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- EMDB-20086: In situ structure of rotavirus VP1 RNA-dependent RNA polymerase (TLP) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20086
タイトルIn situ structure of rotavirus VP1 RNA-dependent RNA polymerase (TLP)
マップデータfiltered, B-sharpened, masked
試料Rhesus rotavirus != Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3])

Rhesus rotavirus

  • ウイルス: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Inner capsid protein VP2
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase
キーワードRotavirus / RNA-dependent RNA polymerase / VP1 / VP2 / VIRAL PROTEIN-TRANSFERASE complex
機能・相同性
機能・相同性情報


T=2 icosahedral viral capsid / viral inner capsid / viral genome replication / virion component / viral nucleocapsid / RNA-directed RNA polymerase / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Rotavirus VP1 RNA-directed RNA polymerase, C-terminal / Viral RNA-directed RNA polymerase, 4-helical domain / Rotavirus VP1 C-terminal domain / RNA-directed RNA polymerase, luteovirus / Rotavirus VP2 / Viral RNA-directed RNA-polymerase / Rotavirus VP2 protein / RNA-directed RNA polymerase, reovirus / RdRp of Reoviridae dsRNA viruses catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA-directed RNA polymerase / Inner capsid protein VP2
類似検索 - 構成要素
生物種Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å
データ登録者Jenni S / Salgado EN
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Human Genome Research Institute (NIH/NHGRI)CA-13202 米国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2019
タイトル: In situ Structure of Rotavirus VP1 RNA-Dependent RNA Polymerase.
著者: Simon Jenni / Eric N Salgado / Tobias Herrmann / Zongli Li / Timothy Grant / Nikolaus Grigorieff / Stefano Trapani / Leandro F Estrozi / Stephen C Harrison /
要旨: Rotaviruses, like other non-enveloped, double-strand RNA viruses, package an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) with each duplex of their segmented genomes. Rotavirus cell entry results in loss of ...Rotaviruses, like other non-enveloped, double-strand RNA viruses, package an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) with each duplex of their segmented genomes. Rotavirus cell entry results in loss of an outer protein layer and delivery into the cytosol of an intact, inner capsid particle (the "double-layer particle," or DLP). The RdRp, designated VP1, is active inside the DLP; each VP1 achieves many rounds of mRNA transcription from its associated genome segment. Previous work has shown that one VP1 molecule lies close to each 5-fold axis of the icosahedrally symmetric DLP, just beneath the inner surface of its protein shell, embedded in tightly packed RNA. We have determined a high-resolution structure for the rotavirus VP1 RdRp in situ, by local reconstruction of density around individual 5-fold positions. We have analyzed intact virions ("triple-layer particles"), non-transcribing DLPs and transcribing DLPs. Outer layer dissociation enables the DLP to synthesize RNA, in vitro as well as in vivo, but appears not to induce any detectable structural change in the RdRp. Addition of NTPs, Mg, and S-adenosylmethionine, which allows active transcription, results in conformational rearrangements, in both VP1 and the DLP capsid shell protein, that allow a transcript to exit the polymerase and the particle. The position of VP1 (among the five symmetrically related alternatives) at one vertex does not correlate with its position at other vertices. This stochastic distribution of site occupancies limits long-range order in the 11-segment, double-strand RNA genome.
履歴
登録2019年4月10日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年4月24日-
マップ公開2019年4月24日-
更新2024年3月20日-
現状2024年3月20日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 2
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 2
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6oj3
  • 表面レベル: 2
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_20086.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20086.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈filtered, B-sharpened, masked
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.23 Å/pix.
x 300 pix.
= 369. Å		1.23 Å/pix.
x 300 pix.
= 369. Å		1.23 Å/pix.
x 300 pix.
= 369. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.23 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 2.0 / ムービー #1: 2
最小 - 最大-6.1107807 - 9.959702500000001
平均 (標準偏差)0.018543862 (±0.42538026)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ300300300
Spacing300300300
セルA=B=C: 369.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.231.231.23
M x/y/z300300300
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z369.000369.000369.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-420-29
NX/NY/NZ887886
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS300300300
D min/max/mean-6.1119.9600.019

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_20086_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: filtered, B-sharpened

ファイルemd_20086_additional_1.map
注釈filtered, B-sharpened
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: filtered

ファイルemd_20086_additional_2.map
注釈filtered
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half-map 1, unmodified

ファイルemd_20086_half_map_1.map
注釈half-map 1, unmodified
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half-map 2, unmodified

ファイルemd_20086_half_map_2.map
注釈half-map 2, unmodified
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Rhesus rotavirus

全体名称: Rhesus rotavirus (ウイルス)
要素
  • ウイルス: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Inner capsid protein VP2
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase

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超分子 #1: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3])

超分子名称: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3])
タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: TLP / NCBI-ID: 444185
生物種: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3])
Sci species strain: RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]
ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SEROTYPE / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No

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分子 #1: Inner capsid protein VP2

分子名称: Inner capsid protein VP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 10 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
株: RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]
分子量理論値: 103.425992 KDa
配列文字列: MAYRKRGARR ETNLKQDDRM QEKEENKNVN TNSENKNATK PQLSEKVLSQ KEEVITDNQE EIKIADEVKK SNKEESKQLL EVLKTKEEH QKEVQYEILQ KTIPTFEPKE SILKKLEDIK PEQVKKQTKL FRIFEPRQLP VYRANGEKEL RNRWYWKLKR D TLPDGDYD ...文字列:
MAYRKRGARR ETNLKQDDRM QEKEENKNVN TNSENKNATK PQLSEKVLSQ KEEVITDNQE EIKIADEVKK SNKEESKQLL EVLKTKEEH QKEVQYEILQ KTIPTFEPKE SILKKLEDIK PEQVKKQTKL FRIFEPRQLP VYRANGEKEL RNRWYWKLKR D TLPDGDYD VREYFLNLYD QVLTEMPDYL LLKDMAVENK NSRDAGKVVD SETAAICDAI FQDEETEGVV RRFIAEMRQR VQ ADRNVVN YPSILHPIDH AFNEYFLQHQ LVEPLNNDII FNYIPERIRN DVNYILNMDR NLPSTARYIR PNLLQDRLNL HDN FESLWD TITTSNYILA RSVVPDLKEL VSTEAQIQKM SQDLQLEALT IQSETQFLTG INSQAANDCF KTLIAAMLSQ RTMS LDFVT TNYMSLISGM WLLTVVPNDM FIRESLVACQ LAIINTIIYP AFGMQRMHYR NGDPQTPFQI AEQQIQNFQV ANWLH FVNN NQFRQVVIDG VLNQVLNDNI RNGHVVNQLM EALMQLSRQQ FPTMPVDYKR SIQRGILLLS NRLGQLVDLT RLLAYN YET LMACITMNMQ HVQTLTTEKL QLTSVTSLCM LIGNATVIPS PQTLFHYYNV NVNFHSNYNE RINDAVAIIT AANRLNL YQ KKMKSIVEDF LKRLQIFDIS RVPDDQMYRL RDRLRLLPVE IRRLDIFNLI LMNMEQIERA SDKIAQGVII AYRDMQLE R DEMYGYVNIA RNLDGFQQIN LEELMRTGDY AQITNMLLNN QPVALVGALP FITDSSVISL VAKLDATVFA QIVKLRKVD TLKPILYKIN SDSNDFYLVA NYDWVPTSTT KVYKQIPQQF DFRASMHMLT SNLTFTVYSD LLAFVSADTV EPINAVAFDN MRIMNEL

UniProtKB: Inner capsid protein VP2

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分子 #2: RNA-directed RNA polymerase

分子名称: RNA-directed RNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase
由来(天然)生物種: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
株: RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]
分子量理論値: 125.276305 KDa
配列文字列: MGKYNLILSE YLSFIYNSQS AVQIPIYYSS NSELENRCIE FHSKCLENSK NGLSLKKLFV EYSDVIENAT LLSILSYSYD KYNAVERKL VKYAKGKPLE ADLTVNELDY ENNKITSELF PTAEEYTDLL MDPAILTSLS SNLNAVMFWL EKHENDVAEK L KIYKRRLD ...文字列:
MGKYNLILSE YLSFIYNSQS AVQIPIYYSS NSELENRCIE FHSKCLENSK NGLSLKKLFV EYSDVIENAT LLSILSYSYD KYNAVERKL VKYAKGKPLE ADLTVNELDY ENNKITSELF PTAEEYTDLL MDPAILTSLS SNLNAVMFWL EKHENDVAEK L KIYKRRLD LFTIVASTVN KYGVPRHNAK YRYEYEVMKD KPYYLVTWAN SSIEMLMSVF SHEDYLIARE LIVLSYSNRS TL AKLVSSP MSILVALVDI NGTFITNEEL ELEFSNKYVR AIVPDQTFDE LKQMLDNMRK AGLTDIPKMI QDWLVDCSIE KFP LMAKIY SWSFHVGFRK QKMLDAALDQ LKTEYTEDVD DEMYREYTML IRDEVVKMLE EPVKHDDHLL QDSELAGLLS MSSA SNGES RQLKFGRKTI FSTKKNMHVM DDMANGRYTP GIIPPVNVDK PIPLGRRDVP GRRTRIIFIL PYEYFIAQHA VVEKM LIYA KHTREYAEFY SQSNQLLSYG DVTRFLSNNS MVLYTDVSQW DSSQHNTQPF RKGIIMGLDM LANMTNDARV IQTLNL YKQ TQINLMDSYV QIPDGNVIKK IQYGAVASGE KQTKAANSIA NLALIKTVLS RISNKYSFAT KIIRVDGDDN YAVLQFN TE VTKQMVQDVS NDVRETYARM NTKVKALVST VGIEIAKRYI AGGKIFFRAG INLLNNEKKG QSTQWDQAAV LYSNYIVN R LRGFETDREF ILTKIMQMTS VAITGSLRLF PSERVLTTNS TFKVFDSEDF IIEYGTTDDE VYIQRAFMSL SSQKSGIAD EIAASSTFKN YVSRLSEQLL FSKNNIVSRG IALTEKAKLN SYAPISLEKR RAQISALLTM LQKPVTFKSS KITINDILRD IKPFFTVNE AHLPIQYQKF MPTLPDNVQY IIQCIGSRTY QIEDDGSKSA ISRLISKYSV YKPSIEELYK VISLHENEIQ L YLISLGIP KIDADTYVGS KIYSQDKYRI LESYVYNLLS INYGCYQLFD FNSPDLEKLI RIPFKGKIPA VTFILHLYAK LE VINHAIK NGSWISLFCN YPKSEMIKLW KKMWNITSLR SPYTNANFFQ D

UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッド詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI POLARA 300
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 64.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cisTEM (ver. 1.01) / ソフトウェア - 詳細: FrealignX / 使用した粒子像数: 30606
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-6oj3:
In situ structure of rotavirus VP1 RNA-dependent RNA polymerase (TLP)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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