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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-41049 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM studies of the interplay between uS2 ribosomal protein and leaderless mRNA during bacterial translation initiation | |||||||||
マップデータ | rpsB11-withS2-S21 | |||||||||
試料 |
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キーワード | leaderless mRNA / Cryo-EM / 70S / HflX / RIBOSOME / bS21 / uS2 | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 transcription elongation-coupled chromatin remodeling / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding ...transcription elongation-coupled chromatin remodeling / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Bacteriophage sp. (ファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Bhattacharjee S / Gottesman ME / Frank J | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2024 タイトル: How Dedicated Ribosomes Translate a Leaderless mRNA. 著者: Francisco J Acosta-Reyes / Sayan Bhattacharjee / Max Gottesman / Joachim Frank / 要旨: In bacteriophage λ lysogens, the λcI repressor is encoded by the leaderless transcript (lmRNA) initiated at the λpRM promoter. Translation is enhanced in rpsB mutants deficient in ribosomal ...In bacteriophage λ lysogens, the λcI repressor is encoded by the leaderless transcript (lmRNA) initiated at the λpRM promoter. Translation is enhanced in rpsB mutants deficient in ribosomal protein uS2. Although translation initiation of lmRNA is conserved in bacteria, archaea, and eukaryotes, structural insight of a lmRNA translation initiation complex is missing. Here, we use cryo-EM to solve the structures of the uS2-deficient 70S ribosome of host E. coli mutant rpsB11 and the wild-type 70S complex with λcI lmRNA and fMet-tRNA. Importantly, the uS2-deficient 70S ribosome also lacks protein bS21. The anti-Shine-Dalgarno (aSD) region is structurally supported by bS21, so that the absence of the latter causes the aSD to divert from the normal mRNA exit pathway, easing the exit of lmRNA. A π-stacking interaction between the monitor base A1493 and A(+4) of lmRNA potentially acts as a recognition signal. Coulomb charge flow, along with peristalsis-like dynamics within the mRNA entrance channel due to the increased 30S head rotation caused by the absence of uS2, are likely to facilitate the propagation of lmRNA through the ribosome. These findings lay the groundwork for future research on the mechanism of translation and the co-evolution of lmRNA and mRNA that includes the emergence of a defined ribosome-binding site of the transcript. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_41049.map.gz | 200.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-41049-v30.xml emd-41049.xml | 75.1 KB 75.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_41049_fsc.xml | 14.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_41049.png | 116.1 KB | ||
マスクデータ | emd_41049_msk_1.map | 244.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-41049.cif.gz | 16.2 KB | ||
その他 | emd_41049_half_map_1.map.gz emd_41049_half_map_2.map.gz | 226.9 MB 226.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-41049 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-41049 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_41049_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_41049_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_41049_validation.xml.gz | 21.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_41049_validation.cif.gz | 27.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-41049 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-41049 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8t5dMC 8t5hC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_41049.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | rpsB11-withS2-S21 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.83 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_41049_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half1
ファイル | emd_41049_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2
ファイル | emd_41049_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Apo 70S at 900 ms
+超分子 #1: Apo 70S at 900 ms
+分子 #1: 50S ribosomal protein L32
+分子 #2: 50S ribosomal protein L33
+分子 #3: 50S ribosomal protein L34
+分子 #4: 50S ribosomal protein L35
+分子 #5: 50S ribosomal protein L36
+分子 #8: 50S ribosomal protein L2
+分子 #9: 50S ribosomal protein L3
+分子 #10: 50S ribosomal protein L4
+分子 #11: 50S ribosomal protein L5
+分子 #12: 50S ribosomal protein L6
+分子 #13: 50S ribosomal protein L13
+分子 #14: 50S ribosomal protein L14
+分子 #15: 50S ribosomal protein L15
+分子 #16: 50S ribosomal protein L16
+分子 #17: 50S ribosomal protein L17
+分子 #18: 50S ribosomal protein L18
+分子 #19: 50S ribosomal protein L19
+分子 #20: 50S ribosomal protein L20
+分子 #21: Ribosomal protein L21
+分子 #22: 50S ribosomal protein L22
+分子 #23: 50S ribosomal protein L23
+分子 #24: 50S ribosomal protein L24
+分子 #25: 50S ribosomal protein L25
+分子 #26: 50S ribosomal protein L27
+分子 #27: 50S ribosomal protein L28
+分子 #28: 50S ribosomal protein L29
+分子 #29: 50S ribosomal protein L30
+分子 #30: 30S ribosomal protein S2
+分子 #31: 30S ribosomal protein S3
+分子 #32: 30S ribosomal protein S4
+分子 #33: 30S ribosomal protein S5
+分子 #34: 30S ribosomal protein S6, non-modified isoform
+分子 #35: 30S ribosomal protein S7
+分子 #36: 30S ribosomal protein S8
+分子 #37: 30S ribosomal protein S9
+分子 #38: 30S ribosomal protein S10
+分子 #39: 30S ribosomal protein S11
+分子 #40: 30S ribosomal protein S12
+分子 #41: 30S ribosomal protein S13
+分子 #42: 30S ribosomal protein S14
+分子 #43: 30S ribosomal protein S15
+分子 #44: 30S ribosomal protein S16
+分子 #45: 30S ribosomal protein S17
+分子 #46: 30S ribosomal protein S18
+分子 #47: 30S ribosomal protein S19
+分子 #48: 30S ribosomal protein S20
+分子 #49: 30S ribosomal protein S21 (Fragment)
+分子 #50: Transcription termination/antitermination protein NusG
+分子 #6: 5S RNA
+分子 #7: 23S RNA
+分子 #51: 16s RNA
+分子 #52: lmRNA
+分子 #53: tRNA
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 58.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |