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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-45749 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of human claudin-4 complex with Clostridium perfringens enterotoxin, sFab COP-1, and Nanobody | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | claudin / Fab / enterotoxin / nanobody / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 paracellular transport / positive regulation of metallopeptidase activity / calcium-independent cell-cell adhesion via plasma membrane cell-adhesion molecules / Tight junction interactions / bicellular tight junction assembly / apicolateral plasma membrane / regulation of cell morphogenesis / tight junction / chloride channel activity / positive regulation of wound healing ...paracellular transport / positive regulation of metallopeptidase activity / calcium-independent cell-cell adhesion via plasma membrane cell-adhesion molecules / Tight junction interactions / bicellular tight junction assembly / apicolateral plasma membrane / regulation of cell morphogenesis / tight junction / chloride channel activity / positive regulation of wound healing / renal absorption / chloride channel complex / bicellular tight junction / lateral plasma membrane / establishment of skin barrier / basal plasma membrane / response to progesterone / female pregnancy / circadian rhythm / transmembrane signaling receptor activity / cell-cell junction / toxin activity / cell adhesion / positive regulation of cell migration / apical plasma membrane / structural molecule activity / extracellular region / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) / Homo sapiens (ヒト) / Clostridium perfringens (ウェルシュ菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.83 Å | |||||||||
データ登録者 | Vecchio AJ | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: To Be Published タイトル: Cryo-EM Structures of Clostridium perfringens Enterotoxin Bound to its Human Receptor, Claudin-4 著者: Vecchio AJ / Kossiakoff AA / Erramilli SK / Rathnayake SS | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_45749.map.gz | 88.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-45749-v30.xml emd-45749.xml | 23.4 KB 23.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_45749_fsc.xml | 11.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_45749.png | 81.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-45749.cif.gz | 7.3 KB | ||
その他 | emd_45749_half_map_1.map.gz emd_45749_half_map_2.map.gz | 165 MB 165 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-45749 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-45749 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_45749_validation.pdf.gz | 767.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_45749_full_validation.pdf.gz | 767 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_45749_validation.xml.gz | 20.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_45749_validation.cif.gz | 26.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-45749 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-45749 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 9cmiMC 9cmhC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_45749.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.827 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_45749_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_45749_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Human claudin-4 complex with Clostridium perfringens enterotoxin,...
全体 | 名称: Human claudin-4 complex with Clostridium perfringens enterotoxin, sFab COP-1, and Nanobody |
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要素 |
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-超分子 #1: Human claudin-4 complex with Clostridium perfringens enterotoxin,...
超分子 | 名称: Human claudin-4 complex with Clostridium perfringens enterotoxin, sFab COP-1, and Nanobody タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 / 詳細: 5-protein complex |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 120 KDa |
-分子 #1: Claudin-4
分子 | 名称: Claudin-4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 22.234332 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: GSMASMGLQV MGIALAVLGW LAVMLCCALP MWRVTAFIGS NIVTSQTIWE GLWMNCVVQS TGQMQCKVYD SLLALPQDLQ AARALVIIS IIVAALGVLL SVVGGKCTNC LEDESAKAKT MIVAGVVFLL AGLMVIVPVS WTAHNIIQDF YNPLVASGQK R EMGASLYV ...文字列: GSMASMGLQV MGIALAVLGW LAVMLCCALP MWRVTAFIGS NIVTSQTIWE GLWMNCVVQS TGQMQCKVYD SLLALPQDLQ AARALVIIS IIVAALGVLL SVVGGKCTNC LEDESAKAKT MIVAGVVFLL AGLMVIVPVS WTAHNIIQDF YNPLVASGQK R EMGASLYV GWAASGLLLL GGGLLCCNCP PRTDKPYSAK YSAARSAAAS NYV UniProtKB: Claudin-4 |
-分子 #2: Heat-labile enterotoxin B chain
分子 | 名称: Heat-labile enterotoxin B chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 詳細: Trypsin treated CpE / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Clostridium perfringens (ウェルシュ菌) |
分子量 | 理論値: 33.000582 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: TPINITNSNS NLSDGLYVID KGDGWILGEP SVVSSQILNP NETGTFSQSL TKSKEVSINV NFSVGFTSEF IQASVEYGFG ITIGEQNTI ERSVSTTAGP NEYVYYKVYA TYRKYQAIRI SHGNISDDGS IYKLTGIWLS KTSADSLGNI DQGSLIETGE R CVLTVPST ...文字列: TPINITNSNS NLSDGLYVID KGDGWILGEP SVVSSQILNP NETGTFSQSL TKSKEVSINV NFSVGFTSEF IQASVEYGFG ITIGEQNTI ERSVSTTAGP NEYVYYKVYA TYRKYQAIRI SHGNISDDGS IYKLTGIWLS KTSADSLGNI DQGSLIETGE R CVLTVPST DIEKEILDLA AATERLNLTD ALNSNPAGNL YDWRSSNSYP WTQKLNLHLT ITATGQKYRI LASKIVDFNI YS NNFNNLV KLEQSLGDGV KDHYVDISLD AGQYVLVMKA NSSYSGNYPY SILFQKFGLV PR UniProtKB: Heat-labile enterotoxin B chain |
-分子 #3: COP-1 sFab Heavy Chain
分子 | 名称: COP-1 sFab Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 28.064498 KDa |
配列 | 文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAEISEVQL VESGGGLVQP GGSLRLSCAA SGFNFSSSYI HWVRQAPGKG LEWVASISSS SGSTSYADS VKGRFTISAD TSKNTAYLQM NSLRAEDTAV YYCARWFHPW WWWEYLFRGA IDYWGQGTLV TVSSASTKGP S VFPLAPSS ...文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYAEISEVQL VESGGGLVQP GGSLRLSCAA SGFNFSSSYI HWVRQAPGKG LEWVASISSS SGSTSYADS VKGRFTISAD TSKNTAYLQM NSLRAEDTAV YYCARWFHPW WWWEYLFRGA IDYWGQGTLV TVSSASTKGP S VFPLAPSS KSTSGGTAAL GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NH KPSNTKV DKKVEPKSCD KTHT |
-分子 #4: Anti-Fab Nanobody
分子 | 名称: Anti-Fab Nanobody / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 13.175438 KDa |
配列 | 文字列: GSVQLQESGG GLVQPGGSLR LSCAASGRTI SRYAMSWFRQ APGKEREFVA VARRSGDGAF YADSVQGRFT VSRDDAKNTV YLQMNSLKP EDTAVYYCAI DSDTFYSGSY DYWGQGTQVT VS |
-分子 #5: COP-1 sFab Light Chain
分子 | 名称: COP-1 sFab Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 25.794859 KDa |
配列 | 文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYASDIQMTQ SPSSLSASVG DRVTITCRAS QSVSSAVAWY QQKPGKAPKL LIYSASSLYS GVPSRFSGS RSGTDFTLTI SSLQPEDFAT YYCQQSSSSL ITFGQGTKVE IKRTVAAPSV FIFPPSDSQL KSGTASVVCL L NNFYPREA ...文字列: MKKNIAFLLA SMFVFSIATN AYASDIQMTQ SPSSLSASVG DRVTITCRAS QSVSSAVAWY QQKPGKAPKL LIYSASSLYS GVPSRFSGS RSGTDFTLTI SSLQPEDFAT YYCQQSSSSL ITFGQGTKVE IKRTVAAPSV FIFPPSDSQL KSGTASVVCL L NNFYPREA KVQWKVDNAL QSGNSQESVT EQDSKDSTYS LSSTLTLSKA DYEKHKVYAC EVTHQGLSSP VTKSFNRGEC |
-分子 #6: Lauryl Maltose Neopentyl Glycol
分子 | 名称: Lauryl Maltose Neopentyl Glycol / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: AV0 |
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分子量 | 理論値: 1.005188 KDa |
Chemical component information | ChemComp-AV0: |
-分子 #7: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 5.6 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: 20 mM Hepes pH 7.4, 100 mM NaCl, and 0.003% LMNG | ||||||||||||
グリッド | モデル: UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. 詳細: glow-discharged for 30 seconds at 20 W using a Solarus 950 (Gatan) plasma cleaner | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum |
ソフトウェア | 名称: EPU |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6774 / 平均電子線量: 70.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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ソフトウェア | 名称: UCSF Chimera | ||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||
得られたモデル | PDB-9cmi: |