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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16599 | |||||||||||||||
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タイトル | Cytochrome c maturation complex CcmABCD, E154Q, ATP-bound | |||||||||||||||
マップデータ | sharpened map | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | Cytochrome c maturation / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 cytochrome c biosynthetic process / heme import across plasma membrane / ABC-type heme transporter / heme transmembrane transporter activity / ABC-type heme transporter activity / cytochrome complex assembly / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / heme binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli K-12 (大腸菌) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.62 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Ilcu L / Zhang L / Einsle O | |||||||||||||||
資金援助 | European Union, ドイツ, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Architecture of the Heme-translocating CcmABCD/E complex required for Cytochrome c maturation. 著者: Lorena Ilcu / Lukas Denkhaus / Anton Brausemann / Lin Zhang / Oliver Einsle / 要旨: Mono- and multiheme cytochromes c are post-translationally matured by the covalent attachment of heme. For this, Escherichia coli employs the most complex type of maturation machineries, the Ccm- ...Mono- and multiheme cytochromes c are post-translationally matured by the covalent attachment of heme. For this, Escherichia coli employs the most complex type of maturation machineries, the Ccm-system (for cytochrome c maturation). It consists of two membrane protein complexes, one of which shuttles heme across the membrane to a mobile chaperone that then delivers the cofactor to the second complex, an apoprotein:heme lyase, for covalent attachment. Here we report cryo-electron microscopic structures of the heme translocation complex CcmABCD from E. coli, alone and bound to the heme chaperone CcmE. CcmABCD forms a heterooctameric complex centered around the ABC transporter CcmAB that does not by itself transport heme. Our data suggest that the complex flops a heme group from the inner to the outer leaflet at its CcmBC interfaces, driven by ATP hydrolysis at CcmA. A conserved heme-handling motif (WxWD) at the periplasmic side of CcmC rotates the heme by 90° for covalent attachment to the heme chaperone CcmE that we find interacting exclusively with the CcmB subunit. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16599.map.gz | 48.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16599-v30.xml emd-16599.xml | 20.2 KB 20.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_16599.png | 124.2 KB | ||
その他 | emd_16599_additional_1.map.gz emd_16599_half_map_1.map.gz emd_16599_half_map_2.map.gz | 47.1 MB 48.8 MB 48.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16599 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16599 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16599_validation.pdf.gz | 811.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16599_full_validation.pdf.gz | 810.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16599_validation.xml.gz | 11.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16599_validation.cif.gz | 13.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16599 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16599 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16599.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 52.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | sharpened map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.878 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: unsharpened map
ファイル | emd_16599_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | unsharpened map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map A
ファイル | emd_16599_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map A
ファイル | emd_16599_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Complex of cytochrome c maturation sysmtem I, Ccm(AB)2CD
全体 | 名称: Complex of cytochrome c maturation sysmtem I, Ccm(AB)2CD |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex of cytochrome c maturation sysmtem I, Ccm(AB)2CD
超分子 | 名称: Complex of cytochrome c maturation sysmtem I, Ccm(AB)2CD タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #1: Cytochrome c biogenesis ATP-binding export protein CcmA
分子 | 名称: Cytochrome c biogenesis ATP-binding export protein CcmA タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ABC-type heme transporter |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 24.410729 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MASWSHPQFE KMGMLEAREL LCERDERTLF SGLSFTLNAG EWVQITGSNG AGKTTLLRLL TGLSRPDAGE VLWQGQPLHQ VRDSYHQNL LWIGHQPGIK TRLTALENLH FYHRDGDTAQ CLEALAQAGL AGFEDIPVNQ LSAGQQRRVA LARLWLTRAT L WILDQPFT ...文字列: MASWSHPQFE KMGMLEAREL LCERDERTLF SGLSFTLNAG EWVQITGSNG AGKTTLLRLL TGLSRPDAGE VLWQGQPLHQ VRDSYHQNL LWIGHQPGIK TRLTALENLH FYHRDGDTAQ CLEALAQAGL AGFEDIPVNQ LSAGQQRRVA LARLWLTRAT L WILDQPFT AIDVNGVDRL TQRMAQHTEQ GGIVILTTHQ PLNVAESKIR RISLTQTRAA UniProtKB: Cytochrome c biogenesis ATP-binding export protein CcmA |
-分子 #2: Heme exporter protein B
分子 | 名称: Heme exporter protein B / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 23.632676 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MMFWRIFRLE LRVAFRHSAE IANPLWFFLI VITLFPLSIG PEPQLLARIA PGIIWVAALL SSLLALERLF RDDLQDGSLE QLMLLPLPL PAVVLAKVMA HWMVTGLPLL ILSPLVAMLL GMDVYGWQVM ALTLLLGTPT LGFLGAPGVA LTVGLKRGGV L LSILVLPL ...文字列: MMFWRIFRLE LRVAFRHSAE IANPLWFFLI VITLFPLSIG PEPQLLARIA PGIIWVAALL SSLLALERLF RDDLQDGSLE QLMLLPLPL PAVVLAKVMA HWMVTGLPLL ILSPLVAMLL GMDVYGWQVM ALTLLLGTPT LGFLGAPGVA LTVGLKRGGV L LSILVLPL TIPLLIFATA AMDAASMHLP VDGYLAILGA LLAGTATLSP FATAAALRIS IQ UniProtKB: Heme exporter protein B |
-分子 #3: Heme exporter protein C
分子 | 名称: Heme exporter protein C / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 27.911264 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MWKTLHQLAI PPRLYQICGW FIPWLAIASV VVLTVGWIWG FGFAPADYQQ GNSYRIIYLH VPAAIWSMGI YASMAVAAFI GLVWQMKMA NLAVAAMAPI GAVFTFIALV TGSAWGKPMW GTWWVWDARL TSELVLLFLY VGVIALWHAF DDRRLAGRAA G ILVLIGVV ...文字列: MWKTLHQLAI PPRLYQICGW FIPWLAIASV VVLTVGWIWG FGFAPADYQQ GNSYRIIYLH VPAAIWSMGI YASMAVAAFI GLVWQMKMA NLAVAAMAPI GAVFTFIALV TGSAWGKPMW GTWWVWDARL TSELVLLFLY VGVIALWHAF DDRRLAGRAA G ILVLIGVV NLPIIHYSVE WWNTLHQGST RMQQSIDPAM RSPLRWSIFG FLLLSATLTL MRMRNLILLM EKRRPWVSEL IL KRGRK UniProtKB: Heme exporter protein C |
-分子 #4: Heme exporter protein D
分子 | 名称: Heme exporter protein D / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 7.753103 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MTPAFASWNE FFAMGGYAFF VWLAVVMTVI PLVVLVVHSV MQHRAILRGV AQQRAREARL RAAQQQEAA UniProtKB: Heme exporter protein D |
-分子 #5: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 2 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #6: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 2 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ChemComp-ATP: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.62 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 355914 |
初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |