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- EMDB-39850: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-39850
タイトルCryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription initiation conformation
マップデータ
試料
  • 複合体: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription initiation conformation
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase acidic protein
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase basic protein 2
    • RNA: RNA (5'-R(*AP*GP*AP*GP*AP*AP*AP*UP*CP*AP*AP*GP*GP*CP*AP*GP*UP*U)-3')
    • RNA: RNA (5'-R(*GP*AP*CP*UP*GP*CP*CP*UP*GP*UP*UP*UP*UP*UP*GP*CP*U)-3')
  • リガンド: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER
キーワードRNA polymerase / TRANSCRIPTION
機能・相同性
機能・相同性情報


cap snatching / 7-methylguanosine mRNA capping / virion component / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / host cell nucleus / RNA binding
類似検索 - 分子機能
: / : / Polymerase basic protein 2 (PB2), '627' domain / Polymerase basic protein 2, cap-binding domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / : / Influenza RNA polymerase PB2 helical domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA, endonuclease domain ...: / : / Polymerase basic protein 2 (PB2), '627' domain / Polymerase basic protein 2, cap-binding domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / : / Influenza RNA polymerase PB2 helical domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA, endonuclease domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PA / RNA-directed RNA polymerase, negative-strand RNA virus / RdRp of negative ssRNA viruses with segmented genomes catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / Polymerase acidic protein / Polymerase basic protein 2
類似検索 - 構成要素
生物種Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.06 Å
データ登録者Xue L / Chang T / Li Z / Zhao H / Li M / He J / Chen X / Xiong X
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)82341085 to X.X. 中国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Cryo-EM structures of Thogoto virus polymerase reveal unique RNA transcription and replication mechanisms among orthomyxoviruses.
著者: Lu Xue / Tiancai Chang / Zimu Li / Chenchen Wang / Heyu Zhao / Mei Li / Peng Tang / Xin Wen / Mengmeng Yu / Jiqin Wu / Xichen Bao / Xiaojun Wang / Peng Gong / Jun He / Xinwen Chen / Xiaoli Xiong /
要旨: Influenza viruses and thogotoviruses account for most recognized orthomyxoviruses. Thogotoviruses, exemplified by Thogoto virus (THOV), are capable of infecting humans using ticks as vectors. THOV ...Influenza viruses and thogotoviruses account for most recognized orthomyxoviruses. Thogotoviruses, exemplified by Thogoto virus (THOV), are capable of infecting humans using ticks as vectors. THOV transcribes mRNA without the extraneous 5' end sequences derived from cap-snatching in influenza virus mRNA. Here, we report cryo-EM structures to characterize THOV polymerase RNA synthesis initiation and elongation. The structures demonstrate that THOV RNA transcription and replication are able to start with short dinucleotide primers and that the polymerase cap-snatching machinery is likely non-functional. Triggered by RNA synthesis, asymmetric THOV polymerase dimers can form without the involvement of host factors. We confirm that, distinctive from influenza viruses, THOV-polymerase RNA synthesis is weakly dependent of the host factors ANP32A/B/E in human cells. This study demonstrates varied mechanisms in RNA synthesis and host factor utilization among orthomyxoviruses, providing insights into the mechanisms behind thogotoviruses' broad-infectivity range.
履歴
登録2024年4月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年5月29日-
マップ公開2024年5月29日-
更新2024年6月19日-
現状2024年6月19日処理サイト: PDBc / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_39850.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_39850.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 34.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

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明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.9 Å/pix.
x 208 pix.
= 186.88 Å		0.9 Å/pix.
x 208 pix.
= 186.88 Å		0.9 Å/pix.
x 208 pix.
= 186.88 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.89846 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.01
最小 - 最大-0.040902164 - 0.08472482
平均 (標準偏差)0.00010885013 (±0.003703851)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ208208208
Spacing208208208
セルA=B=C: 186.87997 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_39850_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_39850_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_39850_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription ...

全体名称: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription initiation conformation
要素
  • 複合体: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription initiation conformation
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase acidic protein
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
    • タンパク質・ペプチド: Polymerase basic protein 2
    • RNA: RNA (5'-R(*AP*GP*AP*GP*AP*AP*AP*UP*CP*AP*AP*GP*GP*CP*AP*GP*UP*U)-3')
    • RNA: RNA (5'-R(*GP*AP*CP*UP*GP*CP*CP*UP*GP*UP*UP*UP*UP*UP*GP*CP*U)-3')
  • リガンド: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER

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超分子 #1: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription ...

超分子名称: Cryo-EM structure of Thogoto virus polymerase in a transcription initiation conformation
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)

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分子 #1: Polymerase acidic protein

分子名称: Polymerase acidic protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
分子量理論値: 71.623445 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MTDRPDHIDS RVWELSETQE DWITQVHGHV RRVVECWKYT ICCLISNMHT HRGAPQYDVF KWQDRSTIEW ICSKKKVQYP ERDTPDLYD NERAVAYKVL LVSDLSDHSP TSGIYHDLAF NLEGEAEESC ALVLRGSQLQ DIKGFLCRAL EWVVSNNLTQ E VVETISGE ...文字列:
MTDRPDHIDS RVWELSETQE DWITQVHGHV RRVVECWKYT ICCLISNMHT HRGAPQYDVF KWQDRSTIEW ICSKKKVQYP ERDTPDLYD NERAVAYKVL LVSDLSDHSP TSGIYHDLAF NLEGEAEESC ALVLRGSQLQ DIKGFLCRAL EWVVSNNLTQ E VVETISGE AKLQFSVGTT FRTLLKRDTD WDVIPTPRVE PNVPRIEGRR WTQMKKLPLL KEKEGPPSPW RALLLGADSE YI VCPPGTD QEAISWIHSQ SEIECIRESK STPASVITCL TSSLQSFAEG NPVRSRIHED IIAFGINKKQ EKKQSASSSA SGE WKRAEY QVEEMSLPPW VEEEMVLLRS DQEDNWIELE KNAIYTEVDG VAEGLVDKYI EIVGRTKVAS VIEKWQIAAT RTFS QLHTD RSRITACPII TRDPSGNCQF WGMVLLGPHH VKRDTDNAPL LIAEIMGEDT EEKYPKHSVF SLKVEEKQFL LSLKI TSFS RNKLYTFSNI RRVLIQPASI YSQVVLSRAA ENNSLNLEVN PEIQLYLEGA QRGMTLYQWV RMILCLEFLM AIYNNP QME GFLANMRRLH MSRHAMMERR QVFLPFGSRP EDKVNECIIN NPIVAYLAKG WNSMPNVYY

UniProtKB: Polymerase acidic protein

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分子 #2: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit

分子名称: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
分子量理論値: 81.432664 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MNLFTPLSEI NPTTTQELLY AYTGPAPVAY GTRTRAVLEN IIRPYQYFYK EPNVQRALDI KTGCKEPEDI NVEGPSSGFH TASVLKLAD NFFRKYRPAM EKLKYWILVK LPKLKYAELS KGRQTYSFIH KRNLPAPIAL EETVEFLEQN LRRKIGPTLL S YCQAIADV ...文字列:
MNLFTPLSEI NPTTTQELLY AYTGPAPVAY GTRTRAVLEN IIRPYQYFYK EPNVQRALDI KTGCKEPEDI NVEGPSSGFH TASVLKLAD NFFRKYRPAM EKLKYWILVK LPKLKYAELS KGRQTYSFIH KRNLPAPIAL EETVEFLEQN LRRKIGPTLL S YCQAIADV MELDETTYEG ARDPRPWDIQ LEEIDSDEED PLFRQVGREE TYTIKFSREE LWDQMRTLNT MWKHLERGRL NR RTIATPS MLIRGFVKIV EDAAKEILEN VPTSGVPVGG EEKLAKLASK QTFHTAVTGE LSGDQEKFNE CLDPDAMRLM WTV FLRKLG CPDWIMELFN IPFMVFKSKL ADMGEGLVYT KGKLTDRKPL GEMPSEFDDL VRNVVGNSIS CRLGMFMGMY NLTS TLLAL ISIEREELTG SHVESSDDFI HFFNCKTHEE MFKQAETLRL TLKLVGINMS PSKCILISPA GIGEFNSKFH HRDFV GNVA TELPALVPNG TNPMTDLAMG LNVIKHSVNT GQMNLCTGAL AMRIFNHAYK YAYMALGVTR RTRFMEENAI TPLLTN QGA SPVHSFSTMH LDEVALRRHL GLLDEETLRR ILNPNNPVTQ KGDPSMFFRI ENKMPQIMED YSVPSCFKYT LSRNRTI QD KPHKALLNKE ERYQRVTSII NKLFPEVLIQ EASAPGTVRE SLKRRLELVV ERSDLDEERK KRILSRIF

UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit

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分子 #3: Polymerase basic protein 2

分子名称: Polymerase basic protein 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
分子量理論値: 94.418578 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MDREEPAESE CTLRALVEEY NGACKEAPKE MSKQFTDYNT FKRYTTSKKD HAPQMRLVYS VRKPWPISMT PSKEIPLVFN GTKLKDTIL DLGESKRTRA NIVVPDYWSK YGSQTSLEVV NAILYAEDLK VQRFFSTEWG EIRYGRMLPF RKPVQACPTI E EVNPASIP ...文字列:
MDREEPAESE CTLRALVEEY NGACKEAPKE MSKQFTDYNT FKRYTTSKKD HAPQMRLVYS VRKPWPISMT PSKEIPLVFN GTKLKDTIL DLGESKRTRA NIVVPDYWSK YGSQTSLEVV NAILYAEDLK VQRFFSTEWG EIRYGRMLPF RKPVQACPTI E EVNPASIP HTLLQVFCPQ YTTLDSKRKA HMGAVEKLKR VMEPICKVQT QESAVHIARS LIDSNKKWLP TVVDHTPRTA EM AHFLCSK YHYVHTNTQD LSDTRSIDNL CGELVKRSLK CRCPKETLVA NLDKITIQGR PMREVLADHD GELPYLGICR VAM GLSTHH TMKIRSTKFS ILNSDHPRIE VKKVFSLSPD VQVTIPYRRF KGKAKVYFQN DQIQGYFSCT DRQIDEIKIS APKN APLLE PLLDICYYGS FIEPGFEQTF GFYPAGKREF VDSFFMHHSK DHKAFLIHMG LDKDLSLPLS PELNWKEPAL SKVCR VTEL DSTVQPYTSA TREFVLGETL NVYTQHENGL ELLICPTEIR STRGPLPPGT NLSGSEFIDI YQDPFSRAKS LLKSTI LHA ERCKEFVGNM LEEYQDPAET TVQSLVPINT WGKSAKRKLQ EEITSDPDWH QCPRKRAKMS YLAIIAGSIQ DRDKKQT NV PRAFMLRGSQ IEYDMKATRG LVVDTTNRII VGGETVLREG KGGPEGYVQT GVFEEQPRCY LVDTPDHGLS MGLSRFCV H SQGRYFQYEK KISIWEETDN IKATIDSQRD LKRRRDIEEM VSKRARIVLE VLFQGPGHHH HHHHHSADYK DDDDKGGWS HPQFEKGGGS GGGGSGGSAW SHPQFEK

UniProtKB: Polymerase basic protein 2

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分子 #4: RNA (5'-R(*AP*GP*AP*GP*AP*AP*AP*UP*CP*AP*AP*GP*GP*CP*AP*GP*UP*U)-3')

分子名称: RNA (5'-R(*AP*GP*AP*GP*AP*AP*AP*UP*CP*AP*AP*GP*GP*CP*AP*GP*UP*U)-3')
タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
分子量理論値: 5.84358 KDa
配列文字列:
AGAGAAAUCA AGGCAGUU

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分子 #5: RNA (5'-R(*GP*AP*CP*UP*GP*CP*CP*UP*GP*UP*UP*UP*UP*UP*GP*CP*U)-3')

分子名称: RNA (5'-R(*GP*AP*CP*UP*GP*CP*CP*UP*GP*UP*UP*UP*UP*UP*GP*CP*U)-3')
タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Thogoto virus (isolate SiAr 126) (ウイルス)
分子量理論値: 5.335125 KDa
配列文字列:
GACUGCCUGU UUUUGCU

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分子 #6: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER

分子名称: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: G2P
分子量理論値: 521.208 Da
Chemical component information

ChemComp-G2P:
PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER / GMPCPP / GMP-CPP, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 8
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k)
平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.4 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.06 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 36971
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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