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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14065 | |||||||||
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タイトル | Torpedo muscle-type nicotinic acetylcholine receptor - carbamylcholine-bound conformation | |||||||||
マップデータ | Sharpened map out of refinement | |||||||||
試料 |
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キーワード | pentameric ligand-gated ion channel / nicotinic receptor / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 acetylcholine-gated monoatomic cation-selective channel activity / transmitter-gated monoatomic ion channel activity involved in regulation of postsynaptic membrane potential / transmembrane signaling receptor activity / postsynaptic membrane / neuron projection 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Tetronarce californica (エイ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.23 Å | |||||||||
データ登録者 | Zarkadas E / Pebay-Peyroula E | |||||||||
資金援助 | カナダ, 2件
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引用 | ジャーナル: Neuron / 年: 2022 タイトル: Conformational transitions and ligand-binding to a muscle-type nicotinic acetylcholine receptor. 著者: Eleftherios Zarkadas / Eva Pebay-Peyroula / Mackenzie John Thompson / Guy Schoehn / Tomasz Uchański / Jan Steyaert / Christophe Chipot / Francois Dehez / John Edward Baenziger / Hugues Nury / 要旨: Fast synaptic communication requires receptors that respond to the presence of neurotransmitter by opening an ion channel across the post-synaptic membrane. The muscle-type nicotinic acetylcholine ...Fast synaptic communication requires receptors that respond to the presence of neurotransmitter by opening an ion channel across the post-synaptic membrane. The muscle-type nicotinic acetylcholine receptor from the electric fish, Torpedo, is the prototypic ligand-gated ion channel, yet the structural changes underlying channel activation remain undefined. Here we use cryo-EM to solve apo and agonist-bound structures of the Torpedo nicotinic receptor embedded in a lipid nanodisc. Using both a direct biochemical assay to define the conformational landscape and molecular dynamics simulations to assay flux through the pore, we correlate structures with functional states and elucidate the motions that lead to pore activation of a heteromeric nicotinic receptor. We highlight an underappreciated role for the complementary subunit in channel gating, establish the structural basis for the differential agonist affinities of α/δ versus α /γ sites, and explain why nicotine is less potent at muscle nicotinic receptors compared to neuronal ones. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14065.map.gz | 59.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-14065-v30.xml emd-14065.xml | 21.4 KB 21.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_14065.png | 65 KB | ||
マスクデータ | emd_14065_msk_1.map emd_14065_msk_2.map | 64 MB 64 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-14065.cif.gz | 6.9 KB | ||
その他 | emd_14065_additional_1.map.gz emd_14065_half_map_1.map.gz emd_14065_half_map_2.map.gz | 32.2 MB 59.5 MB 59.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14065 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14065 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_14065_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_14065_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_14065_validation.xml.gz | 12.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_14065_validation.cif.gz | 14.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14065 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14065 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14065.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Sharpened map out of refinement | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.145 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_14065_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_14065_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unsharpened map from refinement
ファイル | emd_14065_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unsharpened map from refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map A
ファイル | emd_14065_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map B
ファイル | emd_14065_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Torpedo muscle-type nicotinic acetylcholine receptor
全体 | 名称: Torpedo muscle-type nicotinic acetylcholine receptor |
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要素 |
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-超分子 #1: Torpedo muscle-type nicotinic acetylcholine receptor
超分子 | 名称: Torpedo muscle-type nicotinic acetylcholine receptor タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 / 詳細: Native receptor reconstituted in lipidic nanodiscs. |
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由来(天然) | 生物種: Tetronarce californica (エイ) |
分子量 | 理論値: 250 KDa |
-分子 #1: Acetylcholine receptor subunit alpha
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Tetronarce californica (エイ) |
分子量 | 理論値: 50.168164 KDa |
配列 | 文字列: SEHETRLVAN LLENYNKVIR PVEHHTHFVD ITVGLQLIQL ISVDEVNQIV ETNVRLRQQW IDVRLRWNPA DYGGIKKIRL PSDDVWLPD LVLYNNADGD FAIVHMTKLL LDYTGKIMWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDQ QNCTMKLGIW TYDGTKVSIS P ESDRPDLS ...文字列: SEHETRLVAN LLENYNKVIR PVEHHTHFVD ITVGLQLIQL ISVDEVNQIV ETNVRLRQQW IDVRLRWNPA DYGGIKKIRL PSDDVWLPD LVLYNNADGD FAIVHMTKLL LDYTGKIMWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDQ QNCTMKLGIW TYDGTKVSIS P ESDRPDLS TFMESGEWVM KDYRGWKHWV YYTCCPDTPY LDITYHFIMQ RIPLYFVVNV IIPCLLFSFL TGLVFYLPTD SG EKMTLSI SVLLSLTVFL LVIVELIPST SSAVPLIGKY MLFTMIFVIS SIIITVVVIN THHRSPSTHT MPQWVRKIFI DTI PNVMFF STMKRASKEK QENKIFADDI DISDISGKQV TGEVIFQTPL IKNPDVKSAI EGVKYIAEHM KSDEESSNAA EEWK YVAMV IDHILLCVFM LICIIGTVSV FAGRLIELSQ EG UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit alpha |
-分子 #2: Acetylcholine receptor subunit beta
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Tetronarce californica (エイ) |
分子量 | 理論値: 53.731773 KDa |
配列 | 文字列: SVMEDTLLSV LFETYNPKVR PAQTVGDKVT VRVGLTLTNL LILNEKIEEM TTNVFLNLAW TDYRLQWDPA AYEGIKDLRI PSSDVWQPD IVLMNNNDGS FEITLHVNVL VQHTGAVSWQ PSAIYRSSCT IKVMYFPFDW QNCTMVFKSY TYDTSEVTLQ H ALDAKGER ...文字列: SVMEDTLLSV LFETYNPKVR PAQTVGDKVT VRVGLTLTNL LILNEKIEEM TTNVFLNLAW TDYRLQWDPA AYEGIKDLRI PSSDVWQPD IVLMNNNDGS FEITLHVNVL VQHTGAVSWQ PSAIYRSSCT IKVMYFPFDW QNCTMVFKSY TYDTSEVTLQ H ALDAKGER EVKEIVINKD AFTENGQWSI EHKPSRKNWR SDDPSYEDVT FYLIIQRKPL FYIVYTIIPC ILISILAILV FY LPPDAGE KMSLSISALL AVTVFLLLLA DKVPETSLSV PIIIRYLMFI MILVAFSVIL SVVVLNLHHR SPNTHTMPNW IRQ IFIETL PPFLWIQRPV TTPSPDSKPT IISRANDEYF IRKPAGDFVC PVDNARVAVQ PERLFSEMKW HLNGLTQPVT LPQD LKEAV EAIKYIAEQL ESASEFDDLK KDWQYVAMVA DRLFLYVFFV ICSIGTFSIF LDASHNVPPD NPFA UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit beta |
-分子 #3: Acetylcholine receptor subunit delta
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit delta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Tetronarce californica (エイ) |
分子量 | 理論値: 57.625711 KDa |
配列 | 文字列: VNEEERLIND LLIVNKYNKH VRPVKHNNEV VNIALSLTLS NLISLKETDE TLTSNVWMDH AWYDHRLTWN ASEYSDISIL RLPPELVWI PDIVLQNNND GQYHVAYFCN VLVRPNGYVT WLPPAIFRSS CPINVLYFPF DWQNCSLKFT ALNYDANEIT M DLMTDTID ...文字列: VNEEERLIND LLIVNKYNKH VRPVKHNNEV VNIALSLTLS NLISLKETDE TLTSNVWMDH AWYDHRLTWN ASEYSDISIL RLPPELVWI PDIVLQNNND GQYHVAYFCN VLVRPNGYVT WLPPAIFRSS CPINVLYFPF DWQNCSLKFT ALNYDANEIT M DLMTDTID GKDYPIEWII IDPEAFTENG EWEIIHKPAK KNIYPDKFPN GTNYQDVTFY LIIRRKPLFY VINFITPCVL IS FLASLAF YLPAESGEKM STAISVLLAQ AVFLLLTSQR LPETALAVPL IGKYLMFIMS LVTGVIVNCG IVLNFHFRTP STH VLSTRV KQIFLEKLPR ILHMSRADES EQPDWQNDLK LRRSSSVGYI SKAQEYFNIK SRSELMFEKQ SERHGLVPRV TPRI GFGNN NENIAASDQL HDEIKSGIDS TNYIVKQIKE KNAYDEEVGN WNLVGQTIDR LSMFIITPVM VLGTIFIFVM GNFNH PPAK PFEGDPFDYS SDHPRCA UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit delta |
-分子 #4: Acetylcholine receptor subunit gamma
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit gamma / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Tetronarce californica (エイ) |
分子量 | 理論値: 56.335684 KDa |
配列 | 文字列: ENEEGRLIEK LLGDYDKRII PAKTLDHIID VTLKLTLTNL ISLNEKEEAL TTNVWIEIQW NDYRLSWNTS EYEGIDLVRI PSELLWLPD VVLENNVDGQ FEVAYYANVL VYNDGSMYWL PPAIYRSTCP IAVTYFPFDW QNCSLVFRSQ TYNAHEVNLQ L SAEEGEAV ...文字列: ENEEGRLIEK LLGDYDKRII PAKTLDHIID VTLKLTLTNL ISLNEKEEAL TTNVWIEIQW NDYRLSWNTS EYEGIDLVRI PSELLWLPD VVLENNVDGQ FEVAYYANVL VYNDGSMYWL PPAIYRSTCP IAVTYFPFDW QNCSLVFRSQ TYNAHEVNLQ L SAEEGEAV EWIHIDPEDF TENGEWTIRH RPAKKNYNWQ LTKDDTDFQE IIFFLIIQRK PLFYIINIIA PCVLISSLVV LV YFLPAQA GGQKCTLSIS VLLAQTIFLF LIAQKVPETS LNVPLIGKYL IFVMFVSMLI VMNCVIVLNV SLRTPNTHSL SEK IKHLFL GFLPKYLGMQ LEPSEETPEK PQPRRRSSFG IMIKAEEYIL KKPRSELMFE EQKDRHGLKR VNKMTSDIDI GTTV DLYKD LANFAPEIKS CVEACNFIAK STKEQNDSGS ENENWVLIGK VIDKACFWIA LLLFSIGTLA IFLTGHFNQV PEFPF PGDP RKYVP UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit gamma |
-分子 #8: 2-[(AMINOCARBONYL)OXY]-N,N,N-TRIMETHYLETHANAMINIUM
分子 | 名称: 2-[(AMINOCARBONYL)OXY]-N,N,N-TRIMETHYLETHANAMINIUM / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 2 / 式: CCE |
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分子量 | 理論値: 147.195 Da |
Chemical component information | ChemComp-CCE: |
-分子 #9: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 9 / コピー数: 1 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ChemComp-NAG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.65 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.23 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 47646 |
初期 角度割当 | タイプ: OTHER |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |