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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29377 | |||||||||
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タイトル | AAV1 VP3 Only Capsid | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | AAV / gene therapy / capsid / VP3 / VIRUS LIKE PARTICLE | |||||||||
機能・相同性 | Phospholipase A2-like domain / Phospholipase A2-like domain / Parvovirus coat protein VP2 / Parvovirus coat protein VP1/VP2 / Parvovirus coat protein VP2 / Capsid/spike protein, ssDNA virus / T=1 icosahedral viral capsid / structural molecule activity / Capsid protein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Adeno-associated virus - 1 (アデノ随伴ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.27 Å | |||||||||
データ登録者 | Mietzsch M / McKenna R | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Ther Methods Clin Dev / 年: 2023 タイトル: Production and characterization of an AAV1-VP3-only capsid: An analytical benchmark standard. 著者: Mario Mietzsch / Weijing Liu / Ke Ma / Antonette Bennett / Austin R Nelson / Keely Gliwa / Paul Chipman / Xiaofeng Fu / Shane Bechler / Robert McKenna / Rosa Viner / 要旨: Adeno-associated viruses (AAVs) are non-enveloped ssDNA icosahedral T = 1 viruses used as vectors for clinical gene delivery. Currently, there are over 200 AAV-related clinical trials and six ...Adeno-associated viruses (AAVs) are non-enveloped ssDNA icosahedral T = 1 viruses used as vectors for clinical gene delivery. Currently, there are over 200 AAV-related clinical trials and six approved biologics on the market. As such new analytical methods are continually being developed to characterize and monitor the quality and purity of manufactured AAV vectors, these include ion-exchange chromatography and Direct Mass Technology. However, these methods require homogeneous analytical standards with a high molecular weight standard comparable to the mass of an AAV capsid. Described here is the design, production, purification, characterization, and the cryo-electron microscopy structure of an AAV1-VP3-only capsid that fulfills this need as a calibrant to determine capsid mass, charge, homogeneity, and transgene packaging characteristics. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29377.map.gz | 345.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29377-v30.xml emd-29377.xml | 14 KB 14 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_29377.png | 72.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-29377.cif.gz | 5.5 KB | ||
その他 | emd_29377_half_map_1.map.gz emd_29377_half_map_2.map.gz | 114.7 MB 114.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29377 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29377 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29377_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_29377_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29377_validation.xml.gz | 17.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29377_validation.cif.gz | 21.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29377 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29377 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8fq4MC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29377.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 371.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.939 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_29377_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_29377_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Adeno-associated virus - 1
全体 | 名称: Adeno-associated virus - 1 (アデノ随伴ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: Adeno-associated virus - 1
超分子 | 名称: Adeno-associated virus - 1 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / NCBI-ID: 85106 / 生物種: Adeno-associated virus - 1 / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: SEROTYPE / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
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分子量 | 理論値: 3.57 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / T番号(三角分割数): 1 |
-分子 #1: Capsid protein
分子 | 名称: Capsid protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 60 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Adeno-associated virus - 1 (アデノ随伴ウイルス) |
分子量 | 理論値: 58.299422 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: ADGVGNASGN WHCDSTWLGD RVITTSTRTW ALPTYNNHLY KQISSASTGA SNDNHYFGYS TPWGYFDFNR FHCHFSPRDW QRLINNNWG FRPKRLNFKL FNIQVKEVTT NDGVTTIANN LTSTVQVFSD SEYQLPYVLG SAHQGCLPPF PADVFMIPQY G YLTLNNGS ...文字列: ADGVGNASGN WHCDSTWLGD RVITTSTRTW ALPTYNNHLY KQISSASTGA SNDNHYFGYS TPWGYFDFNR FHCHFSPRDW QRLINNNWG FRPKRLNFKL FNIQVKEVTT NDGVTTIANN LTSTVQVFSD SEYQLPYVLG SAHQGCLPPF PADVFMIPQY G YLTLNNGS QAVGRSSFYC LEYFPSQMLR TGNNFTFSYT FEEVPFHSSY AHSQSLDRLM NPLIDQYLYY LNRTQNQSGS AQ NKDLLFS RGSPAGMSVQ PKNWLPGPCY RQQRVSKTKT DNNNSNFTWT GASKYNLNGR ESIINPGTAM ASHKDDEDKF FPM SGVMIF GKESAGASNT ALDNVMITDE EEIKATNPVA TERFGTVAVN FQSSSTDPAT GDVHAMGALP GMVWQDRDVY LQGP IWAKI PHTDGHFHPS PLMGGFGLKN PPPQILIKNT PVPANPPAEF SATKFASFIT QYSTGQVSVE IEWELQKENS KRWNP EVQY TSNYAKSANV DFTVDNNGLY TEPRPIGTRY LTRPL UniProtKB: Capsid protein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON APOLLO (4k x 4k) 平均電子線量: 59.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.84 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.48 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.27 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 4418 |
初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |