.gz | 757.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6u9g_validation.xml.gz | 60.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6u9g_validation.cif.gz | 93.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/u9/6u9g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/u9/6u9g | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 95469.961 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Francisella tularensis subsp. novicida (strain U112) (バクテリア) 株: U112 / 遺伝子: pdpA, FTN_1309 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0Q7H0 #2: タンパク質 | 分子量: 20539.779 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Francisella tularensis subsp. novicida (strain U112) (バクテリア) 株: U112 / 遺伝子: FTN_1312 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0Q7H3 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: PdpA-VgrG complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Francisella tularensis subsp. novicida U112 (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 298 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 47 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: Leginon / カテゴリ: 画像取得 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
対称性 | 点対称性: C3 (3回回転対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3.98 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 10343 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | 空間: REAL |