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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Arabidopsis thaliana R2T complex | |||||||||
![]() | Arabidopsis thaliana R2T complex | |||||||||
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![]() | RUVBL1 / RUVBL2 / R2TP / HSP90 / Chaperone | |||||||||
機能・相同性 | ![]() meristem development / regulation of defense response to fungus / flower development / Swr1 complex / plastid / ATP-dependent activity, acting on DNA / helicase activity / DNA helicase / cell differentiation / nucleolus ...meristem development / regulation of defense response to fungus / flower development / Swr1 complex / plastid / ATP-dependent activity, acting on DNA / helicase activity / DNA helicase / cell differentiation / nucleolus / ATP hydrolysis activity / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.68 Å | |||||||||
![]() | Lopez-Perrote A / Llorca O | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: The structure of the R2T complex reveals a different architecture from the related HSP90 cochaperone R2TP. 著者: Alberto Palacios-Abella / Andrés López-Perrote / Jasminka Boskovic / Sandra Fonseca / Cristina Úrbez / Vicente Rubio / Oscar Llorca / David Alabadí / ![]() 要旨: The R2TP complex is a specialized HSP90 cochaperone essential for the maturation of macromolecular complexes such as RNAPII and TORC1. R2TP is formed by a hetero-hexameric ring of AAA-ATPases RuvBL1 ...The R2TP complex is a specialized HSP90 cochaperone essential for the maturation of macromolecular complexes such as RNAPII and TORC1. R2TP is formed by a hetero-hexameric ring of AAA-ATPases RuvBL1 and RuvBL2, which interact with RPAP3 and PIH1D1. Several R2TP-like complexes have been described, but these are less well characterized. Here, we identified, characterized and determined the cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of R2T from Arabidopsis thaliana, which lacks PIH1D1 and is probably the only form of the complex in seed plants. In contrast to R2TP, R2T is organized as two rings of AtRuvBL1-AtRuvBL2a interacting back-to-back, with one AtRPAP3 anchored per ring. AtRPAP3 has no effect on the ATPase activity of AtRuvBL1-AtRuvBL2a and binds with a different stoichiometry than in human R2TP. We show that the interaction of AtRPAP3 with AtRuvBL2a and AtHSP90 occurs via a conserved mechanism. However, the distinct architectures of R2T and R2TP suggest differences in their functions and mechanisms. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 111.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 33.8 KB 33.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.4 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 552 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 8.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | 97.2 MB 97.2 MB 96.2 MB 97.5 MB 97.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 756.1 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 755.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 18.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 24.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9eq2MC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Arabidopsis thaliana R2T complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.921 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Sharpened map (Postprocess) for the Arabidopsis thaliana R2T complex
ファイル | emd_19894_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened map (Postprocess) for the Arabidopsis thaliana R2T complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Arabidopsis thaliana dodecameric R2T complex II (containing a...
ファイル | emd_19894_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Arabidopsis thaliana dodecameric R2T complex II (containing a AtRUVBL1-AtRUVBL2 hetero-dodecamer in complex with 1 AtRPAP3 RBD domain) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Arabidopsis thaliana dodecameric R2T complex I (containing a...
ファイル | emd_19894_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Arabidopsis thaliana dodecameric R2T complex I (containing a AtRUVBL1-AtRUVBL2 hetero-dodecamer in complex with 2 AtRPAP3 RBD domains) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 1 (unfil) for the Arabidopsis thaliana R2T complex
ファイル | emd_19894_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 1 (unfil) for the Arabidopsis thaliana R2T complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 2 (unfil) for the Arabidopsis thaliana R2T complex
ファイル | emd_19894_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 2 (unfil) for the Arabidopsis thaliana R2T complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : AtR2T complex
全体 | 名称: AtR2T complex |
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要素 |
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-超分子 #1: AtR2T complex
超分子 | 名称: AtR2T complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 / 詳細: AtRuvBL1-AtRuvBL2a in complex with AtRPAP3 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 700 KDa |
-分子 #1: RuvB-like protein 1
分子 | 名称: RuvB-like protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: Protein sequence contains a N-terminal 10xHistidine tag and TEV protease cleavage site that do not affect protein activity nor structure コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 53.750754 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH HHSSGENLYF QGSHMLEDPM EKVKIEEIQS TAKKQRIATH THIKGLGLEP TGIPIKLAAG FVGQLEAREA AGLVVDMIK QKKMAGKALL LAGPPGTGKT ALALGISQEL GSKVPFCPMV GSEVYSSEVK KTEVLMENFR RAIGLRIKET K EVYEGEVT ...文字列: MGSSHHHHHH HHSSGENLYF QGSHMLEDPM EKVKIEEIQS TAKKQRIATH THIKGLGLEP TGIPIKLAAG FVGQLEAREA AGLVVDMIK QKKMAGKALL LAGPPGTGKT ALALGISQEL GSKVPFCPMV GSEVYSSEVK KTEVLMENFR RAIGLRIKET K EVYEGEVT ELSPEETESL TGGYGKSISH VVITLKTVKG TKHLKLDPTI YDALIKEKVA VGDVIYIEAN SGAVKRVGRS DA FATEFDL EAEEYVPLPK GEVHKKKEIV QDVTLQDLDA ANARPQGGQD ILSLMGQMMK PRKTEITDKL RQEINKVVNR YID EGVAEL VPGVLFIDEV HMLDMECFSY LNRALESSLS PIVIFATNRG VCNVRGTDMP SPHGVPIDLL DRLVIIRTQI YDPS EMIQI IAIRAQVEEL TVDEECLVLL GEIGQRTSLR HAVQLLSPAS IVAKMNGRDN ICKADIEEVT SLYLDAKSSA KLLHE QQEK YIS UniProtKB: RuvB-like protein 1 |
-分子 #2: RuvB-like helicase
分子 | 名称: RuvB-like helicase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 詳細: Protein sequence contains a stretch of 18 residues extra at the N-terminus due to cloning design that does not affect protein activity nor structure コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 54.007848 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MADLNWISAG HAIADVGTMA ELKLSESRDL TRVERIGAHS HIRGLGLDSA LEPRAVSEGM VGQVKARKAA GVILQMIREG KIAGRAILI AGQPGTGKTA IAMGMAKSLG LETPFAMIAG SEIFSLEMSK TEALTQSFRK AIGVRIKEET EVIEGEVVEV Q IDRPASSG ...文字列: MADLNWISAG HAIADVGTMA ELKLSESRDL TRVERIGAHS HIRGLGLDSA LEPRAVSEGM VGQVKARKAA GVILQMIREG KIAGRAILI AGQPGTGKTA IAMGMAKSLG LETPFAMIAG SEIFSLEMSK TEALTQSFRK AIGVRIKEET EVIEGEVVEV Q IDRPASSG VASKSGKMTM KTTDMETVYD MGAKMIEALN KEKVQSGDVI AIDKATGKIT KLGRSFSRSR DYDAMGAQTK FV QCPEGEL QKRKEVVHCV TLHEIDVINS RTQGFLALFT GDTGEIRSEV REQIDTKVAE WREEGKAEIV PGVLFIDEVH MLD IECFSF LNRALENEMS PILVVATNRG VTTIRGTNQK SPHGIPIDLL DRLLIITTQP YTDDDIRKIL EIRCQEEDVE MNEE AKQLL TLIGRDTSLR YAIHLITAAA LSCQKRKGKV VEVEDIQRVY RLFLDVRRSM QYLVEYQSQY MFSEPIKNDE AAAED EQDA MQI UniProtKB: RuvB-like helicase |
-分子 #3: At1g56440
分子 | 名称: At1g56440 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 詳細: Protein sequence contains a N-terminal His-tag followed by an IF2D1 tag and a TEV protease site, and C-terminal Strep-II tag with HRV 3C protease site that do not affect protein activity nor structure コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 59.14498 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH HHHHMTDVTI KGGENLYFQG MARSPSKHGR DQTQDFQGFF NDLQDWELSL KDKDKKIKQQ PANSSNPSSE TFRPSGSGK YDFAKKYRSI RDLSSSLIGE SLLDSSSEKE QGNEFFKQKK FNEAIDCYSR SIALSPNAVT YANRAMAYLK I KRYREAEV ...文字列: MGSSHHHHHH HHHHMTDVTI KGGENLYFQG MARSPSKHGR DQTQDFQGFF NDLQDWELSL KDKDKKIKQQ PANSSNPSSE TFRPSGSGK YDFAKKYRSI RDLSSSLIGE SLLDSSSEKE QGNEFFKQKK FNEAIDCYSR SIALSPNAVT YANRAMAYLK I KRYREAEV DCTEALNLDD RYIKAYSRRA TARKELGMIK EAKEDAEFAL RLEPESQELK KQYADIKSLL EKEIIEKATG AM QSTAQEL LKTSGLDKKI QKPKTEMTSK PVTLVAKTNR DIVQPVLGSN ESSGKKLIEN IQPEEKSKEG SMKIPAITEI LDS KKVTPG SQSYEKEAKP SDRNGTQPSG PENQVSKQLE LKPSVQELAA HAASLAMTEA SKNIKTPKSA YEFENSWRSF SGDS ALRSQ LLKVTTPSSL PQIFKNALTS PVLVDIIKCV ASFFTEDMDL AVKYIENLTK VPRFNMLVMC LTSTEKNELL KIWED VFCN KATPMEYAEV LDKLRSRYCL KQLEVLFQGP WSHPQFEK UniProtKB: At1g56440 |
-分子 #4: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 3 / 式: ADP |
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分子量 | 理論値: 427.201 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-ADP: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.8 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R0.6/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 45 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 100.0 kPa | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 50.12 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: BACKBONE TRACE |
得られたモデル | ![]() PDB-9eq2: |