+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-18603 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | E. coli DNA gyrase bound to a linear part of a DNA minicircle | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | DNA-protein complex / type IIA topoisomerase DNA gyrase / ISOMERASE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus ...negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / DNA-templated transcription / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Vayssieres M / Lamour V / Marechal N | |||||||||
資金援助 | フランス, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2024 タイトル: Structural basis of DNA crossover capture by DNA gyrase. 著者: Marlène Vayssières / Nils Marechal / Long Yun / Brian Lopez Duran / Naveen Kumar Murugasamy / Jonathan M Fogg / Lynn Zechiedrich / Marc Nadal / Valérie Lamour / 要旨: DNA supercoiling must be precisely regulated by topoisomerases to prevent DNA entanglement. The interaction of type IIA DNA topoisomerases with two DNA molecules, enabling the transport of one duplex ...DNA supercoiling must be precisely regulated by topoisomerases to prevent DNA entanglement. The interaction of type IIA DNA topoisomerases with two DNA molecules, enabling the transport of one duplex through the transient double-stranded break of the other, remains elusive owing to structures derived solely from single linear duplex DNAs lacking topological constraints. Using cryo-electron microscopy, we solved the structure of DNA gyrase bound to a negatively supercoiled minicircle DNA. We show how DNA gyrase captures a DNA crossover, revealing both conserved molecular grooves that accommodate the DNA helices. Together with molecular tweezer experiments, the structure shows that the DNA crossover is of positive chirality, reconciling the binding step of gyrase-mediated DNA relaxation and supercoiling in a single structure. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_18603.map.gz | 203.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-18603-v30.xml emd-18603.xml | 20.3 KB 20.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_18603_fsc.xml | 12.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_18603.png | 67.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-18603.cif.gz | 6.9 KB | ||
その他 | emd_18603_half_map_1.map.gz emd_18603_half_map_2.map.gz | 200.5 MB 200.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18603 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18603 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_18603_validation.pdf.gz | 845.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_18603_full_validation.pdf.gz | 844.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_18603_validation.xml.gz | 21.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_18603_validation.cif.gz | 27.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18603 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18603 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8qqsMC 8qdxC 8qquC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_18603.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.862 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_18603_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_18603_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : E. coli DNA gyrase in complex with dsDNA minicircles
全体 | 名称: E. coli DNA gyrase in complex with dsDNA minicircles |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: E. coli DNA gyrase in complex with dsDNA minicircles
超分子 | 名称: E. coli DNA gyrase in complex with dsDNA minicircles タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
分子量 | 理論値: 745 KDa |
-超分子 #2: E. coli DNA gyrase
超分子 | 名称: E. coli DNA gyrase / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-超分子 #3: dsDNA minicircles
超分子 | 名称: dsDNA minicircles / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3-#4 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
-分子 #1: DNA gyrase subunit A
分子 | 名称: DNA gyrase subunit A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 97.072578 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSDLAREITP VNIEEELKSS YLDYAMSVIV GRALPDVRDG LKPVHRRVLY AMNVLGNDWN KAYKKSARVV GDVIGKYHPH GDSAVYDTI VRMAQPFSLR YMLVDGQGNF GSIDGDSAAA MRFTEIRLAK IAHELMADLE KETVDFVDNY DGTEKIPDVM P TKIPNLLV ...文字列: MSDLAREITP VNIEEELKSS YLDYAMSVIV GRALPDVRDG LKPVHRRVLY AMNVLGNDWN KAYKKSARVV GDVIGKYHPH GDSAVYDTI VRMAQPFSLR YMLVDGQGNF GSIDGDSAAA MRFTEIRLAK IAHELMADLE KETVDFVDNY DGTEKIPDVM P TKIPNLLV NGSSGIAVGM ATNIPPHNLT EVINGCLAYI DDEDISIEGL MEHIPGPDFP TAAIINGRRG IEEAYRTGRG KV YIRARAE VEVDAKTGRE TIIVHEIPYQ VNKARLIEKI AELVKEKRVE GISALRDESD KDGMRIVIEV KRDAVGEVVL NNL YSQTQL QVSFGINMVA LHHGQPKIMN LKDIIAAFVR HRREVVTRRT IFELRKARDR AHILEALAVA LANIDPIIEL IRHA PTPAE AKTALVANPW QLGNVAAMLE RAGDDAARPE WLEPEFGVRD GLYYLTEQQA QAILDLRLQK LTGLEHEKLL DEYKE LLDQ IAELLRILGS ADRLMEVIRE ELELVREQFG DKRRTEITAN SADINLEDLI TQEDVVVTLS HQGYVKYQPL SEYEAQ RRG GKGKSAARIK EEDFIDRLLV ANTHDHILCF SSRGRVYSMK VYQLPEATRG ARGRPIVNLL PLEQDERITA ILPVTEF EE GVKVFMATAN GTVKKTVLTE FNRLRTAGKV AIKLVDGDEL IGVDLTSGED EVMLFSAEGK VVRFKESSVR AMGCNTTG V RGIRLGEGDK VVSLIVPRGD GAILTATQNG YGKRTAVAEY PTKSRATKGV ISIKVTERNG LVVGAVQVDD CDQIMMITD AGTLVRTRVS EISIVGRNTQ GVILIRTAED ENVVGLQRVA EPVDEEDLDT IDGSAAEGDD EIAPEVDVDD EPEEE UniProtKB: DNA gyrase subunit A |
-分子 #2: DNA gyrase subunit B
分子 | 名称: DNA gyrase subunit B / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 90.073922 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSNSYDSSSI KVLKGLDAVR KRPGMYIGDT DDGTGLHHMV FEVVDNAIDE ALAGHCKEII VTIHADNSVS VQDDGRGIPT GIHPEEGVS AAEVIMTVLH AGGKFDDNSY KVSGGLHGVG VSVVNALSQK LELVIQREGK IHRQIYEHGV PQAPLAVTGE T EKTGTMVR ...文字列: MSNSYDSSSI KVLKGLDAVR KRPGMYIGDT DDGTGLHHMV FEVVDNAIDE ALAGHCKEII VTIHADNSVS VQDDGRGIPT GIHPEEGVS AAEVIMTVLH AGGKFDDNSY KVSGGLHGVG VSVVNALSQK LELVIQREGK IHRQIYEHGV PQAPLAVTGE T EKTGTMVR FWPSLETFTN VTEFEYEILA KRLRELSFLN SGVSIRLRDK RDGKEDHFHY EGGIKAFVEY LNKNKTPIHP NI FYFSTEK DGIGVEVALQ WNDGFQENIY CFTNNIPQRD GGTHLAGFRA AMTRTLNAYM DKEGYSKKAK VSATGDDARE GLI AVVSVK VPDPKFSSQT KDKLVSSEVK SAVEQQMNEL LAEYLLENPT DAKIVVGKII DAARAREAAR RAREMTRRKG ALDL AGLPG KLADCQERDP ALSELYLVEG DSAGGSAKQG RNRKNQAILP LKGKILNVEK ARFDKMLSSQ EVATLITALG CGIGR DEYN PDKLRYHSII IMTDADVDGS HIRTLLLTFF YRQMPEIVER GHVYIAQPPL YKVKKGKQEQ YIKDDEAMDQ YQISIA LDG ATLHTNASAP ALAGEALEKL VSEYNATQKM INRMERRYPK AMLKELIYQP TLTEADLSDE QTVTRWVNAL VSELNDK EQ HGSQWKFDVH TNAEQNLFEP IVRVRTHGVD TDYPLDHEFI TGGEYRRICT LGEKLRGLLE EDAFIERGER RQPVASFE Q ALDWLVKESR RGLSIQRYKG LGEMNPEQLW ETTMDPESRR MLRVTVKDAI AADQLFTTLM GDAVEPRRAF IEENALKAA NIDI UniProtKB: DNA gyrase subunit B |
-分子 #3: DNA (30-MER)
分子 | 名称: DNA (30-MER) / タイプ: dna / ID: 3 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
---|---|
由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 9.080827 KDa |
配列 | 文字列: (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT) |
-分子 #4: DNA (30-MER)
分子 | 名称: DNA (30-MER) / タイプ: dna / ID: 4 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
---|---|
由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 9.351247 KDa |
配列 | 文字列: (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 46.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |